Coombsin testi on positiivinen vastasyntyneellä. Antiglobuliinitesti

Coombsin testi on menetelmä laboratoriotutkimus tehty vaikuttamalla hemagglutinaatioon. Se perustuu vasta-aineiden herkkyyteen immunoglobuliineja ja entsyymielementtejä vastaan ​​sekä niiden kykyyn agglutinoida C3:lla tai Lg:llä päällystettyjä punasoluja.

Coombsin suora diagnoosi

Käytetään solujen ulkopuolelle asennettujen vasta-aineiden tai komplementtikomponenttien havaitsemiseen. Suora Coombs-testi suoritetaan seuraavilla vaiheilla.

Tällaisen testin käyttö

Suoraa Coombsin diagnoosia käytetään tietyissä tapauksissa, kuten:

• verensiirron vaikutukset;
• autoimmuuni hemolyysi;
• lääketieteellinen hemolyyttinen anemia.

Epäsuora Coombsin testi

Tämä diagnostiikka mahdollistaa solujen vasta-aineiden havaitsemisen seerumista, jota inkuboidaan yleensä luovuttajan tyypin 0 punasolujen kanssa, ja sitten suoritetaan suora testi. Käytä epäsuoraa Coombs-diagnostiikkaa seuraavissa tapauksissa:

Kuinka valmistautua analyysiin

Kyselyyn valmistautumisessa on joitain sääntöjä.

1. Jos potilas on vastasyntynyt, vanhempien tulee olla tietoisia siitä, että testaus auttaa diagnosoimaan HN:n (vastasyntyneen hemolyyttinen sairaus).
2. Jos potilaalla on epäilyksiä hemolyyttisestä anemiasta, hänelle tulee selittää, että analyysin avulla hän voi selvittää, johtuuko se suojahäiriöistä, lääkkeistä tai muista tekijöistä.
3. Coombsin testi, suora tai epäsuora, ei aseta mitään ruokavalio- tai ruokavaliorajoituksia.
4. Potilaalle tulee ilmoittaa, että laskimosta otetaan verta tutkimusta varten, ja myös kertoa milloin tarkalleen laskimopunktio tehdään.
5. Sinun tulee myös varoittaa mahdollisuudesta epämukavuutta käsivarren sitomisen ja itse toimenpiteen aikana.
6. Lääkkeet, jotka voivat vaikuttaa näytteen tuloksiin, on lopetettava.

Näitä lääkkeitä ovat:

• "Streptomysiini";
• "metyylidopa";
• "Prokaiiniamidi";
• sulfonamidit;
• "Melphalan";
• "Kinidiini";
• "Rifampiini";
• "isoniatsidi";
• kefalosporiinit;
• "Hydralatsiini";
• "Klooripromatsiini";
• "Levodopa";
• "Tetrasykliini";
• "Difenyylihydantoiini";
• "Etosuksimidi";
• "Penisilliini";
• mefenaamihappo.

Verinäytteet otetaan aamulla tyhjään vatsaan.

Miten tapahtuma järjestetään

Coombsin testi suoritetaan seuraavassa järjestyksessä:

1. Tehtäessä diagnostiikkaa aikuispotilaalle laskimopunktion jälkeen veri otetaan putkiin EDTA:lla (etyleenidiamiinitetraasetaatti).
2. Vastasyntyneestä veri otetaan napanuorasta dekantterilasiin, jossa on EDTA:ta.
3. Pistoaluetta painetaan vanupuikko kunnes verenvuoto lakkaa.
4. Kun mustelma ilmestyy laskimonpistokohtaan, määrätään lämpimiä kompressioita.
5. Verenoton jälkeen potilas voi palata vieroituslääkkeiden käyttöön.
6. Vastasyntyneen vanhemmille tulee kertoa, että anemian dynamiikan seuraamiseksi voidaan tarvita toissijainen analyysi.

