LABORATÓRNA DIAGNOSTIKA DYZENTÉRIE, AMEBIÁZY A BALANTYDIÁZY

V moderných podmienkach, v ojedinelých prípadoch alebo v malých ohniskových ohniskách črevné ochorenia, často sa vyskytujúce s nejasnými príznakmi, laboratórne metódy výskumu majú veľký praktický význam.

Výskum vykonávaný na diagnostické účely by sa mal vykonávať s prísnym dodržiavaním stanovených odporúčaní a čo najskôr.

Zber výkalov na výskum sa vykonáva do čistých riadov (nočné vázy, podstielky), ktoré neobsahujú zvyšky dezinfekčných prostriedkov, materiál na výskum sa odoberá z rektálnej sliznice tampónmi pri sigmoidoskopii.

Na bakteriologické potvrdenie diagnózy je lepšie odobrať výkaly od pacientov s úplavicou pred liečbou antibiotikami a sulfónamidmi a určiť bakterionosiča - po liečbe týmito liekmi.

Výsev na Petriho misky je potrebné vykonať ihneď po odbere materiálu.

V prvom rade vykonať makroskopické vyšetrenie výkaly, pričom dokážu zistiť: zvyšky jedla - kúsky mäsa, zvyšky tuku, rastlinná potrava a patologické nečistoty - hlien viskóznej konzistencie vo forme hrudiek (nepriehľadný pri úplavici a transparentný pri amébióze); krv nezmenená pri úplavici a peptickom vrede spodná časť hrubé črevo inej etiológie a zmenená farba („malinové želé“) s amébiózou, balantidiázou; hnis sa zistí pri ťažkých protrahovaných formách dyzentérie.

Mikroskopické vyšetrenie výkalov sa používa na detekciu bunkových elementov krvi, améb, balantidií a ich cýst. Natívny prípravok sa pripraví nasledovne: na podložné sklíčko sa nanesie hrudka stolice a vedľa nej kvapka izotonického roztoku chloridu sodného, ​​premieša sa a prikryje sa krycím sklíčkom. Na farbenie prvokov sa používa Lugolov roztok.

Na rozlíšenie bunkových prvkov krvi sa prípravky ošetria lazúrou Romanovsky-Giemsa alebo azúrovým eozínom. Pri dyzentérii v prípravku pripravenom z hlienu sa nachádza veľa neutrofilných granulocytov (viac ako 90 % všetkých bunkových elementov), ​​jednotlivé eozinofilné granulocyty (eozinofily) a rôzny počet erytrocytov; s amebiázou je málo bunkových elementov, ich hlavnou hmotou sú zmenené bunky s pyknotickým jadrom a úzkym okrajom protoplazmy. Nájdite eozinofilné granulocyty a Charcot-Leidenove kryštály.

Tkanivové formy améby (Entamoeba histolytica) v nefarbenom preparáte sú bezfarebné, pohyblivé (pomocou pseudopódií), v predĺženom stave dosahujú 50-60 µm, často sa nachádzajú v endoplazme s erytrocytmi a na periférii - jadro. Prítomnosť erytrocytov v bunke umožňuje odlíšiť Entamoeba histolutica od nepatogénnych foriem (E. hartmani, E. coli.).

Priesvitná forma améby je menšia (do 20 mikrónov), neaktívna a neobsahuje erytrocyty. Cysty sú ešte menšie (10-12 mikrónov), zaoblené, nehybné; v raných štádiách vývoja obsahujú 2 jadrá a zrelé - 4. V prípravkoch farbených Lugolovým roztokom sú jadrá améb a ich cysty svetlohnedé (obr. 6).

Balantidia(Balantidium coli) - veľké nálevníky, niekedy dosahujúce dĺžku 200 mikrónov a 50-70 mikrónov v priemere, pohyblivé v dôsledku prítomnosti riasiniek, majú otvory v ústach (peristome) a konečníku (cytopygus). V endoplazme sú viditeľné veľké (makronukleá) a malé (mikronukleá) jadrá, vakuoly, zachytené erytrocyty. Cysty balantidií sú nepohyblivé, zaoblené, s priemerom 50–60 μm, majú dvojobrysovú membránu, vo vnútri obsahujú makronukleá a vakuoly (obr. 7).

Bakteriologické vyšetrenie výkalov pri bacilárnej dyzentérii je najlepšie vykonať krátko po defekácii, pričom je potrebné odobrať materiál (hlien a hnis) z posledných porcií výkalov. Skúšobný materiál sa naočkuje slučkou na Petriho misky s elektívnymi médiami (Ploskirev, Ploskirev + levomycetin, Levin) a umiestni sa do termostatu na 18-24 hodín pri teplote +37 ° C. Na druhý deň je podozrivý (bezfarebný) kolónie sa subkultivujú na Resselovom médiu a skúmavky sa umiestnia na jeden deň do termostatu pri teplote +370 C. Na tretí deň po získaní čistej kultúry sa pripravia nátery na mikroskopiu a štúdium pohyblivosti (shigelly sú nepohyblivé) . Aglutinačná reakcia sa nastaví na pohári s typovo špecifickými sérami, najprv so sérami proti typom prevládajúcim v danej oblasti, a potom sa rozmiestni a naočkuje do „pestrofarebného“ radu, aby sa určili biochemické vlastnosti izolovanej kultúry.

Pôvodcovia dyzentérie nefermentujú laktózu a sacharózu (okrem Sonne), nerozkladajú glukózu (na kyselinu), netvoria sírovodík.

Konečná odpoveď o bakteriologické vyšetrenie dať na 5. deň. Niekedy sa izolujú atypické kmene patogénu, kultúry, ktoré stratili aglutinovateľnosť a s inými znakmi. V takýchto prípadoch štúdie pokračujú dlhšie.

Existujú aj zrýchlené bakteriologické metódy - preočkovanie podozrivých kolónií z Petriho misiek po 18-20 hodinách od začiatku štúdie do 2 skúmaviek s Resselovým médiom (šikmý agar s 1% laktózy a 0,1% glukózy - v jednej a 1% sacharózy a 0,1 % manitol - v inom). Po 4 hodinách sa už môže objaviť rast kolónií, z ktorých sa pripravujú nátery, farbia sa podľa Grama, študuje sa pohyblivosť a nastavuje sa približná aglutinačná reakcia so sérami proti najbežnejším patogénom v danej oblasti. Takže už na druhý deň môžete dať predbežnú odpoveď. Konečná odpoveď je daná na tretí deň po zohľadnení výsledkov sejby na „pestrofarebnom“ riadku a podrobnej aglutinačnej reakcii.

Inokulácia patogénov dyzentérie nie je vždy rovnaká, závisí od mnohých faktorov - spôsobu odberu materiálu na výskum, kvality médií a iných dôvodov, z ktorých jedným je počet patogénov na jednotku objemu výkalov. Je dokázané, že pôvodcovia dyzentérie sa vysievajú v tých prípadoch, keď sú v jednom grame výkalov minimálne stovky miliónov mikrobiálnych teliesok. AT zriedkavé prípady z krvi je možné izolovať pôvodcu dyzentérie.

V prítomnosti luminiscenčného mikroskopu, špecifických sér s fluorochrómmi je študentom ukázaná metóda priamej fluorescencie protilátok.

Je tiež možné vyvolať aglutináciu s krvným sérom pacienta a diagnostickými prostriedkami, avšak titre protilátok u pacientov s dyzentériou sú nízke a navyše sa často vyskytujú paraaglutinačné javy, čo sťažuje získanie spoľahlivých výsledkov. Citlivejšia je reakcia nepriamej hemaglutinácie (IHA) so štandardnými erytrocytovými diagnostikami. Pomocnou výskumnou metódou je intradermálny alergický test s úplavicou podľa D. A. Tsuverkalova, ktorý sa berie do úvahy po 24 hodinách podľa veľkosti vytvorenej papule.

je akútna črevná infekcia spôsobená baktériami rodu Shigella, charakterizovaná prevládajúcou lokalizáciou patologický proces v sliznici hrubého čreva. Dyzentéria sa prenáša fekálno-orálnou cestou (potravou alebo vodou). Klinicky má pacient s dyzentériou hnačky, bolesti brucha, tenesmy, syndróm intoxikácie (slabosť, únava, nevoľnosť). Diagnóza dyzentérie sa stanovuje izoláciou patogénu z výkalov pacienta, s úplavicou Grigoriev-Shiga - z krvi. Liečba prebieha prevažne ambulantne a pozostáva z rehydratačnej, antibakteriálnej a detoxikačnej terapie.

