Hemostaasi häirete diagnoosimine. Trombotsüütide funktsionaalsete omaduste rikkumine. Trombotsüütide adhesiooni häired

Vere hüübimisfaktorite rahvusvaheline nomenklatuur

Faktori nimi

Kogus milliliitrites (aktiivsus)

Piisav miinimum

Pool elu

I. Fibrinogeen

300 (170-450) mg

II. protrombiin*

Näiteks hemostaasis on suur hulk eelanalüütilisi muutujaid. Need on sageli väljaspool katselabori kontrolli ja neid ei ole alati lihtne tuvastada. Nagu allpool üksikasjalikult kirjeldatud, hõlmavad need probleeme, mis tekivad enne testimist ja hõlmavad proovi kogumise, transportimise ja väärkäitlemisega seotud funktsioone. Analüütilised probleemid võivad põhjustada tõsiseid probleeme negatiivsed tagajärjed testi ja seega ka patsientide järgneva hoolduse jaoks.

Kvaliteedimeetmete kaasamise eesmärk on tulemuste tagamiseks tuvastada ja kõrvaldada testimise kõigi nende aspektidega seotud probleemid. Kõrge kvaliteet testimine. Laboratoorsed andmed peavad olema täpsed ja usaldusväärsed, kuna valed tulemused võivad põhjustada patsiendi valediagnoosi ja seega ka ravivigu. Ebatäpne laboriaruanne võib tuleneda probleemidest, mis ilmnevad testimisprotsessi mis tahes punktis alates proovide võtmisest kuni aruandluseni.

200mcg/70-130%

III. tromboplastiin

IV. Ca++ ioonid

2,3 - 2,8 mmol/l

V. AC-globuliin

25 mcg/80-110%

2,5–4 mcg/10–15%

Mõõteriistade ja informaatika oluliste edusammude tõttu ei aita testimise analüütilised ja aruandlusetapid märkimisväärselt kaasa laboratoorsete vigade tekkele. Pigem on eelanalüütiline testimise faas peamiseks ebatäpsete laboritulemuste allikaks.

Analüütilise testimise etapid hõlmavad proovide võtmist, täisvereproovide transportimist laborisse, proovide töötlemist ja säilitamist. Üks kõige enam olulisi aspekte proovide võtmine on õige patsiendi ja proovi identifitseerimine. Proove tuleb koguda suhteliselt atraumaatiliselt ja veri peaks proovimahutisse vabalt voolama. Hemostaasi testimiseks võetavad proovid peavad olema naatriumtsitraadiga antikoagulantsed. On oluline, et naatriumtsitraadi kontsentratsioon oleks laborisüsteemis ühtlane, kuna hüübimisaeg on tavaliselt 8% pikem võrreldes 2% naatriumtsitraadiga.

VII. Proconvertin

2 mcg/70-130%

VIII. Antihemofiilne globuliin

50mcg/80-120%

5-7mcg/10-15%

IX. Jõulufaktor

3-4 mcg/70-130%

4-6 mcg/20-30%

X. Stuart-Proweri tegur*

Nähtavaid trombe sisaldavaid hemostaasi testimise proove ei tohiks analüüsida ja need tuleb tagasi lükata. Teised antikoagulandid, nagu etüleendiamiintetraäädikhape või hepariin, on hemostaasi testimiseks vastuvõetamatud. Kui proovimaatriks on teadmata või kahtluse all, võib proovi maatriksi määramiseks teha proovi naatriumi, kaaliumi ja kaltsiumi analüüse.

Hemostaasi testimiseks valesse katsutisse antikoagulandi või seerumiproovidega kogutud proove ei tohiks analüüsida ja need tuleks tagasi lükata. Hemostaasi proovide stabiilsus sõltub teostatavast analüüsist ning temperatuurist ja säilitustingimustest. Pärast kogumist tuleks proovid kiiresti toatemperatuuril laborisse toimetada, ideaaljuhul ühe tunni jooksul pärast pealekandmist. Sõltuvalt tellitud proovidest ja fraktsioneerimata hepariini olemasolust proovis võib proove säilitada kas täisverena või tsentrifuugimise teel, jättes ülejäänud plasma erütrotsüütidele või alikvoodina.