Coombsin testin edut

Tällaisella tutkimuksella on joitain etuja, nimittäin:

Analyysin haitat

Positiivinen Coombsin testi on melko työläs tutkimusmenetelmä, mikä viittaa tyypilliseen suorituksen tarkkuuteen. Sitä käytettäessä voi kohdata tiettyjä vaikeuksia, jotka liittyvät erityisesti heikosti positiivisten vaikutusten tulkintaan.

On todettu, että virheelliset negatiiviset tai heikosti positiiviset reaktiot Coombs-näytteiden tuotannossa voivat olla seurausta solujen epätyydyttävästä aktiivisesta pesusta, antiglobuliinireagenssin heikentymisestä seerumijäännöksillä sekä yhdisteistä, jotka eivät ole rasvaisia. antiglobuliini voidaan korjata, mikä menettää tehonsa.

Coombsin testillä on toinen haittapuoli - antiglobuliinireagenssin alhainen stabiilisuus, jonka hankinnassa ja säilymisessä on yksilölliset ominaisuudet, mikä tekee samoin vaikeaksi kvantifioida antiglobuliiniseerumin vaikutusta hemagglutinaatioon.

Sairaudet, jotka voidaan havaita tutkimuksen aikana

Coombsin diagnostiikka mahdollistaa tietyntyyppisten sairauksien havaitsemisen, kuten:

• vastasyntyneiden hemolyyttinen huonovointisuus;
• erilaiset verensiirtoreaktiot;
• autoimmuuni hemolyysi;
• lääketieteellinen hemolyyttinen anemia.

Tähän mennessä Coombsin testiä pidetään melko suosittuna verikoejärjestelmänä sekä aikuisilla että vastasyntyneillä. Sen avulla voidaan tunnistaa monia erilaisia ​​sairauksia.

Suora Coombsin testi (antiglobuliinitesti) - positiivinen reaktio havaitsee vasta-aineet (anti-erytrosyyttivasta-aineet - anti-D, C, E, c ja e) tai punasolujen pinnalle kiinnittyneet komplementtikomponentit potilaiden veressä, joilla on autoimmuuni hemolyyttinen anemia. Negatiivinen reaktio ei sulje pois immuuni sairaus, koska vasta-aineet löytyvät vapaassa muodossa plasmasta (ei liity punasoluihin). Niiden havaitsemiseksi suoritetaan epäsuora Coombs-testi.

Käyttöaiheet: hemolyyttisen anemian immuuniluonteen määrittäminen.

Positiivinen reaktio ilmenee siinä, että sairaan ihmisen punasolut, joihin on kiinnitetty vasta-aineita, agglutinoituvat vuorovaikutuksessa kanin immunisoinnin jälkeen saadun antiglobuliiniseerumin kanssa (vasta-aineita vastaan). Suora Coombs-testi suoritetaan, kun on syytä uskoa, että tutkitut punasolut on jo herkistetty in vivo vastaavilla vasta-aineilla, ts. reaktion ensimmäinen vaihe - vasta-aineiden kiinnittyminen erytrosyyttien pinnalle on jo tapahtunut ja antiglobuliiniseerumin lisääminen aiheuttaa herkistyneiden solujen agglutinaation. Toisin sanoen positiivinen suora Coombs-testi tarkoittaa, että erytrosyyttien pinnalla on in vivo immunoglobuliineja tai komplementteja päällystettyinä.

Suoran Coombs-testin avulla immunoglobuliinit (vasta-aineet) havaitaan punasolujen pinnalta. Nämä ovat immunoglobuliineja, jotka muodostuvat vasteena herkistymiselle mille tahansa antigeenille, kuten Rh-tekijälle. Näytteen asentamiseksi pestyihin punasoluihin lisätään seerumia, jossa on antiglobuliinia (Coombsin seerumi). Jos erytrosyyteissä on immunoglobuliineja tai komplementteja, tapahtuu agglutinaatiota. Testiä kutsutaan suoraksi, koska se on yksivaiheinen - se vaatii vain Coombsin seerumin lisäämisen pestyihin punasoluihin.