Všeobecné informácie

je akútna črevná infekcia spôsobená baktériami rodu Shigella, charakterizovaná prevládajúcou lokalizáciou patologického procesu v sliznici hrubého čreva.

Charakteristika budiča

Pôvodcami dyzentérie sú shigella, v súčasnosti zastúpené štyrmi druhmi (S. dysenteriae, S. flexneri, S. boydii, S. Sonnei), z ktorých každý (s výnimkou Sonne shigella) je zase rozdelený na sérovary, ktoré v súčasnosti ich je viac ako päťdesiat. Populácia S. Sonnei je homogénna v antigénnom zložení, ale líši sa schopnosťou produkovať rôzne enzýmy. Shigella sú nepohyblivé gramnegatívne tyčinky, netvoria spóry, dobre sa množia na živných pôdach a sú zvyčajne nestabilné vo vonkajšom prostredí.

Optimálna teplota prostredia pre shigellu je 37 °C, prúty Sonne sú schopné rozmnožovania pri teplote 10-15 °C, môžu vytvárať kolónie v mlieku a mliečnych výrobkoch, môžu zostať životaschopné vo vode po dlhú dobu (ako Flexnerova shigella) , odolný voči antibakteriálnym látkam . Shigella rýchlo zomrie pri zahrievaní: okamžite - po varení, po 10 minútach - pri teplote viac ako 60 stupňov.

Rezervoárom a zdrojom úplavice je človek – chorý alebo asymptomatický nosič. Najväčší epidemiologický význam majú pacienti s ľahkou alebo obliterovanou formou dyzentérie, najmä s potravinárskym priemyslom a inštitúciami. Stravovanie. Shigely sa izolujú z tela infikovanej osoby, počnúc prvými dňami klinických príznakov, infekčnosť pretrváva 7-10 dní, nasleduje obdobie rekonvalescencie, v ktorej je však možná aj izolácia baktérií (niekedy môže trvať niekoľko týždňov a mesiacov).

Flexnerova dyzentéria je najviac náchylná na prechod do chronickej formy, najmenší sklon k chronickej forme sa pozoruje pri infekcii spôsobenej baktériami Sonne. Dyzentéria sa prenáša fekálno-orálnym mechanizmom najmä potravou (Sonneho dyzentéria) alebo vodnou (Flexnerova dyzentéria) cestou. Pri prenose dyzentérie Grigoriev-Shiga sa realizuje prevažne kontaktná prenosová cesta v domácnostiach.

Ľudia majú vysokú prirodzenú náchylnosť na infekciu, po prekonaní dyzentérie sa vytvára nestabilná typovo špecifická imunita. Tí, ktorí sa vyliečili z Flexnerovej úplavice, si môžu zachovať postinfekčnú imunitu, ktorá chráni pred opakovanou infekciou niekoľko rokov.

Patogenéza dyzentérie

Shigella sa prijíma potravou alebo vodou zažívacie ústrojenstvo(čiastočne odumierajú pod vplyvom kyslého obsahu žalúdka a normálnej črevnej biocenózy) a dostanú sa do hrubého čreva, čiastočne preniknú do jeho sliznice a spôsobia zápalovú reakciu. Sliznica postihnutá shigellou je náchylná na tvorbu oblastí erózie, vredov a krvácaní. Toxíny uvoľňované baktériami narúšajú trávenie a prítomnosť Shigelly ničí prirodzenú biologickú rovnováhu črevnej flóry.

Klasifikácia

V súčasnosti sa uplatňuje klinická klasifikáciaúplavica. Rozlišuje sa jej akútna forma (líši sa v prevládajúcich príznakoch na typickú kolitídu a atypickú gastroenteritídu), chronickú dyzentériu (recidivujúcu a kontinuálnu) a bakteriálnu exkréciu (rekonvalescentnú alebo subklinickú).

Príznaky dyzentérie

Inkubačná doba akútna dyzentéria môže trvať jeden deň až týždeň, najčastejšie 2-3 dni. Variant kolitídy dyzentérie zvyčajne začína akútne, telesná teplota stúpa na febrilné hodnoty, objavujú sa príznaky intoxikácie. Chuť do jedla je výrazne znížená, môže úplne chýbať. Niekedy je nevoľnosť, vracanie. Pacienti sa sťažujú na intenzívne reznú bolesť v bruchu, spočiatku rozliaty, neskôr sústredený v pravej bedrovej oblasti a v podbrušku. Bolesť je sprevádzaná častými (až 10-krát denne) hnačkami, pohyby čriev rýchlo strácajú fekálnu konzistenciu, sú vzácne a sú v nich zaznamenané patologické nečistoty - krv, hlien, niekedy hnis ("rektálny pľuvanec"). Nutkanie na stolicu je neznesiteľne bolestivé (tenesmus), niekedy falošné. Celkový počet denných pohybov čriev spravidla nie je veľký.

Pri vyšetrení je jazyk suchý, pokrytý plakmi, tachykardiou a niekedy arteriálnou hypotenziou. Akútne klinické príznaky zvyčajne začínajú ustupovať a nakoniec vymiznú koncom prvého týždňa, začiatkom druhého týždňa, ale ulcerózne defekty sliznice sa zvyčajne úplne zahoja do mesiaca. Závažnosť priebehu variantu kolitídy je určená intenzitou syndrómu intoxikácie a bolesti a trvaním akútneho obdobia. V závažných prípadoch sú zaznamenané poruchy vedomia spôsobené ťažkou intoxikáciou, frekvencia stolice (ako „rektálne pľuvanie“ alebo „mäsové šupky“) dosahuje desiatky krát denne, bolesť brucha je neznesiteľná, zaznamenávajú sa výrazné hemodynamické poruchy.

Akútna dyzentéria v gastroenterickom variante je charakterizovaná krátkou inkubačnou dobou (6-8 hodín) a prevažne enterálnymi príznakmi na pozadí syndrómu všeobecnej intoxikácie: nevoľnosť, opakované vracanie. Priebeh pripomína salmonelózu alebo toxickú infekciu. Bolesť pri tejto forme úplavice je lokalizovaná v epigastrická oblasť a okolo pupka, má kŕčovitý charakter, stolica je tekutá a bohatá, nie sú žiadne patologické nečistoty, pri intenzívnej strate tekutín sa môže objaviť syndróm dehydratácie. Príznaky gastroenterickej formy sú prudké, ale krátkodobé.

Gastroenterokolická dyzentéria spočiatku svojím priebehom pripomína aj otravu jedlom, neskôr sa začnú pripájať príznaky kolitídy: hlien a krvavé pruhy vo výkaloch. Závažnosť priebehu formy gastroenterokolitídy je určená závažnosťou dehydratácie.

Dyzentéria vymazaného priebehu sa dnes vyskytuje pomerne často. Nepohodlie, stredne silné bolesti brucha, kašovitá stolica 1-2x denne, väčšinou bez nečistôt, hypertermia a intoxikácia chýbajú (alebo sú extrémne nevýznamné). Dyzentéria trvajúca viac ako tri mesiace sa považuje za chronickú. Prípady sú v súčasnosti chronická dyzentéria vo vyspelých krajinách sú kohútiky zriedkavé. Opakujúcim sa variantom sú opakujúce sa epizódy klinický obraz akútna dyzentéria, prelínaná s obdobiami remisie, kedy sa pacienti cítia relatívne dobre.

