Coombsov test je u novorodenca pozitívny. Antiglobulínový test

Coombsov test je metóda laboratórny výskum vyrobené ovplyvňovaním hemaglutinácie. Je založená na citlivosti protilátok na imunoglobulíny a enzýmové prvky, ako aj na ich schopnosti aglutinovať erytrocyty potiahnuté C3 alebo Lg.

Priama diagnostika Coombs

Používa sa na detekciu protilátok alebo komponentov komplementu umiestnených na vonkajšej strane buniek. Priamy Coombsov test sa vykonáva podľa nasledujúcich krokov.

Použitie takéhoto testu

Diagnóza Direct Coombs sa používa v určitých prípadoch, ako napríklad:

• transfúzne účinky;
• autoimunitná hemolýza;
• lekárske hemolytická anémia.

Nepriamy Coombsov test

Táto diagnostika umožňuje detegovať protilátky proti bunkám v sére, ktoré sa spravidla inkubuje s erytrocytmi darcu typu 0, a potom sa vykoná priamy test. Aplikujte nepriamu diagnostiku Coombs v nasledujúcich prípadoch:

Ako sa pripraviť na analýzu

Existujú určité pravidlá prípravy na prieskum.

1. Ak je pacient novorodenec, rodičia by si mali uvedomiť, že vyšetrenie pomôže diagnostikovať HN (hemolytická choroba novorodenca).
2. Ak má pacient podozrenie na hemolytickú anémiu, treba mu vysvetliť, že rozbor mu umožní zistiť, či je spôsobená ochrannými poruchami, liekmi alebo inými faktormi.
3. Coombsov test, priamy ani nepriamy, nerobí žiadne diétne ani diétne obmedzenia.
4. Pacienta je potrebné upozorniť na odber krvi zo žily na vyšetrenie a tiež mu povedať, kedy presne bude venepunkcia vykonaná.
5. Mali by ste si tiež uvedomiť túto možnosť nepohodlie v období obväzovania ruky a samotného zákroku.
6. Lieky, ktoré môžu ovplyvniť výsledok vzorky, by sa mali vysadiť.

Tieto lieky zahŕňajú:

• "Streptomycín";
• "metyldopa";
• "prokaínamid";
• sulfónamidy;
• "Melfalan";
• "chinidín";
• "Rifampín";
• "Isoniazid";
• cefalosporíny;
• "Hydralazín";
• "chlórpromazín";
• "Levodopa";
• "tetracyklín";
• "difenylhydantoín";
• "etosuximid";
• "Penicilín";
• kyselina mefenamová.

Odber krvi sa robí ráno nalačno.

Ako sa podujatie koná

Coombsov test sa vykonáva v nasledujúcom poradí:

1. Pri vykonávaní diagnostiky u dospelého pacienta sa po venepunkcii odoberá krv do skúmaviek s EDTA (etyléndiamíntetraacetát).
2. Novorodencovi sa odoberie krv z pupočnej šnúry do kadičky s EDTA.
3. Zóna vpichu je stlačená vatový tampón kým sa krvácanie nezastaví.
4. Keď sa na mieste venepunkcie objaví modrina, sú predpísané teplé obklady.
5. Po odbere krvi sa pacient môže vrátiť k užívaniu abstinenčných liekov.
6. Rodičia novorodenca by mali byť informovaní, že môže byť potrebná sekundárna analýza na sledovanie dynamiky anémie.

Výhody Coombsovho testu

Takáto štúdia má niekoľko výhod, a to:

Nevýhody analýzy

Pozitívny Coombsov test je pomerne pracná metóda vyšetrenia, čo naznačuje charakteristickú presnosť vykonania. Pri jeho používaní sa možno stretnúť s určitými ťažkosťami, ktoré súvisia najmä s interpretáciou slabo pozitívnych vplyvov.

Zistilo sa, že chybné negatívne alebo slabo pozitívne reakcie pri výrobe vzoriek Coombs môžu byť dôsledkami neuspokojivého aktívneho premývania buniek, oslabenia antiglobulínového činidla zvyškami séra, ako aj zlúčenín nemastného vzhľadu, na ktorých antiglobulín môže byť fixovaný, čím stráca svoju účinnosť.