Monista olemassa olevista antigeeneistä lääkärin käytäntö korkein arvo annetaan kolmelle veren agglutinogeenityypille. Yksi niistä on tyyppi, joka on vastuussa Rh-tekijän ilmenemisestä: jos sitä on punasolukalvolla, diagnosoidaan Rh + -veriryhmä, jos sitä ei ole - Rh-. Jos erytrosyytit, joissa on Rh + -agglutinogeenia, tulevat Rh-negatiivisen veren koostumukseen, keho laukaisee immuunivasteen ja alkaa tuottaa vasta-aineita tälle antigeenille, mikä aiheuttaa patologisia tiloja.

VIITE! Rh-tekijä on monimutkainen monikomponenttijärjestelmä, jossa on useita kymmeniä antigeenejä. Näistä yleisimmät ovat D-tyypin agglutinogeenit (85 % tapauksista) sekä E ja C.

Coombsin testi suoritetaan vain suorien indikaatioiden läsnä ollessa. Yhteinen lista syyt Coombsin testin määräämiseen:

• raskauden suunnittelu ja hallinta (vanhemmilla on erilainen Rh);
• luovutus ja verensiirtoon valmistautuminen (veren epäsuhta Rh:ssa ei ole yhtä haitallinen kuin epäsuhta AB0-järjestelmässä);
• suunniteltu kirurginen interventio(jos verenhukkaa täydennetään verensiirron avulla);
• hemolyyttisten sairauksien diagnosointi.

Tarkemmat käyttöaiheet riippuvat suoritettavan tutkimuksen tyypistä.

Suora Coombsin testi

Suora testi havaitsee vasta-aineita punasolujen pinnalla. Tämä on välttämätöntä olemassa olevan diagnoosin kannalta hemolyyttiset patologiat:

• autoimmuuni (erytrosyytit ja hemoglobiini tuhoutuvat kehon omien vasta-aineiden hyökkäyksen seurauksena);
• lääketieteellinen ( patologinen prosessi alkaa ottaa vähän lääkkeet kinidiini- tai prokaiiniamidityyppi);
• verensiirron jälkeen (veriryhmän epäsuhta verensiirron aikana) sekä Rh-konfliktin muodossa raskauden aikana (vastasyntyneiden erytroblastoosi).

VIITE! Hemolyyttinen anemia on sairaus, joka liittyy punasolujen ennenaikaiseen tuhoutumiseen hemolyysin seurauksena, mikä johtaa riittämättömään veren happisaturaatioon ja aivojen ja/tai sisäelinten hypoksiaan.

Verisolujen hemolyysiä havaitaan onkologisissa, infektio- ja reumaattisissa sairauksissa, joten suoraa Coombsin testiä voidaan käyttää lisälääke diagnostiikka patologinen tila. Samanaikaisesti on syytä muistaa: analyysin negatiivinen arvo ei sulje pois hemolyysin mahdollisuutta, mutta on syy lisätutkimukseen.

Epäsuora Coombsin testi

Epäsuoraa testiä käytetään useammin patologisten tilanteiden ehkäisyyn. Se auttaa havaitsemaan vasta-aineita veriplasmasta, mikä on välttämätöntä verensiirron yhteensopivuuden arvioimiseksi ja Rh-konfliktin riskien diagnosoimiseksi raskauden aikana.

Yli 80 %:lla ihmisistä on positiivinen Rh-tekijä (Rh+), vastaavasti hieman alle 20 %:lla Rh-negatiivisia. Jos Rh-äidille kehittyy Rh+-vauva, hänen kehonsa alkaa tuottaa vasta-aineita, jotka hyökkäävät sikiön punasoluja vastaan ​​ja aiheuttavat hemolyysin.

Kun otetaan huomioon se tosiasia, että "eri-reesus"-avioliittojen prosenttiosuus saavuttaa 12-15%, vastasyntyneen hemolyyttisen taudin riskin pitäisi olla korkea, mutta todellisuudessa vain 1/25 tällaisesta tapauksesta naisilla, ilmiö. herkistymistä (200 onnistuneesta synnytyksestä, 1 esimerkki hemolyyttisestä patologiasta). Tämä johtuu osittain siitä, että ensimmäinen Rh-positiivinen lapsi ei yleensä aiheuta äidin kehon avointa aggressiota; Suurin osa tapauksista esiintyy toisella ja sitä seuraavilla lapsilla. Sama periaate pätee kuin tavanomaisessa herkistyksessä tietylle allergeenille.