K rozvoju vedie kontinuálna chronická dyzentéria závažné porušenia trávenie, organické zmeny na sliznici steny čreva. Symptómy intoxikácie s kontinuálnou chronickou dyzentériou zvyčajne chýbajú, sú neustále denné hnačky, stolica je kašovitá, môže mať zelenkastý odtieň. Chronické poruchy absorpcia vedie k strate hmotnosti, hypovitaminóze, rozvoju malabsorpčného syndrómu. Po prenose sa zvyčajne pozoruje rekonvalescenčné vylučovanie baktérií akútna infekcia, subklinický - stane sa pri prenose dyzentérie vo vymazanej forme.

Komplikácie

Komplikácie na modernej úrovni zdravotná starostlivosť sú extrémne zriedkavé, hlavne v prípade ťažkej Grigoriev-Shigovej dyzentérie. Táto forma infekcie môže byť komplikovaná toxickým šokom, perforáciou čreva, zápalom pobrušnice. Okrem toho je pravdepodobný vývoj črevnej parézy.

Dyzentéria s intenzívnou dlhotrvajúcou hnačkou môže byť komplikovaná hemoroidmi, análnou trhlinou, prolapsom konečníka. V mnohých prípadoch dyzentéria prispieva k rozvoju dysbakteriózy.

Diagnostika

Najšpecifickejšia bakteriologická diagnóza. Patogén sa zvyčajne izoluje z výkalov a v prípade úplavice Grigoriev-Shiga z krvi. Keďže nárast titra špecifických protilátok je pomerne pomalý, sérologické diagnostické metódy (RNGA) majú retrospektívnu hodnotu. Laboratórna prax diagnostiky dyzentérie čoraz viac zahŕňa detekciu antigénov Shigella vo výkaloch (zvyčajne vykonávanú pomocou RCA, RLA, ELISA a RNGA s protilátkovým diagnostikom), reakciu väzby komplementu a hemaglutináciu agregátov.

Ako generál diagnostické opatrenia použiť rôzne laboratórne techniky na určenie závažnosti a prevalencie procesu, identifikovať metabolické poruchy. Stolica sa analyzuje na dysbakteriózu a koprogram. Potrebné informácie môže často poskytnúť endoskopické vyšetrenie (sigmoidoskopia). odlišná diagnóza v pochybných prípadoch. Na ten istý účel môžu pacienti s dyzentériou v závislosti od jej klinickej formy potrebovať konzultáciu s gastroenterológom alebo proktológom.

Liečba dyzentérie

Ľahké formy úplavice sa liečia ambulantne, ústavná liečba je indikovaná u ľudí s ťažkou infekciou, komplikované formy. Pacienti sú hospitalizovaní aj podľa epidemiologických indikácií, v Staroba so sprievodnými chronickými ochoreniami a deti prvého roku života. Pacientom je predpísaný pokoj na lôžku pre horúčku a intoxikáciu, diétne jedlo(v akútnom období - diéta číslo 4, keď hnačka ustúpi - tabuľka číslo 13).

Etiotropická terapia akútnej dyzentérie spočíva v predpisovaní 5-7-dňového cyklu antibakteriálnych látok (antibiotiká fluorochinolónovej, tetracyklínovej série, ampicilín, kotrimoxazol, cefalosporíny). Pre ťažké a stredne ťažké formy sú predpísané antibiotiká. Vzhľadom na schopnosť antibakteriálne lieky zhoršiť dysbakteriózu, v kombinácii sa eubiotiká užívajú v kurze 3-4 týždne.

V prípade potreby sa vykonáva detoxikačná terapia (podľa závažnosti detoxikácie sa lieky predpisujú perorálne alebo parenterálne). Poruchy vstrebávania sa upravujú pomocou enzýmových prípravkov (pankreatín, lipáza, amyláza, proteáza). Podľa indikácií imunomodulátory, antispazmodiká, adstringenty, enterosorbenty.

Na urýchlenie regeneračných procesov a zlepšenie stavu sliznice v období rekonvalescencie sa odporúčajú mikroklyzéry s nálevom z eukalyptu a harmančeka, šípkový a rakytníkový olej a vinylín. Chronická dyzentéria sa lieči rovnakým spôsobom ako akútna dyzentéria, ale antibiotická liečba je zvyčajne menej účinná. Odporúča sa vymenovanie terapeutických klystírov, fyzioterapie, bakteriálnych činidiel na zotavenie. normálna mikroflóračrevá.

Prognóza a prevencia

Prognóza je väčšinou priaznivá, s včasnou komplexná liečba akútne formy úplavice chronizácia procesu je extrémne zriedkavá. V niektorých prípadoch, po infekcii, zvyškové funkčné poruchy práca hrubého čreva (postdyzenteriálna kolitída).

Všeobecné opatrenia na prevenciu dyzentérie zahŕňajú dodržiavanie hygienických a hygienických noriem v každodennom živote, vo výrobe potravín a v zariadeniach spoločného stravovania, sledovanie stavu vodných zdrojov, čistenie splaškových odpadov (najmä dezinfekcia odpadových vôd zo zdravotníckych zariadení).

Pacienti s dyzentériou sú prepúšťaní z nemocnice najskôr tri dni po klinickom uzdravení s negatívnym jednorazovým bakteriologickým testom (materiál na bakteriologické vyšetrenie sa odoberá najskôr 2 dni po ukončení liečby). Pracovníci potravinárskeho priemyslu a iné osoby, ktoré sú im podobné, podliehajú prepusteniu po dvoch negatívny výsledok bakteriologický rozbor.

Obsah článku: classList.toggle()">rozbaliť

Dyzentéria je bežné infekčné ochorenie, bežnému človeku viac známe ako črevná infekcia. Toto ochorenie je skutočne lokalizované v hrubom čreve (jeho distálnej časti), spôsobené bakteriálnym pôvodcom rodu Shigella.

Charakteristickým znakom je úplavica akútny priebeh a môže viesť k množstvu komplikácií. Včasná detekcia problémy v počiatočných štádiách jej vývoja umožnia účinnejšie bojovať proti infekcii predpisovaním úzko cielenej antibiotická terapia a použitie iných opatrení zo zdravotných dôvodov.

Indikácie pre diagnostiku dyzentérie

Priamou indikáciou pre vymenovanie komplexnej diagnostiky je podozrenie na prítomnosť šigelózy s prostanovlenie predbežná diagnóza všeobecný lekár. Po prvotnom prijatí pacienta vypíše odporúčanie na vyšetrenie, opraví jeho sťažnosti, zhromaždí anamnézu.

Indikácie vhodných opatrení sú neoddeliteľne spojené s akútnymi, výraznými príznakmi dyzentérie. Medzi jeho hlavné kroky patrí:

• Prejav prvých príznakov bakteriálnej infekcie niekoľko hodín alebo dní po infekcii (konkrétne obdobie závisí od cesty prieniku patogénu do tela). Existuje všeobecná nevoľnosť, bolesť hlavy, zimnica;
• Výskyt hlavných príznakov- syndróm bolesti brucha, stolice a poruchy trávenia, teplo, letargia a veľká slabosť, strata chuti do jedla;
• Vrchol negatívnych javov- veľmi časté a tekutá stolica s nečistotami hlienu, krvné zrazeniny, hnis, neustále nepohodlie v dolnej časti brucha, zvyšujúce sa asynchrónne, bez ohľadu na to fyzická aktivita a jedenie. Navyše vyblednú koža, sliznice menia farbu smerom k viac tmavé odtiene, jazyk je pokrytý hnedým povlakom. Často sa zistí nepríjemný zápach z ústna dutina. Bolestivý syndróm v bruchu nadobúda kŕčovitý, často sa meniaci charakter, pri sondovaní iliakálnej oblasti na ľavej strane sa výrazne zvyšuje. Dochádza aj k poklesu krvného tlaku a častému tlkotu srdca.