Coombsov test má ešte jednu nevýhodu – nízku stabilitu antiglobulínového činidla, ktorého získanie a uchovanie majú individuálnych charakteristík, čo podobne sťažuje kvantifikáciu účinku antiglobulínového séra na hemaglutináciu.

Choroby, ktoré možno zistiť počas štúdie

Coombsova diagnostika umožňuje odhaliť určité typy chorôb, ako napríklad:

• hemolytická nevoľnosť novorodencov;
• rôzne transfúzne reakcie;
• autoimunitná hemolýza;
• liečivá hemolytická anémia.

K dnešnému dňu sa Coombsov test považuje za pomerne populárny systém krvného testu u dospelých aj novorodencov. Umožňuje identifikovať mnoho rôznych chorôb.

Priamy Coombsov test (antiglobulínový test) - pozitívna reakcia zisťuje protilátky (antierytrocytové protilátky - anti-D, C, E, c a e) alebo zložky komplementu fixované na povrchu červených krviniek v krvi pacientov s autoimunitnou hemolytikou anémia. Negatívna reakcia nevylučuje imunitné ochorenie, pretože protilátky sa môžu nachádzať vo voľnej forme v plazme (nie sú spojené s červenými krvinkami). Na ich detekciu sa vykonáva nepriamy Coombsov test.

Indikácie na použitie: stanovenie imunitnej povahy hemolytickej anémie.

Pozitívna reakcia je vyjadrená skutočnosťou, že erytrocyty chorého človeka, na ktorých sú fixované protilátky, aglutinujú pri interakcii s antiglobulínovým sérom (proti protilátkam) získaným po imunizácii králika. Priamy Coombsov test sa vykonáva, keď existuje dôvod domnievať sa, že študované erytrocyty už boli senzibilizované in vivo zodpovedajúcimi protilátkami, t.j. prvá fáza reakcie - už došlo k fixácii protilátok na povrchu erytrocytov a pridanie antiglobulínového séra spôsobuje aglutináciu senzibilizovaných buniek. Inými slovami, pozitívny priamy Coombsov test znamená, že in vivo sú na povrchu erytrocytov potiahnuté imunoglobulíny alebo komplement.

Pomocou priameho Coombsovho testu sa zisťujú imunoglobulíny (protilátky) na povrchu červených krviniek. Ide o imunoglobulíny, ktoré sa tvoria v reakcii na senzibilizáciu na akékoľvek antigény, ako je Rh faktor. Na nastavenie vzorky sa k premytým erytrocytom pridá sérum s antiglobulínom (Coombsovo sérum). Ak sú na erytrocytoch imunoglobulíny alebo komplement, dochádza k aglutinácii. Test sa nazýva priamy, keďže je jednostupňový – vyžaduje len pridanie Coombsovho séra do umytých červených krviniek.

Z mnohých existujúcich antigénov v lekárska prax najvyššia hodnota podávané trom typom krvných aglutinogénov. Jedným z nich je typ zodpovedný za prejav faktora Rh: ak je prítomný na membráne erytrocytov, diagnostikuje sa krvná skupina Rh +, ak chýba - Rh-. Ak erytrocyty s Rh + aglutinogénmi vstúpia do zloženia Rh-negatívnej krvi, telo spustí imunitnú odpoveď a začne produkovať protilátky proti tomuto antigénu, čo spôsobuje patologické stavy.

REFERENCIA! Rh faktor je komplexný viaczložkový systém niekoľkých desiatok antigénov. Najbežnejšie z nich sú aglutinogény typu D (85 % prípadov), ako aj E a C.

Coombsov test sa vykonáva iba za prítomnosti priamych indikácií. Spoločný zoznam dôvody na predpísanie Coombsovho testu:

• plánovanie a riadenie tehotenstva (rodičia majú rôzne Rh);
• darcovstvo a príprava na transfúziu krvi (nesúlad krvi v Rh nie je o nič menej škodlivý ako nesúlad v systéme AB0);
• plánované chirurgická intervencia(v prípade doplnenia straty krvi pomocou krvnej transfúzie);
• diagnostika hemolytických ochorení.