Ensimmäisellä kosketuksella ei tapahdu reaktiota. Keho vain tutustuu sille uuteen antigeeniin, joka tuottaa IgM-luokan vasta-aineita, jotka vastaavat nopeasta immuunivasteesta, mutta tunkeutuvat harvoin istukan läpi lapsen vereen. Kaikki patologiset reaktiot ilmenevät toistuvassa "tapaamisessa", kun kehossa alkaa muodostua IgG-luokan vasta-aineita, jotka tunkeutuvat helposti sikiön verenkiertoon ja alkavat hemolyysiprosessin.

Epäsuora Coombsin testi raskauden aikana Sen avulla voit havaita vasta-aineiden läsnäolon äidin kehossa ja tunnistaa ne ajoissa alkuvaiheessa herkistyminen. Myönteinen vastaus edellyttää rekisteröitymistä kuukausittaiseen vasta-ainetiitteritutkimukseen ja pakollista sairaalahoitoa 3-4 viikkoa ennen synnytystä.

VIITE! Rh-tekijän yhteensopimattomuus ei vaikuta äidin tilaan millään tavalla, hemolyyttinen sairaus kehittyy vain lapsella. Vakavissa tapauksissa ja ilman oikea-aikaista vastausta sikiö voi kuolla kohdussa tai heti syntymän jälkeen.

Menettelyyn valmistautuminen ja sen toteuttaminen

Käytetään diagnoosiin laskimoveri. Erityistä pitkäaikaista valmistautumista Coombsin testiin ei vaadita. Yritä noudattaa vakiosääntöjä, ennen kuin otat verta suonesta analysointia varten:

• luopua alkoholista 3 päiväksi, lääkkeitä(jos mahdollista);
• suunnittele viimeinen ateria myöhemmin kuin 8 tuntia ennen veren ottamista analyysiä varten;
• lopeta tupakointi, fyysinen, henkinen ja emotionaalinen stressi 1 tunnissa;
• Juo lasillinen puhdasta hiilihapotonta vettä ennen toimenpidettä.

Tutkimusmenetelmä perustuu hemagglutinaatioreaktioon.

Kun suoritat suoran testin verinäyte altistetaan ennalta valmistetulle antiglobuliiniseerumille tunnetuilla indikaattoreilla, seosta pidetään jonkin aikaa ja tarkistetaan agglutinaatit, joita muodostuu vasta-aineiden esiintyessä punasoluissa. Agglutinaattien taso diagnosoidaan käyttämällä agglutinaatiotiitteriä.

Epäsuora testi Coombsilla on samanlainen tekniikka, mutta monimutkaisempi toimintosarja. Antigeeniset erytrosyytit (jossa on Rh-tekijä) viedään erotettuun veren seerumiin, ja vasta näiden manipulaatioiden jälkeen lisätään antiglobuliiniseerumia diagnoosia ja agglutinaattitiitteriä varten.

Tutkimustulokset

Normaalisti sekä suorat että epäsuora Coombsin testi pitäisi antaa negatiivinen tulos:

• negatiivinen suora testi osoittaa, että veressä ei ole spesifisiä vasta-aineita punasoluihin liittyvää Rh-tekijää vastaan, eivätkä ne voi olla hemolyysin syy
• negatiivinen epäsuora testi osoittaa, että veriplasmassa ei myöskään ole vapaita vasta-aineita Rh-tekijälle; seikka osoittaa luovuttajan veren yhteensopivuuden vastaanottajan veren (tai äidin ja lapsen veren) kanssa Rh-tekijän mukaan.

