Hemostaasin häiriöiden diagnoosi. Verihiutaleiden toiminnallisten ominaisuuksien rikkomukset. Verihiutaleiden kiinnittymishäiriöt

Raskauden merkit alkion istutuksen jälkeen

Veren hyytymistekijöiden kansainvälinen nimikkeistö

tekijän nimi

Määrä ml (aktiivisuus)

Riittävä minimi

Puolikas elämä

I. Fibrinogeeni

300 (170-450) mg

II. Protrombiini*

Esimerkiksi hemostaasissa on valtava määrä esianalyyttisiä muuttujia. Ne ovat usein testauslaboratorion hallinnan ulkopuolella, eikä niitä aina ole helppo tunnistaa. Kuten alla on kuvattu, nämä sisältävät ongelmia, jotka ilmenevät ennen testausta ja sisältävät keräämiseen sekä näytteen kuljetukseen ja virheelliseen käsittelyyn liittyviä ominaisuuksia. Esianalyyttiset ongelmat voivat johtaa vakaviin negatiivisia seurauksia testiä ja siten potilaiden myöhempää hoitoa varten.

Laatutoimenpiteiden sisällyttämisellä pyritään tunnistamaan ja poistamaan kaikkiin näihin testauksen näkökohtiin liittyvät ongelmat tulosten varmistamiseksi. Korkealaatuinen testaus. Laboratoriotietojen on oltava tarkkoja ja luotettavia, koska virheelliset tulokset voivat johtaa potilaan virheelliseen diagnoosiin ja siten terapeuttisiin epäonnistumisiin. Epätarkat laboratorioraportit voivat johtua ongelmista, joita esiintyy missä tahansa testausprosessin vaiheessa, näytteenottosta raportointiin.

200mcg/70-130%

III. tromboplastiini

IV. Ca++-ionit

2,3 - 2,8 mmol/l

V. AC-globuliini

25mcg/80-110%

2,5-4 mcg/10-15 %

Instrumentoinnin ja informatiikan merkittävän kehityksen vuoksi testauksen analyyttiset ja raportointivaiheet eivät merkittävästi lisää laboratoriovirheitä. Pikemminkin esianalyyttinen testausvaihe on suurin epätarkkojen laboratoriotulosten lähde.

Esianalyyttisiä testausvaiheita ovat näytteenotto, kokoverinäytteiden kuljetus laboratorioon, näytteiden käsittely ja varastointi. Yksi kaikista tärkeitä näkökohtia näytteenotto on oikea potilas sekä näytteen tunnistaminen. Näytteet tulee kerätä suhteellisen atraumaattisesti ja veren tulee virrata vapaasti näytesäiliöön. Hemostaasitestaukseen tarkoitetut näytteet on antikoaguloitava natriumsitraatilla. On tärkeää, että natriumsitraatin pitoisuus on tasainen laboratoriojärjestelmässä, koska hyytymisaika on tyypillisesti 8 % pidempi kuin 2 % natriumsitraatilla.

VII. Proconvertin

2 mcg/70-130 %

VIII. Antihemofiilinen globuliini

50mcg/80-120%

5-7mcg/10-15%

IX. Joulutekijä

3-4 mcg/70-130 %

4-6 mcg/20-30 %

X. Stuart-Prower-tekijä*

Näkyviä hyytymiä sisältäviä hemostaasitutkimuksen näytteitä ei tule analysoida ja ne tulee hylätä. Muita antikoagulantteja, kuten etai hepariinia, ei voida hyväksyä hemostaasitestaukseen. Kun näytematriisi on tuntematon tai epävarma, voidaan tehdä näytteen natrium-, kalium- ja kalsiumanalyysit näytematriisin määrittämiseksi.

Väärään putkeen, jossa on antikoagulantti- tai seeruminäytteitä, kerättyjä hemostaasitutkimuksen näytteitä ei tule analysoida, vaan ne tulee hylätä. Hemostaasinäytteiden stabiilisuus riippuu suoritettavasta määrityksestä sekä lämpötilasta ja säilytysolosuhteista. Keräämisen jälkeen näytteet tulee toimittaa laboratorioon huoneenlämmössä nopeasti, mieluiten tunnin kuluessa levityksestä. Riippuen tilatuista näytteistä ja fraktioimattoman hepariinin esiintymisestä näytteessä, näytteet voidaan varastoida joko kokoverenä tai sentrifugoimalla, jolloin loput plasmasta jätetään punasolujen päälle tai eränä.