Diagnostické metódy

Moderná medicína ponúka pacientovi širokú škálu metód diagnostiky dyzentérie zameraných ako na všeobecné vyhľadávanie šigel, tak aj na určenie ich špecifického skupinového druhu a sérotypu.

Stojí za zmienku, že žiadna z nasledujúcich analýz nemôže byť 100 percentne objektívna a informatívna- ich spoľahlivosť sa pohybuje od 60 do 85 percent v závislosti od konkrétnych činností, kvalifikácie laboratórneho personálu, kvality odobratých vzoriek, dodržiavania všetkých odporúčaní pacientom pred dodaním materiálu a podmienok jeho skladovania, modernosti a presnosti diagnostické zariadenia a ďalšie faktory.

To je dôvod, prečo konečná diagnóza šigelózy môže byť stanovená až po prijatí pozitívne výsledky niekoľkými alternatívnymi metódami výskumu, nezávislými od seba, ale realizovanými v jedinom časovom období.

Najčastejšie laboratórna diagnostika dyzentérie zahŕňa:

• Coprogram;
• Všeobecná analýza krvi;
• Bakteriologická kultúra;
• Všeobecná analýza moču;
• sérologické štúdie;
• Analýza protilátok;
• chémia krvi;
• Imunologické testovanie;
• sigmoidoskopia;
• Ďalšie aktivity podľa potreby.

Dôležitým krokom pri odhaľovaní šigelózy je aj komplexný odborný odlišná diagnóza, čo umožňuje vylúčiť iné infekcie alebo patológie s podobnými príznakmi.

Koprogram alebo fekálna analýza

Coprogram - kľúčová analýza s podozrením na dyzentériu, čo umožňuje určiť odchýlky od normy v študovaných výkaloch. Laborant pri diagnostike poskytnutého materiálu hodnotí jeho zloženie, prítomnosť nečistôt, fyzikálne a chemické vlastnosti.

Pred absolvovaním tohto typu analýzy je potrebné riadne sa pripraviť na laboratórnu štúdiu.:

1. 10 dní pred odberom vzoriek materiálu stojí za to odmietnuť piť alkohol;
2. Najmenej 5 dní pred testom by ste mali dodržiavať diétu č.5 podľa Pevznera;
3. Výkaly nemožno odobrať na analýzu, ak sa získajú klystírom alebo sú v nich cudzie nečistoty, napríklad moč, stopy menštruácie;
4. 3 dni pred koprogramom by ste mali prestať užívať akýkoľvek lieky(ako análne vo forme čapíkov, tak aj perorálne, intravenózne atď.), a tiež nevykonávať výskum s použitím pomocných látok (vazelín, resp. ricínový olej bizmut, bárium);
5. Materiál sa má odobrať po spontánnej defekácii zo 4-5 náhodných miest, umiestnením lekárskou špachtľou do špeciálnej plastovej nádoby, pričom nádobu naplníme maximálne do 1/3. Vzorka musí byť doručená maximálne do 10 hodín po priamom odbere pri dodržaní podmienok skladovania v chladničke pri teplote 4 až 6 stupňov.

Komplexná diagnostika výkalov v koprograme zahŕňa štúdie podľa nasledujúcich kritérií:

• Dôslednosť. Normálne by mala byť hustá, s úplavicou - kašovitá alebo tekutá;
• Formulár. Normálne štruktúrované, homogénne a formované, so šigelózou - heterogénne, čiastočne formované, zle štruktúrované;
• Farba. Normálne hnedá, s bakteriálnou léziou - sfarbená, niekedy ružovkastá alebo červenkastá (v prítomnosti krvných zrazenín);
• Sliz. Normálne chýba, s črevnou infekciou - môže byť vo veľkých množstvách;
• Krv. Normálne nie je prítomný, s úplavicou - existuje;
• Leukocyty. Normálne sa nezistia, pri šigelóze je v zóne viditeľnosti diagnostikovaných až 50 buniek, najmä neutrofilov;
• epitelové bunky. Bežne sú tam stopové množstvá, pri bakteriálnej črevnej infekcii je ich veľa.

Výsledky koprogramu sú pacientovi alebo lekárovi poskytnuté v priemere 3-4 dni po doručení materiálu.

Siatie

Za ďalšiu bežnú metódu detekcie šigelózy v analýzach pacientov sa považuje bakteriologická kultivácia. Podstatou opatrení je umiestnenie jednotlivých častí dodaného materiálu na najrôznejšie živné pôdy prispôsobené rastu rôznych patogénov bakteriálnych infekcií. Ak je shigella prítomná v tele, potom sa na špecifickej "pôde" aktívne množí a vytvára nové kolónie.

Táto technika sa zvyčajne používa ako potvrdenie primárnych testov, ktoré preukázali prítomnosť úplavice, pretože výsledky bakposeva sú známe za týždeň.

Okrem detekcie patogénu túto analýzu tiež vám umožňuje vybrať najpresnejšie antibakteriálne liečivo s úzko cieleným účinkom, ktoré účinne zničí infekciu.

Identifikovaná vzorka sa rozdelí na niekoľko častí, po ktorých sa pridajú rôzne antibiotiká a celá skupina vzoriek sa vloží do termostatu - vzorky, kde kolónie rýchlejšie vymrú a budú považované za najúspešnejšie, čo lekárovi umožní nahradiť antibakteriálne lieky široký rozsah akcie v konzervatívna liečba k efektívnejším.

Krv a moč pri úplavici

Zmeniť všeobecné analýzy krv a moč je povinným aspektom komplexnej diagnostiky v procese identifikácie a potvrdenia diagnózy šigelózy.

• Rozbor krvi. Pri črevnej infekcii vyššie uvedeného typu je možné počas obdobia aktívneho vývoja zistiť pokles indexov hematokritu a imunoglobulínov. Tiež sa často zisťuje leukocytóza s prevahou neutrofilov a toxikologickou granularitou týchto zložiek, poklesom koncentrácií eozinofilných zložiek a zložiek krvných doštičiek. Okrem toho je možný prejav lymfopénie, lymfocytóza, zníženie lymfocytového indexu a zvýšenie ESR;
• Analýza moču. Pri diagnostike tohto kvapalného média v prípade vývoja šigelózy sa pozoruje výrazné zvýšenie koncentrácií valcov a priameho proteínu, v moči sú často prítomné erytrocyty.

Sérologická štúdia

Moderná sérologická štúdia je komplexná analýza protilátok proti Shigella, ktoré môžu byť nasýtené v ľudskej krvi. Dôvodom tohto procesu je aktívna práca imunitný systém, ktorý v plazme uvoľňuje svoje vlastné proteínové zlúčeniny, ktoré bojujú proti infekčnému bakteriálnemu poškodeniu.

Najpresnejšou a najrýchlejšou metódou na detekciu vyššie uvedených prvkov je takzvaná nepriama hemaglutinačná reakcia. Podstatou metódy je umiestnenie množstva antigénov rôznych kmeňov infekcie na elementy erytrocytov., po ktorom sa do vzoriek pridá sérový extrakt z krvi pacienta. AT pozitívne vzorky začínajú reakcie interakcie protilátok a antigénov s lepením erytrocytov, čo umožňuje identifikovať shigellu.