Positiivinen Coombsin testi osoittaa kehon Rh-herkistymisen, mikä on pääsyy Rh-konflikti verensiirron yhteydessä tai kuljetettaessa lasta, jolla on erilainen Rh-tila. Tässä tapauksessa tulokset pysyvät muuttumattomina 3 kuukautta (erytrosyyttien elinikä). Jos syynä on autoimmuuni hemolyyttinen anemia, positiivinen testi voi kummituttaa potilasta useita vuosia (joissakin tapauksissa koko elämän).

VIITE! Antiglobuliinitesti on erittäin herkkä, mutta siinä on vähän tietoa. Se ei rekisteröi hemolyyttisen prosessin aktiivisuutta, ei määritä vasta-aineen tyyppiä eikä pysty tunnistamaan patologian syytä. Täydemmän kuvan saamiseksi hoitavan lääkärin on määrättävä lisätutkimuksia(verimikroskopia, yleinen ja biokemiallinen analyysi, reumaattiset testit, ESR, rauta- ja ferritiinitasot).

Herkistysasteella voi olla laadullinen ilmaus ("+" - "++++") tai määrällinen - kuvatekstin muodossa:

• 1:2 - pieni arvo, ei aiheuta vaaraa;
• 1:4 - 1:8 - immunologisen reaktion kehittymisen alku; ei aiheuta vaaraa, mutta vaatii jatkuvaa seurantaa;
• 1:16 -1:1024 - kirkas herkistymismuoto, toimenpiteisiin tulee ryhtyä välittömästi.

Syy positiivinen näyte Voin olla:

• tyypittämättömän veren siirto (tai kirjoitusvirheellä), kun luovuttajan ja vastaanottajan Rh-tekijä ei täsmää;
• Rhesus-konflikti raskauden aikana (jos isän ja äidin veren antigeenien koostumus ei täsmää);
• autoimmuuni hemolyyttinen anemia - sekä synnynnäinen (ensisijainen) että toissijainen, mikä on seurausta tietyistä sairauksista (Evansin oireyhtymä, tarttuva keuhkokuume, kuppa, kylmä hemoglobinuria, lymfooma);
• lääkkeen hemolyyttinen reaktio.

Potilas ei voi ratkaista mitään yllä olevista ongelmista ilman lääkintäapua. Kaikissa tapauksissa tarvitaan kiireellinen konsultaatio, rekisteröinti tai kiireellinen sairaalahoito.

HUOMIO! AT harvinaisia ​​tapauksia Väärin positiivinen Coombsin testi on mahdollinen. Syynä tähän voivat olla toistuvat verensiirrot sekä monet sairaudet: nivelreuma, lupus erythematosus, sarkoidoosi. Tämä ilmiö voidaan havaita myös pernan poistamisen jälkeen sekä reaktion kulkua rikkoen (sisällön toistuva ravistelu, epäpuhtauksien läsnäolo).

Agglutinaatioreaktio anti-Rhesus-vasta-aineiden määrittämiseen (epäsuora Coombsin reaktio)Käytä potilailla, joilla on intravaskulaarinen hemolyysi. Joillakin näistä potilaista löytyy anti-Rhesus-vasta-aineita, jotka ovat epätäydellisiä, yksiarvoisia. Ne ovat erityisesti vuorovaikutuksessa Rh-positiivisten erytrosyyttien kanssa, mutta eivät aiheuta niiden agglutinaatiota. Tällaisten epätäydellisten vasta-aineiden läsnäolo määritetään epäsuorassa Coombsin reaktiossa. Tätä varten antiglobuliiniseerumia (vasta-aineita ihmisen immunoglobuliineja vastaan) lisätään järjestelmään anti-Rh-vasta-aineet + Rh-positiiviset punasolut, mikä aiheuttaa erytrosyyttien agglutinaation. Coombsin reaktiolla diagnosoidaan immuuniperäisten punasolujen intravaskulaariseen hajoamiseen liittyviä patologisia tiloja, esimerkiksi vastasyntyneen hemolyyttinen sairaus: Rh-positiivisen sikiön punasolut yhdistyvät epätäydellisiin vasta-aineisiin veressä kiertävälle Rh-tekijälle, joka risteytyy. istukka Rh-negatiiviselta äidiltä.