6-8 mcg/70-140 %

XI. tromboplastiinin esiaste

7 mcg/70-130 %

15 mcg/15-20 %

XII. Hagemann-tekijä

ei asennettu

tuntematon

XIII. Fibrinaasi, fibriiniä stabiloiva tekijä

Verihiutaleiden toiminnan testaamiseen tarkoitetut näytteet tulee säilyttää huoneenlämmössä ja testit on suoritettava 3–4 tunnin kuluessa keräämisestä. Näytteet voidaan säilyttää kokoverinä tai sentrifugoida. Jos kokoverta sentrifugoidaan 1 tunnin ajan, heparinisoitu plasma voidaan jättää huoneenlämpöön enintään neljäksi tunniksi ennen testausta.

Näytteet, joita ei voida testata tässä ajassa, tulee hyytyä ja plasma pakastaa pakastimessa, jossa ei käytetä automaattisia pakastusjaksoja. Tämä on erityisen tärkeää, jos plasma jäädytetään ennen testausta. Ennen testausta näytteet on sulatettava kokonaan 37 °C:n vesihauteessa ja sekoitettava huolellisesti ennen testausta. Sisäinen laadunvalvonta.

ei asennettu

Menetelmät hemostaasijärjestelmän tutkimiseen

Kliiniset ja toiminnalliset testit hemostaasijärjestelmän verisuoni-verihiutaleyhteen tutkimuksessa: mikrosuonten haurauden määritys mansetin puristustestillä (Konchalovsky-Rumpel-Leede-testi); verenvuodon ajan määrittäminen mikrosuonista ilman ylimääräistä puristusta (Duke-testi korvan lävistyksellä jne.) tai laskimopysähdyksen taustalla (olkapääpuristus mansetilla enintään 40 mm Hg ja kyynärvarren ihon pistokset tai viillot) ) - Ivy- ja Borchgrevink-testit jne. .

Tämä prosessi suoritetaan kullekin testatulle analyytille käyttäen kullekin suoritetulle kokeelle sopivaa aikakehystä. Eräissä suoritettavissa testeissä voi olla järkevää suorittaa kontrollit testiajon alussa, keskellä ja lopussa. Reagenssierien lukumäärän muutoksista ja kontrolloitujen reagenssierien välisistä eroista on pidettävä kirjaa. Uudelleenkalibrointi saattaa olla tarpeen tietyissä määrityksissä. Jokaisessa analysoitavassa määrityksessä käytetään useita kontrollitasoja.

Taulukossa on joitain esimerkkejä. Jotkut laadunvalvontavaatimukset koagulaatiolle ja hemostaasille. Tässä tapauksessa esimerkiksi yksi ongelma liittyy tuoreen veren keräämiseen ja kuljettamiseen toimivien verihiutaleiden tuottamiseksi testausta varten. Siksi verihiutaleiden aggregaation osalta tähän tulisi ihanteellisesti sisältyä normaali kontrolli jokaisen suoritetun verihiutaleiden toiminnon yhteydessä. Normaali kontrolli on myös suoritettava jokaisella uudella reagenssimassalla. Vaikka tämä saattaa tuntua yksinkertaiselta, se ei ole ongelmaton.

Laboratoriomenetelmät:

verihiutaleiden lukumäärän ja toiminnan mittaaminen (adheesio, aggregaatio) mikroskoopilla tai käyttämällä hematologisia analysaattoreita (seulontatutkimuksia varten) ja aggregometrejä;

toiminnallinen koagulaatio eli ns. hyytyminen (arvioimalla hyytymisaika manuaalisesti tai käyttämällä erityyppisiä koagulometrejä);

Kaupallista valvontamateriaalia ei ole. Epänormaalia kontrollimateriaalia tulee hankkia potilailta, joilla on tunnettuja vikoja tai joilla on verihiutaleiden estoaineita. Normaalien luovuttajien tarjoaminen tuoreiden verihiutaleiden hankkimiseksi on myös haaste, erityisesti pienille laboratorioille, joissa "vapaaehtoisista" voi olla pulaa. Näihin invasiivisiin toimenpiteisiin liittyy myös ilmeisiä eettisiä ongelmia, jotka toistetaan säännöllisesti normaaleille ja vapaaehtoisille potilaille.