6-8 mcg/70-140%

XI. tromboplastiini prekursor

7 mcg/70–130%

15 mcg/15-20%

XII. Hagemanni tegur

ei ole installitud

teadmata

XIII. Fibrinaas, fibriini stabiliseeriv faktor

Trombotsüütide funktsiooni testimiseks mõeldud proove tuleb hoida toatemperatuuril ja testimine tuleb lõpule viia 3–4 tunni jooksul pärast kogumist. Proove võib säilitada täisverena või tsentrifuugida. Kui täisverd tsentrifuugitakse 1 tund, võib hepariniseeritud plasma enne testimist kuni neljaks tunniks toatemperatuurile jätta.

Proovid, mida ei saa selle aja jooksul testida, tuleks hüübida ja plasma külmutada sügavkülmikus, mis ei allu automaatsetele külmutustsüklitele. See on eriti oluline, kui plasma külmutatakse enne testimist. Enne testimist tuleb proovid 37°C veevannis täielikult üles sulatada ja enne testimist põhjalikult segada. Sisemine kvaliteedikontroll.

ei ole installitud

Hemostaasi süsteemi uurimise meetodid

Kliinilised ja funktsionaalsed testid hemostaasisüsteemi vaskulaar-trombotsüütide sideme uurimisel: mikroveresoonte hapruse määramine manseti kompressioonitesti abil (Konchalovsky-Rumpel-Leede test); verejooksu aja määramine mikroveresoontest ilma täiendava kompressioonita (Duke'i test kõrvaauguga jne) või venoosse staasi taustal (õla kompressioon mansetiga kuni 40 mm Hg koos küünarvarre naha punktsioonide või sisselõigetega ) - Ivy ja Borchgrevinki testid jne.

See protsess viiakse läbi iga testitud analüüdi jaoks ja iga testi jaoks sobiva aja jooksul. Partiidena käitatavate testide puhul võib olla mõttekas teostada kontrolle testimise alguses, keskel ja lõpus. Reaktiivipartiide arvu muutuste ja kontrollitud reaktiivipartiide vaheliste erinevuste kohta tuleb registreerida. Teatud analüüside jaoks võib olla vajalik uuesti kalibreerimine. Iga analüüsitud testi jaoks kasutatakse mitut kontrollitaset.

Mõned näited on toodud tabelis. Mõned koagulatsiooni ja hemostaasi kvaliteedikontrolli spetsifikatsioonid. Näiteks sellisel juhul on üheks probleemiks värske vere kogumine ja transportimine, et saada testimiseks funktsionaalsed vereliistakud. Seetõttu peaks trombotsüütide agregatsiooni puhul ideaaljuhul hõlmama normaalset kontrolli iga teostatud trombotsüütide funktsiooniga. Iga uue reaktiivi massiga tuleb läbi viia ka tavaline kontroll. Kuigi see võib tunduda lihtne, pole see probleemideta.

Laboratoorsed meetodid:

trombotsüütide arvu ja funktsiooni (adhesioon, agregatsioon) mõõtmine mikroskoobiga või hematoloogiliste analüsaatorite (sõeluuringuks) ja agregomeetrite abil;

funktsionaalne koagulatsioon ehk nn hüübimine (hüübimisaega käsitsi hinnates või erineva konstruktsiooniga koagulomeetrite abil);

Puudub kaubanduslik kontrollmaterjal. Ebanormaalset kontrollmaterjali tuleb hankida patsientidelt, kellel on teadaolevad defektid või antiagregante. Normaalsete doonorite tagamine värskete trombotsüütide saamiseks on samuti väljakutse, eriti väiksemate laborite jaoks, kus "vabatahtlikke" võib nappida. Nende invasiivsete protseduuridega, mida tavalistel ja vabatahtlikel patsientidel korratakse regulaarselt, on ka ilmseid eetilisi probleeme.