Mekanismi. Epätäydellisten (yksiarvoisten) vasta-aineiden havaitsemisen vaikeus johtuu siitä, että nämä vasta-aineet, sitoutuessaan tietyn antigeenin epitooppeihin, eivät muodosta hilarakennetta, ja antigeenien ja vasta-aineiden välistä reaktiota ei havaita agglutinaatiolla, saostumalla tai muita testejä. Muodostuneiden antigeeni-vasta-ainekompleksien tunnistamiseksi on käytettävä lisätestijärjestelmiä. Epätäydellisten vasta-aineiden, esimerkiksi erytrosyyttien Rh-antigeenin vasta-aineiden havaitsemiseksi raskaana olevan naisen veren seerumissa, reaktio suoritetaan kahdessa vaiheessa: 1) Rh-antigeeniä sisältävät punasolut lisätään testiseerumin kaksinkertaisiin laimennoksiin. ja pidettiin 37 °C:ssa tunnin ajan; 2) lisää ensimmäisen vaiheen jälkeen perusteellisesti pestyihin punasoluihin kanin anti-ihmisantiglobuliiniseerumia (esititratussa työlaimennoksessa). Kun on inkuboitu 30 minuuttia 37 °C:ssa, tulokset arvioidaan hemagglutinaation läsnäolon perusteella (positiivinen reaktio). On tarpeen valvoa reaktion aineosia: 1) antiglobuliiniseerumi + erytrosyytit, jotka ovat selvästi herkistyneet spesifisillä vasta-aineilla; 2) normaalilla seerumilla + antiglobuliiniseerumilla käsitellyt punasolut; 3) Rh-negatiiviset erytrosyytit, jotka on käsitelty testiseerumilla + antiglobuliiniseerumilla.

50. Passiivinen hemagglutinaatioreaktio. Mekanismi. Komponentit. Sovellus.

Epäsuoran (passiivisen) hemagglutinaation reaktio(RNGA, RPGA) perustuu punasolujen (tai lateksin) käyttöön niiden pinnalle adsorboituneiden antigeenien tai vasta-aineiden kanssa, joiden vuorovaikutus potilaiden veren seerumin vastaavien vasta-aineiden tai antigeenien kanssa saa punasolut tarttumaan toisiinsa ja putoamaan putki tai kenno hilseisen sedimentin muodossa.

Komponentit. RNHA:n tuotantoon voidaan käyttää lampaiden, hevosten, kanien, kanojen, hiirten, ihmisten ja muiden punasoluja, jotka kerätään tulevaa käyttöä varten ja käsitellään formaliinilla tai glutaraldehydillä. Punasolujen adsorptiokyky kasvaa, kun niitä käsitellään tanniini- tai kromikloridiliuoksilla.

Mikro-organismien polysakkaridiantigeenit, bakteerirokotteiden uutteet, virusten ja riketsian antigeenit sekä muut aineet voivat toimia antigeeneinä RNGA:ssa.

AG:lla herkistettyjä punasoluja kutsutaan punasoludiagnostisiksi. Punasoludiagnostiikan valmistukseen käytetään useimmiten pässin erytrosyyttejä, joilla on korkea adsorboiva aktiivisuus.

Sovellus. RNHA:ta käytetään infektiosairauksien diagnosointiin, gonadotrooppisen hormonin määrittämiseen virtsasta raskauden toteamisen yhteydessä, yliherkkyyden havaitsemiseen lääkkeille, hormoneille ja joissakin muissa tapauksissa.

Mekanismi. Epäsuoralla hemagglutinaatiotestillä (RIHA) on paljon suurempi herkkyys ja spesifisyys kuin agglutinaatiotestillä. Sitä käytetään tunnistamaan taudinaiheuttaja sen antigeenisen rakenteen perusteella tai osoittamaan ja tunnistamaan bakteerituotteet - toksiinit tutkitusta patologisesta materiaalista. Sen mukaisesti käytetään standardeja (kaupallisia) punasoludiagnostisia vasta-aineita, jotka saadaan adsorboimalla spesifisiä vasta-aineita tannisoitujen (tanniinilla käsiteltyjen) erytrosyyttien pinnalle. Testimateriaalin peräkkäiset laimennokset valmistetaan muovilevyjen kuoppiin. Sitten jokaiseen kuoppaan lisätään yhtä suuri tilavuus vasta-aineilla ladattujen erytrosyyttien 3-prosenttista suspensiota. Tarvittaessa reaktio asetetaan rinnakkain useisiin kuoppariviin erytrosyyttien kanssa, jotka on ladattu eri ryhmäspesifisillä vasta-aineilla.