Diferenciálna diagnostika dyzentérie

Pomerne dôležitou etapou detekcie dyzentérie a potvrdenia diagnózy je diferenciálna diagnostika - profesionálna metóda "skríningu" iných ochorení a patológií s podobnými príznakmi, ktoré sa prejavujú intoxikáciou tela a črevnými léziami. Shigellóza sa najčastejšie porovnáva s:

• salmonelóza. Táto lézia má takmer identické prejavy, ale zároveň je všeobecná intoxikácia slabo vyjadrená a je prítomná iba vo vymazanej forme;
• Aserichióza. Tento typ ochorenia je spôsobený patogénmi, ktoré postihujú nie hrubé črevo, ale tenké črevo. Prejavy intoxikácie sú o niečo slabšie ako pri šigelóze;
• cholera. Bacillus cholera postihuje gastrointestinálny trakt a črevá, pričom dochádza k výraznej dehydratácii v dôsledku extrémne silných, častých a hojných hnačiek. Vo výkaloch chýba hlien aj krv, zatiaľ čo všeobecné príznaky intoxikácie sú slabšie ako pri úplavici;
• Yersinióza. Pri yersinióze sa okrem ťažkej intoxikácie vyskytujú početné lézie orgánov a systémov (obličky, pečeň, centrálny nervový systém atď.), Sprevádzané poruchou odtoku moču, žltačkou a inými syndrómami.
• Rotavírusová infekcia. Rotavírusová infekcia takmer vždy postihuje okrem čriev aj horné dýchacie cesty;
• Akútna apendicitída. Tento patologický stav je spojený s podráždením pobrušnice, výrazným zvýšením teploty, ako aj silnou bolesťou v pravom podbrušku.

Laboratórna diagnostika bakteriálnej dyzentérie

Dyzentéria je antroponotické infekčné ochorenie spôsobené baktériami rodu shigella, charakterizovaný ulcerózna lézia hrubé črevo a celková intoxikácia tela. Klasifikácia patogénov dyzentérie (shigella) je uvedená v tabuľke 12, metódy mikrobiologickej diagnostiky v schéme 13.

Tabuľka 13 Shigella klasifikácia

Druhy Shigella sérovary Shigella Shigella dysenteriae 1-12 Shigella flexneri 1a, 1b, 2a, 2b, 3a, 3b, 4a, 4b, 5,6, var X, var Y Shigella boydii 1-18 Shigella sonnei -

Schéma 12. Mikrobiologická diagnostika dyzentérie

Expresné metódy (indikácia patogénnej E. coli alebo jej produktov v testovanom materiáli) DNA sondy alebo PCR na detekciu špecifického fragmentu Shigella DNA, RIF

Mikroskopická metóda s úplavicou sa nepoužíva kvôli morfologickej podobnosti Shigelly s inými enterobaktériami.

Bakteriologická metóda je hlavnou metódou laboratórnej diagnostiky dyzentérie . Testovaný materiál sa naočkuje na Ploskirev a Endo médium v ​​Petriho miskách, ako aj na seleničitanové médium na akumuláciu, z ktorého sa po 16 až 18 hodinách znovu naočkuje na uvedené husté živné pôdy. Plodiny sa pestujú v termostate pri 37 0 C počas 18 - 24 hodín.

Na druhý deň sa skúma povaha kolónií. Bezfarebné laktózovo-negatívne kolónie Shigella sa subkultivujú na jednom z polysacharidových médií (Olkenitsky, Ressel, Kligler), aby sa akumulovala čistá kultúra. Na 3. deň sa berie do úvahy povaha rastu na polysacharidovom médiu a materiál sa subkultivuje na diferenciálnom médiu (Gissa a iné) na biochemickú identifikáciu izolovanej kultúry. Antigénna štruktúra izolovanej kultúry je určená pomocou OPA, aby sa identifikovala na úrovni druhu a sérovaru. Na 4. deň sa berú do úvahy výsledky biochemickej aktivity (tabuľka 14).

Tabuľka 14. Biochemické vlastnosti Shigella

Druhy Shigella Fermentácia indol glukózy laktóza manitol dulcit xylóza ornitín S. dysenteriae do - - - - - - S. flexneri do - do - - - - S. boydii do - do - ± - - S. sonnei do ± do na + ± do +

Označenia: "k" - fermentácia substrátu s tvorbou kyseliny, "+" - prítomnosť znaku, "-" - neprítomnosť znaku, "±" - netrvalý znak.

Shigella, na rozdiel od Escherichie, sú nepohyblivé mikroorganizmy, nefermentujú laktózu, nerozkladajú glukózu bez tvorby plynov a nedekarboxylujú lyzín. Na sérotypizáciu sa RA najskôr umiestni na podložné sklíčko so zmesou sér proti druhom a variantom Shigella prevládajúcim v oblasti a potom sa RA umiestni na sklo so sérami špecifickými pre monoreceptory. Stanovuje sa aj citlivosť izolovanej kultúry na polyvalentný dyzenteriálny bakteriofág a antibiotiká. Na epidemiologické účely sa stanovuje fagovar a kolicinovar izolovanej Shigelly. Jednou z vlastností shigelly je ich schopnosť spôsobiť keratitídu u morčiat (keratokonjunktiválny test)

Sérologická metóda. Na stanovenie protilátok v krvi pacientov s dyzentériou (zvyčajne chronická forma) sa používa RNHA s erytrocytárnou shigellosis diagnosticums. Diagnostické titre: na Flexnerovu shigellu u dospelých - 1:400, u detí mladších ako 3 roky - 1:100, u detí starších ako 3 roky - 1:200, u iných shigel - 1:200. Reakcia sa spravidla opakuje s krvným sérom odobratým najmenej o 7 dní neskôr; diagnostická hodnota má štvornásobne alebo viacnásobne zvýšený titer protilátok.

Expresné metódy pri dyzentérii - priamy a nepriamy RIF, koaglutinačná reakcia, ELISA, RNHA s protilátkami na diagnostiku erytrocytov na rýchlu detekciu šigel v testovanom materiáli (zvyčajne vo výkaloch), ako aj PCR.

Metodické pokyny pre žiakov na praktickú hodinu č.28.

Téma lekcie:

Cieľ: Štúdium metód mikrobiologickej diagnostiky, etiotropná terapia a prevencia šigelózy.

Modul 2 . Špeciálna, klinická a ekologická mikrobiológia.

Téma 5: Metódy mikrobiologickej diagnostiky dyzentérie.

Relevantnosť témy:Shigellóza je všadeprítomná a je vážny problém v krajinách s nízkou sanitárnou kultúrnou úrovňou a vysokým výskytom podvýživy a zlej výživy. V rozvojových krajinách napomáha šíreniu infekcie zlá hygiena, zlá osobná hygiena, preľudnenosť a veľký podiel detí v populácii. Na Ukrajine sú ohniská šigelózy častejšie v uzavretých skupinách na pozadí nízky level sanitácia a hygiena napríklad v jasliach a škôlkach, na turistických lodiach, v psychiatrických ambulanciách či útulkoch pre zdravotne postihnutých. Shigella bola príčinou hnačky cestovateľov a turistov.

Za príčinu skupinových chorôb možno považovať používanie potravinových výrobkov kontaminovaných nedbalosťou pracovníkov obchodu, ktorí sú nosičmi šigelly. S užívaním sú spojené ohniská pitná voda, kúpanie v znečistených nádržiach tiež viedlo k infekcii. Zdá sa však, že potravné a vodné cesty prenosu zohrávajú menšiu úlohu pri šírení šigelózy v porovnaní s cholerou a brušným týfusom, pri ktorých sú na infikovanie človeka zvyčajne potrebné veľké dávky patogénov. V rozvojových krajinách, kde sa choroba šíri prevažne z človeka na človeka, môžu byť nosiči dôležitým rezervoárom infekčného agens. U pacientov, ktorí neužívali antibakteriálne lieky, vylučovanie šigely stolicou zvyčajne trvá 1-4 týždne, ale v malej časti prípadov trvá oveľa dlhšie.

Shigellóza - akútna bakteriálna infekciačriev, spôsobené jedným zo štyroch typov Shigella. Klinické spektrum infekcie siaha od miernej vodnatej hnačky až po ťažkú ​​dyzentériu charakterizovanú kŕčmi v bruchu, tenesmami, horúčkou a príznakmi celkovej intoxikácie.

Etiológia.