Vaikka tämä voidaan saavuttaa suurissa laboratorioissa, se ei yleensä ole mahdollista useimmissa testauslaboratorioissa. Yksittäisen laboratorion kaltevuutta ja ajautumista sekä tarkkuutta ja tarkkuutta voidaan hallita. Esimerkiksi Australian Royal College of Pathologists of Australian hematology Quality Assurance Program tarjoaa osallistujille koko vuoden ohjelmayhteenvedon, joka antaa yleiskuvan pitkän aikavälin laboratoriotuloksista. Syklin päättymisraportit tarjoavat myös tilastollisen analyysin kunkin analyytin tuloksista tutkimusvuoden aikana.

fibrinolyysiparametrien määrittäminen;

amidolyyttinen (testit, joissa käytetään kromogeenisiä substraatteja trombiinille, plasmiinille, tekijä Xa:lle, XIIIa:lle jne. sekä fotometrit kiinteällä mittausaallonpituudella);

immunologiset menetelmät halutun antigeenin tai vasta-aineiden tason havaitsemiseksi APS:ssä jne.

geneettisten poikkeavuuksien havaitseminen PCR:llä (Leiden-resistenssitekijä Va:n mutaatiot aktivoidulle proteiini C:lle, protrombiini G 20210 -geenille, metyleenitetrjne.).

Tämän tekee suurelta osin College of American Pathologists. Jos ongelma ilmenee useammassa kuin yhdessä tutkimuksessa, laboratorion tulee olla aktiivinen ongelman ratkaisemisessa. Ulkoisen laadunvalvonnan merkitys. Kaikilla ohjelmilla on arvoa, vaikka joidenkin analyyttien mittakaavaedut suosivat suurempia tai kansainvälisiä ohjelmia.

Tämä puolestaan ​​tarjoaa parempia diagnooseja ja enemmän turvallista apua kliinikot, mikä on laboratoriotoimenpiteiden päätavoite. Koska sekä testausmetodologia että paneelissa suoritettavat yhdistelmätestit voivat vaikuttaa trombofilian spesifisten markkerien havaitsemisen tarkkuuteen, testauskäytännön arviointia arvioimalla laboratoriokoe monilaboratoriotutkimuksilla katsotaan laboratoriokäytännön keskeiseksi välttämättömyydeksi.

Testit hemostaasin verisuoni-verihiutalekomponentin arvioimiseksi

Trombosytopeniassa, vaikeissa trombosytopatioissa ja von Willebrand-tekijän (VWF) puutteessa verenvuotoaika pitenee merkittävästi. Verenvuoto liittyy verihiutaleiden liima-aggregaatiotoiminnon riittämättömyyteen - verihiutaleiden tulpan muodostumisen rikkomiseen vaurioituneissa suonissa. Tämä voi johtua joko veren verihiutaleiden määrän merkittävästä vähenemisestä tai niiden toimintahäiriöstä, joka useimmiten perustuu verihiutaleiden kalvon sellaisten reseptorien puuttumiseen tai estoon, jotka ovat vuorovaikutuksessa näiden aggregaatioiden stimulaattoreiden (agonistien) kanssa. solut (VWF, adrenaliini, ADP, fibrinogeeni, arakidonihappo) ja prostaglandiinit) tai näitä aggregaatiostimulaattoreita sisältävien rakeiden komponenttien puuttuminen verihiutaleista tai vapautuminen niistä. Laadulliset verihiutalevauriot, jotka ovat useiden hemorragisten diateesien taustalla, jaetaan seuraaviin ryhmiin:

Näistä ponnisteluista huolimatta testaus kärsii edelleen monista metodologisista ongelmista ja testauskäytännön standardoimattomuudesta. Testimenetelmän valinta ja soveltaminen on vaikuttanut yksittäisten laboratorioiden kykyyn tehdä asianmukainen diagnoosi. Tekijän estäjien tutkimukset.

Lyhyesti sanottuna kaikissa raporteissa havaittiin johdonmukaisesti suurta vaihtelua analyysitulosten analyysien välillä, mutta parannuksia on tapahtunut vain vähän tai ei ollenkaan viimeisen vuosikymmenen aikana. Yli 80 % osallistujista suorittaa tyypillisesti vähintään yhden toiminnallisen analyysin, ja ~40 % tapauksista suorittaa molemmat testit. Uusimmissa raporteissa on tutkittu metodologiaan ja testipaneeleihin liittyviä diagnostisia tulkintavirheitä.

    hajoamistrombosytopatiat, jotka johtuvat näiden solujen kalvoreseptorien puuttumisesta tai estymisestä (Glantzmanin trombosthenia jne.);

    tiheiden ja a-rakeiden puuttumisesta johtuvat sairaudet;

    rakeiden vapautumisen häiriintyminen;

    syklisten prostaglandiinien ja tromboksaani A2:n muodostumisen häiriöt;

    VWF:n moniulotteisuuden puute, poikkeavuudet ja rikkomukset;

    On mielenkiintoista huomata, että monien näiden testimenetelmien automatisointi viime vuosien aikana ei ole parantanut herkkyyden alarajaa hemostaasin diagnostisessa laboratoriossa. Käyttää laaja valikoima asianmukaiset valvontatoimenpiteet. Säädä testiplasman pitoisuus määrityksen toleranssien mukaan; yhtä hyvin kuin.