Konkrétnejšie indikácie závisia od typu vykonávanej štúdie.

Priamy Coombsov test

Priamy test zisťuje protilátky na povrchu červených krviniek. To je nevyhnutné pre diagnostiku existujúcich hemolytické patológie:

• autoimunitné (erytrocyty a hemoglobín sú zničené v dôsledku útoku vlastných protilátok tela);
• lekárske ( patologický proces začne brať nejaké lieky chinidínového alebo prokaínamidového typu);
• po transfúzii (s nezhodou krvnej skupiny počas transfúzie), ako aj vo forme Rh konfliktu počas tehotenstva (erytroblastóza novorodencov).

REFERENCIA! Hemolytická anémia je ochorenie spojené s predčasnou deštrukciou červených krviniek v dôsledku hemolýzy, ktorá vedie k nedostatočnej saturácii krvi kyslíkom a hypoxii mozgu a/alebo vnútorných orgánov.

Hemolýza krviniek sa pozoruje pri onkologických, infekčných, reumatických ochoreniach, takže priamy Coombsov test možno použiť ako dodatočný opravný prostriedok diagnostika patologický stav. Zároveň je potrebné pripomenúť: negatívna hodnota analýzy nevylučuje možnosť hemolýzy, ale je dôvodom na ďalšie vyšetrenie.

Nepriamy Coombsov test

Na prevenciu patologických situácií sa častejšie používa nepriamy test. Pomáha detekovať protilátky v krvnej plazme, čo je nevyhnutné na posúdenie transfúznej kompatibility a diagnostiku rizík Rh konfliktu počas tehotenstva.

Viac ako 80 % ľudí má pozitívny Rh faktor (Rh +), respektíve necelých 20 % je Rh negatívnych. Ak sa u Rh-matky vyvinie Rh+ dieťa, jej telo začne produkovať protilátky, ktoré napádajú červené krvinky plodu a spôsobujú hemolýzu.

Ak vezmeme do úvahy skutočnosť, že percento sobášov „odlišných Rhesus“ dosahuje 12 – 15 %, riziko hemolytickej choroby novorodencov by malo byť vysoké, ale v skutočnosti iba v 1 z 25 takýchto prípadov u žien, fenomén pozoruje sa senzibilizácia (pre 200 úspešných pôrodov, 1 príklad hemolytickej patológie). Čiastočne je to spôsobené tým, že prvé Rh-pozitívne dieťa zvyčajne nespôsobuje otvorenú agresiu tela matky; prevažná väčšina prípadov sa vyskytuje u druhého a ďalších detí. Platí rovnaký princíp ako pri bežnej senzibilizácii na konkrétny alergén.

Pri prvom kontakte nenastane žiadna reakcia. Telo sa len zoznámi s novým antigénom preňho, produkujúceho protilátky triedy IgM, ktoré sú zodpovedné za rýchlu imunitnú odpoveď, no málokedy prenikajú cez placentárnu bariéru do krvi dieťaťa. Všetky patologické reakcie sa prejavujú pri opakovanom „stretnutí“, keď sa v tele začnú produkovať protilátky triedy IgG, ktoré ľahko prenikajú do krvného obehu plodu a spúšťajú proces hemolýzy.

Nepriamy Coombsov test počas tehotenstva umožňuje zistiť prítomnosť protilátok v tele matky a včas identifikovať počiatočná fáza senzibilizácia. Kladná odpoveď vyžaduje registráciu s mesačnou štúdiou titra protilátok a povinnú hospitalizáciu 3-4 týždne pred pôrodom.

REFERENCIA! Inkompatibilita Rh faktora nijako neovplyvňuje stav matky, hemolytická choroba sa vyvíja iba u dieťaťa. V závažných prípadoch a pri absencii včasnej odpovede môže plod zomrieť v maternici alebo bezprostredne po narodení.