Rod Shigella (pomenovaný po K. Shigovi, ktorý v roku 1898 podrobne študoval a opísal izolovaného pôvodcu bakteriálnej dyzentérie A. V. Grigoriev) z čeľade Enterobacteriaceae pozostáva zo skupiny blízko príbuzných bakteriálnych druhov s nasledujúcimi vlastnosťami:

ja Morfologické: shigella - malé tyčinky so zaoblenými koncami. Od ostatných zástupcov čeľade Enterobacteriaceae sa líšia absenciou bičíkov (nepohyblivé), nemajú spóry a tobolky a sú gramnegatívne.

II. Kultúrne: Shigella sú aeróby alebo fakultatívne anaeróby; optimálne podmienky kultivácie sú teplota 37°C, pH 7,2–7,4. Rastú na jednoduchých živných pôdach (MPA, MPB) vo forme malých, lesklých, priesvitných, sivastých, okrúhlych kolónií s veľkosťou 1,5–2 mm. S – forma. Výnimkou je Sonne's Shigella, ktorá sa často oddeľuje a vytvára veľké, ploché, zakalené kolónie so zubatými okrajmi. R -formy (kolónie vyzerajú ako „ hroznový list“). V tekutých živných médiách poskytuje Shigella jednotný zákal, R -tvorí zrazeninu. Obohacovacím kvapalným médiom je seleničitanový bujón.

III. Enzymatické: hlavné biochemické znaky potrebné na identifikáciu šigel v izolácii čistej kultúry sú tieto:

1. nedostatok tvorby plynu počas fermentácie glukózy;
2. žiadna produkcia sírovodíka;
3. nedochádza k fermentácii laktózy do 48 hodín.

Celkovo sa tieto štyri druhy ďalej delia na približne 40 sérotypov. Podľa charakteristík hlavných somatických (O) antigénov a biochemických vlastností sa rozlišujú tieto štyri druhy alebo skupiny: S. dysenteriae (skupina A, zahŕňa: Grigoriev-Shigi, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs), S. flexneri (skupina B), S. boydii (skupina C) a S. sonnei (skupina D).

Vo vzťahu k manitolu sa všetky shigelly delia na štiepiaci (Flexner, Boyd, Sonne shigella) a neštiepiaci sa (Grigoriev-Shiga, Stutzer-Schmitz, Large-Sachs shigella) manitol.

IV. Patogénne faktory:

1. Invázia plazmidu -poskytuje schopnosť shigelly spôsobiť inváziu s následným medzibunkovým šírením a reprodukciou v epiteli sliznice hrubého čreva;
2. tvorba toxínov: Shigella majú lipopolysacharidový endotoxín, ktorý je chemicky a biochemicky podobný endotoxínom iných členov čeľade Enterobacteriaceae. Okrem toho S. dysenteriae typu I (Shigov bacil) produkuje exotoxín. Od objavu posledne menovaného sa zistilo, že má enterotoxínovú aktivitu a môže spôsobiť črevnú sekréciu, ako aj cytotoxický účinok proti bunkám črevného epitelu; má neurotoxický účinok, ktorý sa zaznamenáva u detí so šigelózou. Shiga toxín, ktorý sa dostáva do krvi, spolu s poškodením submukózneho endotelu ovplyvňuje aj glomeruly obličiek, v dôsledku čoho sa okrem krvavej hnačky rozvinie hemolyticko-uremický syndróm s rozvojom zlyhania obličiek.

V. Antigénna štruktúra:Všetky Shigelly majú somatický O-antigén, v závislosti od štruktúry ktorého sa delia na sérovary.

VI. Odolnosť: Teplota 100 0 C okamžite zabije shigellu. Komu nízke teploty shigella sú stabilné - v riečnej vode vydržia až 3 mesiace, na zelenine a ovocí - až 15 mesiacov.Za priaznivých podmienok sú Shigella schopné rozmnožovať sa v produkty na jedenie(šaláty, vinaigretty, varené mäso, mleté ​​mäso, varené ryby, mlieko a mliečne výrobky, kompóty a želé), najmä Shigella Sonne.

Epidemiológia.

1. Zdroj infekcie:Osoba trpiaca akútnou a chronickou formou šigelózy; bakterionosič.

2. Spôsoby prenosu:

• Jedlo (hlavne pre S. sonnei)
• Vodné (hlavne pre S. flexneri)
• Kontaktná domácnosť (hlavne pre S. dysenteriae)

3. Vstupná bránainfekcia podáva gastrointestinálny trakt.

Patogenéza a patologické zmeny.

Po požití Shigella kolonizuje horné tenké črevo a množí sa tam, čo môže spôsobiť zvýšenú sekréciu skoré štádium infekcií. Shigella potom prenikajú cez M bunky do submukózy, kde sú pohltené makrofágmi. To vedie k odumretiu časti šigel, čo vedie k uvoľneniu zápalových mediátorov, ktoré iniciujú zápal v submukóze. Apoptóza fagocytov umožňuje ďalšej časti Shigelly prežiť a preniknúť do nej epitelové bunky sliznicu cez bazálnu membránu. Vo vnútri enterocytov sa shigella rozmnožuje a medzibunkovo ​​sa šíri, čo vedie k rozvoju erózie. Keď shigella zomrie, uvoľňujú sa toxíny shiga a shiga podobné toxíny, ktorých pôsobenie vedie k intoxikácii. Porážka sliznice je sprevádzaná opuchom, nekrózou a krvácaním, čo spôsobuje výskyt krvi v stolici. Okrem toho toxín ovplyvňuje centrálny nervový systém, čo vedie k trofickým poruchám.

Klinické prejavy.

Spektrum klinických prejavov šigelózy je veľmi široké – od miernej hnačky až po ťažkú ​​dyzentériu s kŕčovitými bolesťami brucha, tenezmami, horúčkami a celkovou intoxikáciou.

Inkubačná dobasa pohybuje od niekoľkých hodín do 7 dní, najčastejšie sú to 2-3 dni.Spočiatku majú pacienti vodnatú stolicu, horúčku (do 41 °C), difúzne bolesti brucha, nevoľnosť a vracanie. Spolu s tým sa pacienti sťažujú na myalgiu, zimnicu, bolesti chrbta a hlavy. V najbližších dňoch od začiatku ochorenia sa objavujú príznaky úplavice - tenezmy, časté, riedke, krvavo-hlienovité stolice. Telesná teplota postupne klesá, bolesť môže byť lokalizovaná v dolných kvadrantoch brucha. Intenzita hnačky dosahuje maximum okolo konca 1. týždňa choroby. Dyzentéria s krvavou stolicou je bežnejšia a objavuje sa skôr pri chorobe spôsobenej o S. dysenteriae typu I ako pri iných formách šigelózy.

Pre Shigellosis Sonne charakteristický je miernejší priebeh ochorenia (gastroenterický alebo gastroenterokolický variant). Horúčkové obdobie je kratšie, účinky intoxikácie sú krátkodobé, deštruktívne zmeny na sliznici čreva nie sú typické.

Shigellosis FlexnerV zásade sú charakteristické dva varianty klinického priebehu - gastroenterokolitída a kolitída.

Extraintestinálne komplikácie pri shigelózezriedkavé:

1. Komplikáciou šigelózy môže byť vývoj črevnej dysbakteriózy.
2. Spolu s bolesťami hlavy môžu byť príznaky meningitídy a konvulzívnych záchvatov.
3. Boli opísané prípady periférnej neuropatie pri infekcii S. dysenteriae typu I a prípady Guillain-Barreovho syndrómu (polyneuritída) boli hlásené počas prepuknutia gastroenteritídy S. boydii.
4. S výnimkou detí trpiacich dystrofiou je hematogénne šírenie patogénu pomerne zriedkavé, popísané sú aj prípady abscesov šigelózy a meningitídy.
5. Pri šigelóze je možný rozvoj Reiterovho syndrómu s artritídou, sterilnou konjunktivitídou a uretritídou, zvyčajne sa to u pacientov vyskytuje po 1-4 týždňoch od začiatku hnačky.
6. U detí je shigelóza sprevádzaná hemolyticko-uremickým syndrómom, často spojeným s reakciami podobnými leukémii, ťažkou kolitídou a cirkulujúcim endotoxínom, ale bakteriémia sa zvyčajne nezistí.
7. Veľmi zriedkavo je hnisavá keratokonjunktivitída spôsobená šigelou, ktorá sa dostala do očí v dôsledku samoinfekcie kontaminovanými prstami.
8. Hypovolemický šok a DIC.
9. Peritonitída, črevná gangréna, črevné krvácanie.