2 tunnin inkuboinnin jälkeen 37 °C:ssa tulokset otetaan huomioon arvioitaessa ulkomuoto erytrosyyttisedimentti (ilman ravistamista): negatiivisella reaktiolla kuopan pohjalle ilmestyy sakka kompaktin levyn tai renkaan muodossa, positiivisella reaktiolla, tyypillinen pitsinen punasolusedimentti, ohut kalvo, jossa on epätasaiset reunat.

Hemolyyttinen anemia Omia punasoluja vastaan ​​suunnattujen autoimmuunielimien aiheuttamia sairauksia ei ole tarkasti selvitetty. Kuitenkin oletetaan, että jotkin tekijät (esim. virus, epänormaali proteiini) muuttavat punasoluja siten, että elimistö näkee ne jo "jotain vieraana" ja tulee niihin hallintaan vasta-aineiden avulla. Toisen teorian mukaan punasoluja vastaan ​​suunnattuja vasta-aineita syntyy lähes sattumalta epänormaalien plasmaproteiinikappaleiden muodostumisen aikana tietyissä sairauksissa. Tällaiset proteiinikappaleet voivat samalla tavalla "vahingossa" antaa reaktioita, joita voidaan käyttää diagnoosin tekemiseen (esim. virusperäinen keuhkokuume tiedetään antavan positiivisen Wassermann-testin, positiivisen Paul-Bunnel-testin ja kylmäagglutinaatiotestin).

On kaksi tärkeimmät autovasta-ainetyypit hemolyyttisellä anemialla, nimittäin: lämpimät vasta-aineet (reagoivat 37 °:ssa) ja kylmät vasta-aineet (jonkien reaktiivisuus lisääntyy lämpötilan lähestyessä nollaa). Lämpimät vasta-aineet ovat yleisempiä kuin kylmät. Dacie havaitsi, että lämpimät hemolysiinit ovat kaksi kertaa yleisempiä kuin kylmät hemolysiinit. Hemolysiinit ja agglutiniinit eivät ole pohjimmiltaan erilaisia ​​vasta-aineita: ne eroavat vain toimintansa luonteesta. Agglutiniinit agglutinoivat punasoluja, ja hemolysiinit tekevät niistä herkempiä monimutkaiselle hemolyysiprosessille (täydennys!). Punasoluihin kiinnittyneet autovasta-aineet muodostavat erytrosyytti-globiinikompleksin. Tämä kompleksi havaitaan käyttämällä Coombsin antiglobiinitestiä.

Coombsin testi suoritetaan Coombsin seerumilla, jonka valmistusta varten kani herkistetään ihmisen seerumilla, jota vastaan ​​muodostuu vasta-aineita kanin seerumissa. Tällaisen herkistetyn seerumin vaikutuksen alaisena ihmisen punasoluihin tapahtuu niiden agglutinaatiota, jos erytrosyyttireseptorit ovat miehittäneet estävät vasta-aineet. Koska nämä estävät vasta-aineet ovat peräisin ihmisen seerumista, ne agglutinoituvat kaniinin seerumin kanssa, joka on herkistynyt ihmisen plasmalle ja joka sisältää saostumia. Tätä reaktiota kutsutaan Coombsin testiksi; autoimmuunielimiin perustuvalle hemolyyttiselle anemialle (Lo tit) se on lähes spesifinen (katso lisätietoja Maierista).