Príprava na postup a jeho realizácia

Používa sa na diagnostiku žilovej krvi. Špeciálna dlhodobá príprava na Coombsov test nie je potrebná. Pred odberom krvi z žily na analýzu sa snažte dodržiavať štandardný súbor pravidiel:

• vzdať sa alkoholu na 3 dni, lieky(Ak je to možné);
• naplánujte si posledné jedlo na viac ako 8 hodín pred odberom krvi na analýzu;
• vzdať sa fajčenia, fyzického, duševného a emočného stresu za 1 hodinu;
• Pred procedúrou vypite pohár čistej nesýtenej vody.

Metóda výskumu je založená na hemaglutinačnej reakcii.

Pri vykonávaní priameho testu vzorka krvi je vystavená vopred pripravenému antiglobulínovému séru so známymi indikátormi, zmes sa nejaký čas uchováva a kontroluje sa na prítomnosť aglutinátov, ktoré sa tvoria pri prítomnosti protilátok na erytrocytoch. Hladina aglutinátov sa diagnostikuje pomocou aglutinačného titra.

Nepriamy test Coombs má podobnú techniku, ale zložitejšiu postupnosť akcií. Do oddeleného krvného séra sa zavedú antigénne erytrocyty (s Rh faktorom) a až po týchto manipuláciách sa pridá antiglobulínové sérum na diagnostiku a titer aglutinátov.

Výsledky výskumu

Normálne aj priame a nepriamy Coombsov test mal by dať negatívny výsledok:

• negatívny priamy test naznačuje, že špecifické protilátky proti Rh faktoru spojenému s červenými krvinkami v krvi chýbajú a nemôžu byť príčinou hemolýzy
• negatívny nepriamy test ukazuje, že v krvnej plazme nie sú ani žiadne voľné protilátky proti Rh faktoru; skutočnosť poukazuje na kompatibilitu krvi darcu s krvou príjemcu (alebo krvou matky a dieťaťa) podľa Rh faktora.

Pozitívny Coombsov test naznačuje skutočnosť Rh senzibilizácie tela, čo je hlavný dôvod Rh konflikt v prípade transfúzie krvi alebo pri nosení dieťaťa s odlišným stavom Rh. V tomto prípade zostávajú výsledky nezmenené počas 3 mesiacov (životnosť erytrocytov). Ak sa príčinou stala autoimunitná hemolytická anémia, pozitívny test môže pacienta prenasledovať niekoľko rokov (v niektorých prípadoch aj celý život).

REFERENCIA! Antiglobulínový test je vysoko citlivý, ale má malý informačný obsah. Neregistruje aktivitu hemolytického procesu, neurčuje typ protilátky a nie je schopný identifikovať príčinu patológie. Ak chcete získať úplnejší obraz, musí predpísať ošetrujúci lekár dodatočný výskum(mikroskopia krvi, všeobecná a biochemická analýza, reumatické testy, ESR, hladiny železa a feritínu).

Stupeň senzibilizácie môže mať kvalitatívne vyjadrenie (od „+“ do „++++“) alebo kvantitatívne – vo forme nadpisu:

• 1:2 - nízka hodnota, nepredstavuje nebezpečenstvo;
• 1:4 - 1:8 - začiatok vývoja imunologickej reakcie; nepredstavuje nebezpečenstvo, ale vyžaduje neustále monitorovanie;
• 1:16 -1:1024 - svetlá forma senzibilizácie, opatrenia by sa mali prijať okamžite.

Príčina pozitívna vzorka Môžem byť:

• transfúzia netypizovanej krvi (alebo s preklepom), keď sa Rh faktor darcu a príjemcu nezhoduje;
• Rhesus konflikt počas tehotenstva (ak sa zloženie krvných antigénov u otca a matky nezhoduje);
• autoimunitná hemolytická anémia - vrodená (primárna) aj sekundárna, ktorá je dôsledkom určitých ochorení (Evansov syndróm, infekčná pneumónia, syfilis, studená hemoglobinúria, lymfóm);
• lieková hemolytická reakcia.

Žiadny z vyššie uvedených problémov nemôže pacient vyriešiť bez zdravotná starostlivosť. Vo všetkých prípadoch bude potrebná urgentná konzultácia, registrácia alebo núdzová hospitalizácia.