    Mahdollisimman täydellinen testipaneeli. Suosituksia veren hyytymisen ja hemostaasin laadun parantamiseksi. Useat organisaatiot tarjoavat suosituksia hyytymis- ja hemostaasin testausprosessin parantamiseksi. Hemostaasin reitti on hyvin monimutkainen ja sisältää erilaisia ​​aktivointi- ja säätelyelementtejä. Poikkeavan hemostaasin tutkiminen tai antikoagulanttihoidon seuranta edellyttää monien testitoimenpiteiden suorittamista. Niihin puolestaan ​​voivat vaikuttaa monet tekijät, kuten antikoagulanttihoito, maksasairaus ja infektiot, synnynnäisten ja hankittujen vikojen lisäksi.

    nukleotidiaineenvaihdunnan ja kalsiumin kuljetuksen häiriöt.

Verenvuotoaika

Verenvuotoaika on aika tavallisen ihohaavan levittämisestä verenvuodon pysähtymiseen. Se luonnehtii verihiutaleiden toiminnallista aktiivisuutta ja verihiutaleiden vuorovaikutusta verisuonen seinämän kanssa. Verenvuotoaika ei paljasta kaikkia verihiutaleiden häiriöitä (sellaista menetelmää ei ole ollenkaan), tämä seulontatesti mahdollistaa eri alkuperää olevien trombosytopaattisten sairauksien, von Willebrandin taudin ja verisuonen seinämän proaggreganttiominaisuuksien häiriöiden epäilyn. Kun patologia on tunnistettu, tätä tutkimusta ei tarvitse toistaa, vaan tulee käyttää herkempiä ja erityisiä menetelmiä. Tällä menetelmällä on vakavia haittoja:

Jokaisen laboratorion on laadittava erityiset menettelyt näytteenottoa, näytteen valmistelua, testien suorittamista ja laadunvarmistusta varten varmistaakseen, että saadaan tarkkoja ja luotettavia tuloksia potilaan asianmukaisen hoidon ja hoidon varmistamiseksi. Tämä on todistettu erilaisia ​​esimerkkejä tämä arvostelu.

Ulkoinen laadunvarmistus tromboosissa ja hemostaasissa: kansainvälinen näkökulma. Terveydenhuollon laatujärjestelmämalli: hyväksytty ohjaava periaate. Laboratoriodiagnostiikan yleinen laatu. On aika ajatella laatikon ulkopuolella. Laboratoriovirheet: kuinka parantaa esi- ja jälkianalyysivaiheita?

      Menetelmä on huonosti standardoitu. Testitulokset voivat viitata vain tiettyihin rikkomuksiin.

      Matala herkkyys. Vuotoajan pidentymisen puuttuminen ei aina mahdollista verihiutaleiden tai hemostaasin verisuoniyhteyksien rikkomusten sulkemista pois.

      Matala spesifisyys ei salli menetelmän tulosten yksiselitteistä tulkintaa.

      Laadunvalvonta koagulaatiotestauksessa. Preanalyyttiset ja postanalyyttiset muuttujat: johtavat syyt diagnostinen virhe hemostaasin kanssa? Koagulaation ja hemostaasin virstanpylväät ja näkökulmat. Päivitys von Willebrandin taudin patofysiologiasta ja luokittelusta: Von Willebrandin alikomitean raportti.

      Verihiutale- ja verihiutaleiden aggregaatiotesti. Sukuperäisen, ei-trubosytopeenisen verenvuodon laboratorioarviointi: Lopullinen diagnoosi ei usein ole mahdollista. Laboratoriokokeiden taso, joka vaaditaan verihiutaleiden toimintahäiriön diagnosoimiseksi tai sulkemiseksi pois käyttämällä verihiutaleiden aggregaatio- ja eritystestejä. Laboratoriotutkimus trombofilia: hyvät, pahat ja rumat.

      Ei täytä nykyaikaisia ​​terveys- ja epidemiologisia vaatimuksia.

Aiheeseen liittyvät julkaisut