Kuigi seda on võimalik saavutada suurtes laborites, ei ole see enamiku katselaborite puhul tavaliselt võimalik. Kontrollida saab individuaalset labori kallet ja triivi, samuti täpsust ja täpsust. Näiteks Austraalia kuningliku patoloogide kolledž Hematoloogia kvaliteedi tagamise programm pakub osalejatele kogu aasta programmi kokkuvõtet, et anda ülevaade pikaajalistest laboritulemustest. Tsükli lõpetamise aruanded pakuvad ka statistilist analüüsi iga analüüdi tulemuste kohta õppeaasta jooksul.

fibrinolüüsi parameetrite määramine;

amidolüütiline (testid, milles kasutatakse trombiini, plasmiini, faktori Xa, XIIIa jne kromogeenseid substraate ning fikseeritud mõõtelainepikkusega fotomeetreid);

immunoloogilised meetodid soovitud antigeeni või antikehade taseme tuvastamiseks APS-is jne.

geneetiliste kõrvalekallete tuvastamine PCR abil (Leiden-resistentsusfaktori Va mutatsioonid aktiveeritud valgu C-le, protrombiin G 20210 geen, metüleentetrahüdrofolaadi reduktaasi geen jne).

Seda teeb suures osas Ameerika patoloogide kolledž. Kui probleem ilmneb rohkem kui ühes uuringus, peaks labor olema probleemi lahendamisel ennetav. Välise kvaliteedikontrolli tähtsus. Kõigil programmidel on väärtus, kuigi mõnede analüütide mastaabisääst eelistab suuremaid või rahvusvahelisi programme.

See omakorda annab paremaid diagnoose ja palju muud ohutut abi arstide poolt patsient, mis on laboratoorsete protseduuride peamine eesmärk. Kuna nii testimismetoodika kui ka paneelis läbiviidavad liittestid võivad mõjutada trombofiilia spetsiifiliste markerite tuvastamise täpsust, peetakse testimispraktika hindamist laboratoorsete testide hindamisel mitme laboratoorsete uuringute abil laboripraktikas oluliseks vajaduseks.

Testid hemostaasi vaskulaarse-trombotsüütide komponendi hindamiseks

Trombotsütopeenia, raskete trombotsütopaatia ja von Willebrandi faktori (VWF) puudulikkuse korral pikeneb veritsusaeg oluliselt. Verejooks on seotud trombotsüütide adhesiivse agregatsiooni funktsiooni puudulikkusega - kahjustatud veresoontes trombotsüütide korgi moodustumise rikkumine. Selle põhjuseks võib olla kas trombotsüütide arvu oluline vähenemine veres või nende talitlushäire, mis enamasti põhineb trombotsüütide membraani retseptorite puudumisel või blokeerimisel, mis interakteeruvad nende agregatsiooni stimulaatoritega (agonistidega). rakud (VWF, adrenaliin, ADP, fibrinogeen, arahhidoonhape) ja prostaglandiinid) või neid agregatsioonistimulaatoreid sisaldavate graanulite komponentide puudumine trombotsüütides või nendest vabanemise rikkumine. Kvalitatiivsed trombotsüütide defektid, mis on paljude hemorraagiliste diateeside aluseks, jagunevad järgmistesse rühmadesse:

Vaatamata nendele jõupingutustele kannatab testimine endiselt paljude metodoloogiliste probleemide ja testimispraktikas mittestandardiseerimise all. Katsemeetodi valik ja rakendamine on mõjutanud üksikute laborite võimet panna asjakohane diagnoos. Faktori inhibiitorite uuringud.

Lühidalt öeldes täheldati kõigis aruannetes järjekindlalt suurt varieeruvust analüüsitulemuste analüüside vahel, kusjuures viimase kümnendi jooksul on paranemine olnud väike või üldse mitte. Rohkem kui 80% osalejatest teevad tavaliselt vähemalt ühe funktsionaalse analüüsi ja ~40% juhtudest sooritavad mõlemad testid. Värskemates aruannetes on uuritud metoodika ja testpaneelidega seotud tõlgendusvigade probleemi.

    nende rakkude membraaniretseptorite puudumisest või blokeerimisest tingitud disagregatsioonitrombotsütopaatia (Glantzmani trombasteenia jne);

    tihedate ja a-graanulite puudumisega seotud haigused;

    graanulite vabanemise rikkumine;

    tsükliliste prostaglandiinide ja tromboksaan A2 moodustumise häired;

    VWF-i mitmemõõtmelisuse puudujääk, anomaaliad ja rikkumised;

    Huvitav on märkida, et paljude nende katseprotseduuride automatiseerimine viimastel aastatel ei ole parandanud hemostaasi diagnostikalabori tundlikkuse alumist piiri. Kasutage lai valik asjakohased kontrollimeetmed. Reguleerige testitava plasma kontsentratsiooni vastavalt analüüsi tolerantsidele; sama hästi kui.