POZOR! IN zriedkavé prípady Je možný falošne pozitívny Coombsov test. Dôvodom môžu byť časté transfúzie krvi, ako aj množstvo chorôb: reumatoidná artritída, lupus erythematosus, sarkoidóza. Tento jav možno pozorovať aj po odstránení sleziny, ako aj pri porušení priebehu reakcie (časté pretrepávanie obsahu, prítomnosť kontaminantov).

Aglutinačná reakcia na stanovenie protilátok proti Rhesus (nepriama Coombsova reakcia)uplatniť u pacientov s intravaskulárnou hemolýzou. U niektorých z týchto pacientov sa nachádzajú protilátky proti Rhesus, ktoré sú neúplné, monovalentné. Špecificky interagujú s Rh-pozitívnymi erytrocytmi, ale nespôsobujú ich aglutináciu. Prítomnosť takýchto neúplných protilátok sa stanovuje v nepriamej Coombsovej reakcii. K tomu sa do systému anti-Rhesus protilátky + Rh-pozitívne erytrocyty pridáva antiglobulínové sérum (protilátky proti ľudským imunoglobulínom), ktoré spôsobuje aglutináciu erytrocytov. Pomocou Coombsovej reakcie sa diagnostikujú patologické stavy spojené s intravaskulárnou lýzou erytrocytov imunitného pôvodu, napríklad hemolytická choroba novorodenca: erytrocyty Rh-pozitívneho plodu sa spájajú s neúplnými protilátkami proti Rh faktoru cirkulujúcimi v krvi, ktoré prechádzajú placenta od Rh-negatívnej matky.

Mechanizmus. Obtiažnosť detekcie neúplných (monovalentných) protilátok je spôsobená tým, že tieto protilátky pri väzbe na epitopy špecifického antigénu netvoria mriežkovú štruktúru a reakcia medzi antigénmi a protilátkami sa nezistí aglutináciou, precipitáciou, resp. iné testy. Na identifikáciu vytvorených komplexov antigén-protilátka sa musia použiť ďalšie testovacie systémy. Na detekciu neúplných protilátok, napríklad proti Rh antigénu erytrocytov v krvnom sére tehotnej ženy, sa reakcia uskutočňuje v dvoch fázach: 1) erytrocyty obsahujúce Rh antigén sa pridajú do dvojnásobného riedenia testovacieho séra a udržiava sa pri teplote 37 °C počas jednej hodiny; 2) k erytrocytom dôkladne umytým po prvej fáze pridajte králičie anti-ľudské antiglobulínové sérum (vo predtitrovanom pracovnom riedení). Po inkubácii počas 30 minút pri 37 °C sa výsledky hodnotia podľa prítomnosti hemaglutinácie (pozitívna reakcia). Je potrebné kontrolovať zložky reakcie: 1) antiglobulínové sérum + erytrocyty zjavne senzibilizované špecifickými protilátkami; 2) erytrocyty ošetrené normálnym sérom + antiglobulínovým sérom; 3) Rh-negatívne erytrocyty ošetrené testovaným sérom + antiglobulínovým sérom.

50. Pasívna hemaglutinačná reakcia. Mechanizmus. Komponenty. Aplikácia.

Reakcia nepriamej (pasívnej) hemaglutinácie(RNGA, RPGA) je založená na použití erytrocytov (alebo latexu) s antigénmi alebo protilátkami adsorbovanými na ich povrchu, ktorých interakcia s príslušnými protilátkami alebo antigénmi krvného séra pacientov spôsobuje zlepenie erytrocytov a ich vypadávanie na dno rúrka alebo bunka vo forme vrúbkovaného sedimentu.

Komponenty. Na výrobu RNHA možno použiť erytrocyty oviec, koní, králikov, kurčiat, myší, ľudí a iných, ktoré sa zbierajú pre budúce použitie, upravujú sa formalínom alebo glutaraldehydom. Adsorpčná kapacita erytrocytov sa zvyšuje, keď sú ošetrené roztokmi tanínu alebo chloridu chrómového.