Yleensä hemolyyttisellä anemialla Ensisijaisen punasolujen rikkoutumisen yhteydessä Coombs-testi on negatiivinen ja hankituilla positiivinen. Tästä säännöstä on kuitenkin joitakin poikkeuksia: väärä positiivinen Coombsin testi löydettiin perustuslaillisen hemolyyttisen anemian kriisien aikana ja matala aste- myös joskus pernan poiston jälkeen, reumakuumeen, sarkoidoosin, toistuvien verensiirtojen ja systeemisen lupus erythematosuksen yhteydessä. Luonnollisesti hankitulla hemolyyttisellä anemialla ilman autoimmuunikappaleiden muodostumista se on negatiivinen.

Hemolyyttinen anemia autoimmuunielimistön aiheuttamat aineet voidaan jakaa seuraaviin:
a) akuutti, subakuutti ja krooniset muodot, sekä päällä
b) idiopaattinen, jonka etiologiaa ei tunneta ja c) oireenmukainen [viruskeuhkokuume (vain kylmäagglutiniinit), krooninen lymfaattinen leukemia, retikulosarkooma, lymfosarkooma, systeeminen lupus erythematosus (pääasiassa lämpimät, harvoin kylmät agglutiniinit), kuppa (kylmäagglutiniinit (Miesovcherarian kasvaimet), työntekijät)).
c) oireenmukainen [viruskeuhkokuume (vain kylmät agglutiniinit), krooninen lymfaattinen leukemia, retikulosarkooma, lymfosarkooma, systeeminen lupus erythematosus (pääasiassa lämpimät, harvemmin kylmät agglutiniinit), syfilis (kylmäagglutiniinit), munasarjakasvaimet (Miescher et al.)).

Hemolyyttisen anemian klinikka autoimmuunielimien vaikutuksesta kehittyvä, on hyvin monimuotoista, ja siksi on tuskin mahdollista piirtää niiden yleistä kliininen kuva. Kaiken ikäiset ja molempien sukupuolten ihmiset kärsivät tasaisesti. Silti idiopaattiset muodot näyttävät olevan yleisempiä naisilla (Sacks ja Workman).

Idiopaattisen muodon kliininen kuva vaihtelee taudin vakavuudesta riippuen. Kroonisissa tapauksissa puhkeaminen on asteittaista ja tauti kestää useita vuosia toistuvia pahenemisvaiheita. Anemian vakavuus vaihtelee hemolyysin asteesta riippuen. Hemoglobiinin pudotuksia havaitaan jopa 10 %, muissa tapauksissa hemoglobiini pysyy pitkään 50-60 %. Retikulosytoosin voimakkuus ja ihon ja seerumin ikterinen värjäys vastaavat hemolyysin astetta. Bilirubiinia löytyy hyvin harvoin virtsasta, koska se ei kulje munuaisten läpi, mutta hemoglobinuriaa havaitaan. Kroonisissa tapauksissa perna on usein suurentunut ja voi saavuttaa jopa erittäin merkittäviä kokoja, kun taas muissa tapauksissa se on edelleen käsin kosketeltava. Maksa on harvoin laajentunut.

Useimmissa tapauksissa veressä makrosytoosi näkyy akuutteja vaiheita myös paljon mikrosyyttejä, normoblastoosia ja polykromiasia puuttuu harvoin, leukosytoosi voi olla 30 000, verihiutaleet ovat normaaleja. Joissakin tapauksissa on kuitenkin huomattavaa trombosytopeniaa. Evans selittää nämä tapaukset verihiutaleiden vasta-aineiden samanaikaisella läsnäololla, joten autoimmuunielimien vaikutuksesta johtuva hemolyyttinen anemia ja trombosytopenia - Evansin oireyhtymä (Evans). Osmoottinen vastustuskyky on hieman heikentynyt, mutta ei samassa määrin eikä yhtä pysyvästi kuin perustuslaillisessa pallomaisessa soluanemiassa. Lämmönkestävyystesti (Hegglin-Maier) 6 tunnin jälkeen voi myös antaa lievän hemolyysin (oma havainto), mutta vähäisemmässä määrin kuin Marchiafavan anemiassa. Hemosideriinia löytyy myös virtsasta (oma havainto).