Imunita: Ľudia majú prirodzenú odolnosť voči šigelóze. Po ochorení imunita nie je stabilná a po Sonneho šigelóze prakticky chýba. S ochorením spôsobeným Shigella Grigoriev-Shigi sa vytvára stabilnejšia antitoxická imunita. Hlavná úloha pri ochrane pred infekciou patrí sekrécii IgA zabraňujúca adhézii a cytotoxickej protilátkovo závislej aktivite intraepitelových lymfocytov, ktoré spolu so sekrečnými IgA zabiť shigella.

Diagnostika a laboratórne výskumy.

Účel štúdie: detekcia a identifikácia šigel na diagnostiku; detekcia nosičov baktérií; detekcia shigelly v potravinách.

Výskumný materiál: exkrementy, prierezový materiál, potraviny.

Diagnostické metódy:mikrobiologické (bakteriologické, mikroskopické (luminiscenčné); sérologické; biologické; alergický test.

Priebeh výskumu:

1 deň štúdia:Kultúry by sa mali robiť z čerstvo vylúčených výkalov alebo pomocou rektálnych tampónov (rektálna trubica); pri absencii vhodných podmienok musí byť materiál umiestnený v transportnom prostredí. Na tento účel by sa mal použiť enterický agar (médium MacConkey alebo Shigella-Salmonella), stredne selektívny xylóza-lyzín-deoxycholátový agar, KLD) a živný bujón (selenitový bujón). Ak čas medzi odberom a inokuláciou presiahne 2 hodiny, potom by sa mali použiť konzervačné roztoky: 20 % žlčový bujón, kombinované Kauffmannovo médium.

• Exkrementy v glycerínovej zmesi sa emulgujú, kvapka emulzie sa nanesie na médium a rozotrie sa špachtľou. Diferenciálne médiá pre Shigella sú Ploskirev, Endo a EMS médiá (eozínmetylénová modrá agar). Ploskirevovo médium (zloženie média zahŕňa: MPA, laktózu, soli žlčové kyseliny a indikátor - brilantná zelená) je tiež voliteľným prostredím pre Shigella, pretože. inhibuje rast Escherichia coli.
• Paralelne s priamou sejbou sa zozbieraný materiál vysieva na obohacovacie médium - seleničitanový bujón.
• Všetky plodiny sú umiestnené v termostate.

2. deň štúdie:

• Poháriky sa vyberú z termostatu, podozrivé kolónie sa skrínujú na Resselovom médiu (živné médium, ktoré obsahuje: agar-agar, Andredeov indikátor, 1 % laktózy, 0,1 % glukózy) a manitol. Výsev sa robí ťahmi na šikmú plochu a nástrekom do agarového stĺpca. Naočkované Resselovo médium sa umiestni do termostatu na 18 až 24 hodín (súbežne sa uskutoční preočkovanie zo seleničitanového média do diferenciálneho diagnostického média).
• Urobte šmuhy (Gramovo farbenie), mikroskop.
• Pripravte prípravky "visiace" alebo "drvené" kvapky.
• Vyhlásenie o indikatívnej RA s polyvalentnými diagnostickými sérami na shigelózu.
• Výsev podozrivých kolónií na šikmý agar.

3. deň štúdie:

• Mikroskopia agarového šikmého materiálu.
• Kultúry, ktoré nefermentovali laktózu na Resselovom médiu, sa podrobia ďalšiemu štúdiu: urobia sa nátery (Gramovo farbenie), skontroluje sa čistota kultúry. V prítomnosti gramnegatívnych tyčiniek sa naočkuje Hissovo médium, bujón s indikátorovými papierikmi (na detekciu indolu a sírovodíka) a lakmusové mlieko.
• Naočkované médiá sa umiestnia do termostatu na 18-24 hodín.

Štvrtý deň štúdie:

• Účtovanie krátkej „pestrej série“.
• Kultúry podozrivé z hľadiska ich enzymatických a kultúrnych vlastností proti Shigella sa podrobia sérologickej identifikácii. Nastavenie RA na sklo (typické a skupinové diagnostické séra). Nastavenie nasadeného RA.

Ako zrýchlené metódy na shigelózu použitefluorescenčná mikroskopia a biologická vzorka(zavlečenie virulentných kmeňov Shigella do spojovkového vaku (pod dolné viečko) morčiat - zápal spojiviek sa vyvinie do konca 1. dňa).

Alergický test Zuverkalov- intradermálny alergický test s dyzentériou (zavedenie 0,1 ml dyzentérie do oblasti predlaktia - pozitívna reakcia v prípade infiltrácie a hyperémie). Alergologická diagnostika sa v súčasnosti prakticky nepoužíva. Tsurvekalov test sa nelíši v špecifickosti, pozitívne reakcie sú zaznamenané nielen pri šigelóze, ale aj pri salmonelóze, escherichióze, yersinióze a iných akútnych črevných infekciách a niekedy aj u zdravých jedincov.

Liečba a prevencia.Bakteriofág sa používa na liečbu a prevenciu podľa epidemiologických indikácií. orálne podávanie, antibiotiká po stanovení antibiogramu; v prípade dysbakteriózy - prípravky probiotík na korekciu mikroflóry. Na doplnenie straty tekutín a elektrolytov - zavedenie roztoku glukózy-elektrolytu dovnútra.

Konkrétne ciele:

Interpretujte biologické vlastnosti patogénov šigelózy.

Zoznámte sa s klasifikáciou Shigella.

Naučte sa interpretovať patogenetické vzorce infekčný proces spôsobené Shigellou.

Stanoviť metódy mikrobiologickej diagnostiky, etiotropnej terapie a prevencie šigelózy.

Byť schopný:

• Testovaný materiál naočkujte na živné médiá.
  • Pripravte si nátery a Gramovo farbenie.
  • Vykonajte mikroskopiu prípravkov pomocou ponorného mikroskopu.
  • Analyzujte morfologické, kultúrne a enzymatické vlastnosti Shigella.

Teoretické otázky:

1. Charakteristika patogénov šigelózy. biologické vlastnosti.

2. Klasifikácia šigelly. Základné princípy.

3. Epidemiológia, patogenéza a klinické príznakyšigelóza.

4. Laboratórna diagnostika.

5. Zásady liečby a prevencie šigelózy.

Praktické úlohy, ktoré sa vykonávajú v triede:

1. Mikroskopia demonštračných preparátov z čistých kultúr patogénov šigelózy.

2. Práca na bakteriologickej diagnostike šigelózy: štúdium fekálnych kultúr na Ploskirevovom médiu.

3. Subkultivácia podozrivých kolónií na Resselovom médiu a na BCH na stanovenie tvorby indolu a H 2 S .

4. Náčrt demonštračných prípravkov a schémy mikrobiologickej diagnostiky šigelózy v protokole vyučovacej hodiny.

5. Registrácia protokolu.

Literatúra:

1. Korotyaev A.I., Babichev S.A., Lekárska mikrobiológia, imunológia a virológia / Učebnica pre lekárske univerzity, Petrohrad "Špeciálna literatúra", 1998. - 592s.

2. Timakov V.D., Levašev V.S., Borisov L.B. Mikrobiológia / Učebnica. - 2. vyd., prepracované. A ďalšie - M .: Medicína, 1983, -512s.