    Võimalikult täielik testpaneel. Soovitused vere hüübimise ja hemostaasi kvaliteedi parandamiseks. Mitmed organisatsioonid annavad soovitusi hüübimis- ja hemostaasi testimise protsessi parandamiseks. Hemostaasi tee on väga keeruline ja sisaldab erinevaid aktiveerimise ja reguleerimise elemente. Hälbiva hemostaasi uurimine või antikoagulantravi jälgimine nõuab paljude testprotseduuride läbiviimist. Neid võivad omakorda mõjutada paljud tegurid, alates antikoagulantravist, maksahaigustest ja infektsioonidest, lisaks kaasasündinud ja omandatud defektidele.

    nukleotiidide metabolismi ja kaltsiumi transpordi häired.

Verejooksu aeg

Verejooksu aeg on aeg standardse nahahaava pealekandmisest kuni verejooksu peatumiseni. See iseloomustab trombotsüütide funktsionaalset aktiivsust ja trombotsüütide koostoimet veresoone seinaga. Veritsusaeg ei paljasta kõiki trombotsüütide häireid (sellist meetodit pole üldse olemas), see sõeltest võimaldab kahtlustada erineva päritoluga trombotsütopaatiaid, von Willebrandi tõbe ja veresoone seina proagregantsete omaduste häireid. Kui patoloogia on tuvastatud, pole seda uuringut vaja korrata, tuleks kasutada tundlikumaid ja spetsiifilisemaid meetodeid. Sellel meetodil on tõsiseid puudusi:

Iga labor peab kehtestama konkreetsed protseduurid proovide kogumiseks, proovide ettevalmistamiseks, testi sooritamiseks ja kvaliteedi tagamiseks, et tagada täpsete ja usaldusväärsete tulemuste saamine, et tagada patsiendi nõuetekohane juhtimine ja hooldus. Seda tõendab erinevaid näiteid seda arvustust.

Väline kvaliteedi tagamine tromboosi ja hemostaasi korral: rahvusvaheline perspektiiv. Tervishoiu kvaliteedisüsteemi mudel: heaks kiidetud juhtpõhimõte. Laboratoorse diagnostika üldine kvaliteet. On aeg mõelda kastist väljapoole. Laboratoorsed vead: kuidas parandada analüüsieelseid ja -järgseid samme?

      Meetod on halvasti standardiseeritud. Testi tulemused võivad viidata ainult teatud rikkumiste olemasolule.

      Madal tundlikkus. Veritsusaja pikenemise puudumine ei võimalda alati välistada trombotsüütide või hemostaasi veresoonte sidemete rikkumisi.

      Madal spetsiifilisus ei võimalda meetodi tulemusi üheselt tõlgendada.

      Kvaliteedikontroll hüübimiskatsetes. Preanalüütilised ja postanalüütilised muutujad: peamised põhjused diagnostiline viga hemostaasiga? Koagulatsiooni ja hemostaasi verstapostid ja perspektiivid. Von Willebrandi haiguse patofüsioloogia ja klassifikatsiooni värskendus: Von Willebrandi allkomitee aruanne.

      Trombotsüütide ja trombotsüütide agregatsiooni testimine. Perekondliku, mitte-trubotsütopeenilise verejooksu laboratoorne hindamine: lõplik diagnoos ei ole sageli võimalik. Laboratoorsete uuringute tase, mis on vajalik trombotsüütide düsfunktsiooni diagnoosimiseks või välistamiseks trombotsüütide agregatsiooni ja sekretsiooni testimise abil. Laboratoorsed uuringud trombofiilia: hea, halb ja inetu.

      Ei vasta tänapäevastele sanitaar- ja epidemioloogilistele nõuetele.

Seotud väljaanded