Ako antigény v RNGA môžu slúžiť polysacharidové antigény mikroorganizmov, extrakty bakteriálnych vakcín, antigény vírusov a rickettsie, ako aj iné látky.

Erytrocyty senzibilizované AG sa nazývajú erytrocytové diagnosticum. Na prípravu erytrocytového diagnostika sa najčastejšie používajú baranie erytrocyty, ktoré majú vysokú adsorpčnú aktivitu.

Aplikácia. RNHA sa používa na diagnostiku infekčných ochorení, stanovenie gonadotropného hormónu v moči pri tehotenstve, na zistenie precitlivenosti na lieky, hormóny av niektorých ďalších prípadoch.

Mechanizmus. Nepriamy hemaglutinačný test (RIHA) má oveľa vyššiu senzitivitu a špecificitu ako aglutinačný test. Slúži na identifikáciu patogénu podľa jeho antigénnej štruktúry alebo na indikáciu a identifikáciu bakteriálnych produktov – toxínov v študovanom patologickom materiáli. V súlade s tým sa používajú štandardné (komerčné) erytrocytové protilátkové diagnostické prostriedky, získané adsorpciou špecifických protilátok na povrchu tanínových (tanínom ošetrených) erytrocytov. Postupné riedenia testovaného materiálu sa pripravia v jamkách plastových platní. Potom sa do každej jamky pridá rovnaký objem 3 % suspenzie erytrocytov naplnených protilátkou. V prípade potreby sa reakcia umiestni paralelne do niekoľkých radov jamiek s erytrocytmi naplnenými protilátkami s rôznou skupinovou špecifickosťou.

Po 2 hodinách inkubácie pri 37 °C sa výsledky zohľadnia a vyhodnotia sa vzhľad sediment erytrocytov (bez pretrepávania): s negatívnou reakciou sa na dne jamky objaví zrazenina vo forme kompaktného disku alebo krúžku, s pozitívnou reakciou, charakteristický čipkovaný sediment erytrocytov, tenký film s nerovnými okrajmi.

Hemolytická anémia, spôsobené autoimunitnými telieskami, ktoré sú namierené proti ich vlastným červeným krvinkám, neboli presne objasnené. Predpokladá sa však, že niektoré faktory (napríklad vírus, abnormálny proteín) menia erytrocyty tak, že ich telo už vníma ako „niečo cudzie“ a vyrovnáva sa s nimi pomocou protilátok. Podľa inej teórie protilátky namierené proti erytrocytom vznikajú takmer náhodou pri tvorbe abnormálnych plazmatických proteínových tiel pri určitých ochoreniach. Takéto proteínové telieska môžu rovnakým spôsobom „náhodne“ vyvolať reakcie, ktoré možno použiť na stanovenie diagnózy (napr. vírusový zápal pľúc je známe, že má pozitívny Wassermannov test, pozitívny Paul-Bunnelov test a studený aglutinačný test).

Existujú dva hlavné typy autoprotilátok s hemolytickou anémiou, a to: teplé protilátky (reagujú pri 37 °) a studené protilátky (ktorých reaktivita sa zvyšuje, keď sa teplota blíži k nule). Teplé protilátky sú bežnejšie ako studené. Dacie zistil, že teplé hemolyzíny sú dvakrát častejšie ako studené hemolyzíny. Hemolyzíny a aglutiníny nie sú zásadne odlišné protilátky: líšia sa iba povahou svojho účinku. Aglutiníny aglutinujú červené krvinky a hemolyzíny ich robia náchylnejšími na komplexný proces hemolýzy (doplnok!). Autoprotilátky, fixujúce sa na erytrocytoch, tvoria komplex erytrocyt-globín. Tento komplex sa zisťuje pomocou antiglobínového Coombsovho testu.

Coombsov test uskutočnené Coombsovým sérom, na prípravu ktorého sa králik senzibilizuje ľudským sérom, proti ktorému sa v králičom sére tvoria protilátky. Pri pôsobení takto senzibilizovaného séra na ľudské erytrocyty dochádza k ich aglutinácii, ak sú receptory erytrocytov obsadené blokovacími protilátkami. Keďže tieto blokujúce protilátky pochádzajú z ľudského séra, aglutinujú sa s králičím sérom senzibilizovaným na ľudskú plazmu a obsahujúcim precipitíny. Táto reakcia sa nazýva Coombsov test; pre hemolytickú anémiu na podklade autoimunitných teliesok (Lo tit) je takmer špecifická (podrobne pozri Maier).