3. Pyatkin K.D. Krivoshein Yu.S. Mikrobiológia s virológiou a imunológiou.- Kyjev: In and shcha school, 1992. - 431s.

4. Lekárska mikrobiológia / Edited by V.I. Pokrovského.-M.: GEOTAR-MED, 2001.-768s.

5. Sprievodca praktický tréning v mikrobiológii, imunológii a virológii. Ed. M.P. Zykov. M. "Medicína". - 1977. - 288 s.

6. Cherkes F.K., Bogoyavlenskaya L.B., Belskan N.A. Mikrobiológia. / Ed. F.K. Čerkesský. - M.: Medicína, 1986. - 512 s.

7. Poznámky k prednáške.

Doplnková literatúra:

1. Makiyarov K.A. Mikrobiológia, virológia a imunológia. Alma-Ata, "Kazachstan", 1974. - 372 s.

2. Titov M.V. Infekčné choroby. - K., 1995. - 321s.

3. Šuvalová E.P. infekčné choroby. - M.: Medicína, 1990. - 559 s.

4. BME, zväzok 1, 2, 7.

5. Pavlovič S.A. Lekárska mikrobiológia v grafoch: Proc. príspevok na zdravotnú súdruh. – Mn.: Vyš. škola, 1986. - 255 s.

Stručné pokyny pre prácu na praktickej hodine.

Na začiatku vyučovacej hodiny sa kontroluje úroveň prípravy žiakov na vyučovaciu hodinu.

Samostatná práca pozostáva zo štúdia klasifikácie shigella, analýzy schémy patogenetických a klinických príznakov shigellózy. Štúdium metód laboratórnej diagnostiky šigelózy. Žiaci realizujú výsev biomateriálu na živné pôdy. Potom sa pripravia mikropreparáty, zafarbia sa podľa Grama, vykoná sa mikroskopia, načrtnú sa mikropreparáty a podajú sa potrebné vysvetlenia. Súčasťou samostatnej práce je aj mikroskopovanie ukážkových príprav a ich zakreslenie do protokolu vyučovacej hodiny.

Na konci hodiny je vykonaná kontrola testu a rozbor konečných výsledkov samostatnej práce každého študenta.

Technologická mapa praktickej hodiny.

p/p	Etapy	Čas v minútach	Spôsoby učenia	Vybavenie	Poloha
	Kontrola a oprava počiatočnej úrovne prípravy na vyučovaciu hodinu		Testovacie úlohy počiatočnej úrovne	Tabuľky, atlas	študovňa
	Samostatná práca		Graf logickej štruktúry	Ponorný mikroskop, farbivá, podložné sklíčka, bakteriologické slučky, živné pôdy, Ploskirevovo médium, Resselovo médium, "pestrý Hissov rad"
	Samokontrola a korekcia zvládnutia látky		Cielené učebné úlohy
	Kontrola testu		Testy
	Analýza výsledkov práce

Cielené vzdelávacie úlohy:

1. Výkaly boli získané od dieťaťa s akútnymi črevnými infekciami (odber výkalov bol vykonaný rektálnou sondou) obsahujúcimi hlien a hnis. Akú expresnú diagnostickú metódu použiť?

A. ELISA.

b. REEF.

C. RA.

D. RSK.

E. RIA.

1. Pôvodca dyzentérie bol izolovaný z chorého dieťaťa s akútnou črevnou infekciou. Aký druh morfologické znaky charakteristika patogénu?

A . Gramnegatívna nepohyblivá tyčinka.

B . Gram-pozitívna pohyblivá tyč.

C . Vytvára kapsulu na živnom médiu.

D . Vo vonkajšom prostredí tvorí spóry.

E . Gram-pozitívne streptobacily.

3. U pacienta, ktorý pred tromi dňami ochorel a sťažuje sa na teplotu 38 °C, bolesti brucha, častú riedku stolicu, prítomnosť krvi v stolici, lekár klinicky diagnostikoval bakteriálnu dyzentériu. Akú metódu mikrobiologickej diagnostiky v tomto prípade použiť a aký materiál odobrať pacientovi na potvrdenie diagnózy?

A. Bakterioskopické - kal.

B. Bakteriologické - kal.

C. Bakterioskopická - krv.

D. Bakteriologické - moč.

E. Sérologické - krv.

4. Shigella Sonne bola izolovaná z pacientových výkalov. Čo je potrebné urobiť dodatočný výskum určiť zdroj nákazy?

A . Vykonajte fágovú typizáciu izolovanej čistej kultúry.

B . Stanovte antibiogram.

C . Nastavte zrážaciu reakciu.

D . Nastavte reakciu fixácie komplementu.

E . Nastavte neutralizačnú reakciu.

5. V skupine turistov (27 ľudí), ktorí pili vodu z jazera, sa po dvoch dňoch u 7 ľudí objavili príznaky akútnej hnačky. Aký materiál by sa mal poslať do bakteriologického laboratória na zistenie etiológie tohto ochorenia?

A. Voda, výkaly pacientov.

B. Voda, krv chorých.

C. Potravinárske výrobky.

D. Moč.

E. Flegm.

6. Významnou nevýhodou mikroskopickej diagnostickej metódy akútnych črevných infekcií je jej nedostatočný informačný obsah spôsobený morfologickou identitou baktérií rodu Enterobacteriaceae . Čo robí túto metódu informatívnejšou?

A . Rádioimunoanalýza.

B . Coombsova reakcia.

C . Prepojený imunosorbentový test.

D . opsonizačná reakcia.

E . Imunofluorescenčná reakcia.

7. 29-ročný pacient bol hospitalizovaný so záchvatmi vracania, hnačky a tenesmy. Výkaly s kúskami hlienu a prímesou krvi. Bakteriologické vyšetrenie baktérií z kolónií na Ploskirevovom médiu odhalilo nepohyblivé, gramnegatívne tyčinky, ktoré nefermentujú laktózu. Vymenujte pôvodcu infekčného procesu.

A. Shigella flexneri.

b. Vibrio eltor.

C. E. Coli.

D. Proteus mirabilis.

E. Salmonella enteritidis.

8. Do mikrobiologického laboratória bol doručený šalát, ktorý je pravdepodobne príčinou akútnej črevnej infekcie. Aké živné médiá sa používajú na primárne očkovanie?

A . Žĺtkovo-soľný agar, MPB.

b. MPA, MPB.

C . Selenitový vývar, Endo, Ploskireva.

D . Pečeňový vývar, Roux Wednesday.

E . Krvný agar, alkalický agar.

9. Pri mikrobiologickej štúdii mletého mäsa boli izolované baktérie patriace do rodu Shigella. Štúdium akých vlastností mikróbov viedlo k takémuto záveru?

A . Kultúrny, farbistý.

B . Antigénne, kultúrne.

C . Sacharolytický, proteolytický.

D . Antigénne, imunogénne.

E . Morfologické, antigénne.

10. Mikroskopické vyšetrenie zvratkov odobratých pacientovi s príznakmi akútnej črevnej infekcie odhalilo nehybné tyčinky. V akom nátere alebo prípravku by sa dala študovať pohyblivosť baktérií?

A . V nátere zafarbenom Gramom.

B . V nátere zafarbenom podľa Tsil - Nelsen.

C . V príprave "hustá kvapka".

D . Vo farbe Neisser.

E . V príprave "drvená kvapka".

Algoritmus laboratórne práce:

1. Štúdium biologických vlastností Shigella.

2. Oboznámenie sa s klasifikáciou šigel.

3. Analýza schémy patogenetických a klinických prejavov šigelózy.

4. Štúdium metód laboratórnej diagnostiky šigelózy.

5. Štúdium základných princípov terapie a prevencie šigelózy.

1. Príprava fixovaných preparátov z bakteriálnej kultúry.
2. Farbenie mikroprípravky od Gram.
3. Mikroskopia mikropreparátov s pomocou ponorného mikroskopu, ich rozbor a zakreslenie do protokolu z vyučovacej hodiny.
4. Mi chromoskopia a analýza demonštračných preparátov z čistých kultúr Shigella.
5. Náčrt demonštračných preparátov a schéma laboratórnej diagnostiky šigelózy v protokole.
6. Formulácia protokolu.