Vo všeobecnosti s hemolytickou anémiou pri primárnom porušení erytrocytov je Coombsov test negatívny a pri získaných je pozitívny. Z tohto pravidla však existujú určité výnimky: falošne pozitívny Coombsov test bol zistený počas kríz konštitučnej hemolytickej anémie a v r. nízky stupeň- tiež niekedy po splenektómii, pri reumatickej horúčke, sarkoidóze, po častých krvných transfúziách a pri systémovom lupus erythematosus. Prirodzene, pri získanej hemolytickej anémii bez tvorby autoimunitných teliesok je negatívna.

Hemolytická anémia spôsobené autoimunitnými telieskami možno rozdeliť na:
a) akútne, subakútne a chronické formy, ako aj na
b) idiopatické s neznámou etiológiou a c) symptomatické [vírusová pneumónia (iba studené aglutiníny), chronická lymfatická leukémia, retikulosarkóm, lymfosarkóm, systémový lupus erythematosus (prevažne teplé, zriedkavo studené aglutiníny), syfilis (studené aglutiníny), Miescherove nádory vaječníkov zamestnanci)).
c) symptomatická [vírusová pneumónia (iba studené aglutiníny), chronická lymfatická leukémia, retikulosarkóm, lymfosarkóm, systémový lupus erythematosus (prevažne teplé, menej často studené aglutiníny), syfilis (studené aglutiníny), nádory vaječníkov (Miescher et al.)).

Klinika hemolytickej anémie, vyvíjajúci sa pod vplyvom autoimunitných teliesok, je veľmi rôznorodý, a preto je sotva možné nakresliť ich všeobecný klinický obraz. Osoby každého veku a oboch pohlaví sú postihnuté rovnomerne. Zdá sa však, že idiopatické formy sú bežnejšie u žien (Sacks a Workman).

Klinický obraz idiopatickej formy sa líši v závislosti od závažnosti ochorenia. V chronických prípadoch je nástup postupný, ochorenie trvá dlhé roky s časté exacerbácie. Závažnosť anémie sa líši v závislosti od stupňa hemolýzy. Pozorujú sa kvapky hemoglobínu až do 10%, v iných prípadoch sa hemoglobín dlhodobo zadržiava o 50-60%. Intenzita retikulocytózy a ikterického sfarbenia kože a séra zodpovedá stupňu hemolýzy. Bilirubín sa veľmi zriedkavo nachádza v moči, pretože neprechádza obličkami, ale pozoruje sa hemoglobinúria. Slezina v chronických prípadoch je často zväčšená a môže dokonca dosiahnuť veľmi významné veľkosti, zatiaľ čo v iných prípadoch je stále hmatateľná. Pečeň je zriedkavo zväčšená.

Vo väčšine prípadov v krvi je pozorovaná makrocytóza akútne štádiá je tiež veľa mikrocytov, zriedka chýba normoblastóza a polychromázia, leukocytóza môže dosiahnuť 30 000, krvné doštičky sú normálne. V niektorých prípadoch však existuje výrazná trombocytopénia. Evans vysvetľuje tieto prípady súčasnou prítomnosťou protilátok proti krvným doštičkám, takže dochádza k hemolytickej anémii aj trombocytopénii v dôsledku pôsobenia autoimunitných teliesok – Evansov syndróm (Evans). Osmotická rezistencia je mierne znížená, ale nie v takej miere a nie tak trvalo ako pri konštitučnej anémii sférických buniek. Test tepelnej odolnosti (Hegglin-Maier) po 6 hodinách môže tiež poskytnúť miernu hemolýzu (vlastné pozorovanie), ale v menšom rozsahu ako pri Marchiafavovej anémii. Hemosiderín sa nachádza aj v moči (vlastné pozorovanie).