Rmp negatiivne, kui positiivne. Süüfilise testid: RPR (RPR) RPR test on negatiivne

See toimib kardiolipiinivastaste antikehade tuvastamise teel. Kardiolipiin on spetsiaalne valk, mida leidub bakterite ja mitokondrite membraanides.

Süüfilis on sugulisel teel levivate haigustega (STD) seotud nakkushaigus. Süüfilis on süsteemne haigus, mis võib mõjutada kõiki kudesid ja organeid. Süüfilise kulg on krooniline, ilma ravita võib haigus kesta aastaid, hävitades organismi järk-järgult.

Kõige sagedamini edastatakse süüfilis kaitsmata seksi kaudu. Haigus võib levida vertikaalselt, st. Süüfilise oht on see, et haigus võib pikka aega. Kuid nakkusprotsess ei peatu sel ajal, põhjustades inimesele kahju.

Mis on süüfilise RPR-test?

See analüüs on Wassermanni reaktsiooni kaasaegsem ja täpsem versioon. Kui haigus kahjustab keharakke, vabaneb neist lipoidne materjal. RPR-analüüs on suunatud reaginide tuvastamisele. Reaginid on spetsiaalsed antikehad lipoidsete ainete vastu.

Millal määratakse süüfilise RPR-test?

Selline analüüs määratakse süüfilise kahtluse korral uuringu käigus. Arst võib latentse süüfilise kontrollimiseks välja kirjutada RPR-i. RPR reaktsiooni käigus uuritakse potentsiaalseid doonoreid, see analüüs võetakse sõeluuringute käigus. Lisaks on ravi efektiivsuse selgitamiseks ette nähtud RPR analüüs. Jah, test võimaldab teil jälgida . Kui raviaasta jooksul väheneb RPR analüüsi tiiter vähemalt 4 korda, loetakse ravi efektiivseks.

"Lewise RPR testi" rakendamise kohta

Reaktiivide komplekt kardiolipiini, letsitiini, kolesterooli reagiini antikehade kiireks määramiseks inimese plasmas või seerumis süüfilise diagnoosimisel

1. EESMÄRK

Reaktiivide komplekt "Lewis RPR test", edaspidi komplekt, on ette nähtud süüfilise diagnoosimiseks mittetreponemaalse testi abil. 2. KOMPLEKTORI OMADUSED2.1. Tööpõhimõte

Lewise RPR testis valmistati diagnostika kolesterooli, kardiolipiini ja letsitiini lahuse baasil, millele lisati tulemuste visuaalse salvestamise hõlbustamiseks söeosakesi. Kui antigeen interakteerub reagiini seerumi antikehadega, moodustuvad mustad agregaadid, mis on palja silmaga nähtavad. Reagiini antikehade puudumisel jäävad söeosakesed peeneks hajutatud olekusse.

^ 2.2. Määrake kompositsioon

Koostis	Kogus	Kirjeldus
Diagnostika	5 ml (kaks viaali)	Kardiolipiini, letsitiini ja kolesterooli segu, millele on lisatud peeneid söeosakesi. Suspensioon on must, säilitamisel jaguneb see 2 fraktsiooniks: ülemine on läbipaistev värvitu vedelik, alumine must sade (söeosakeste suspensioon). Sisaldab säilitusainet - naatriumasiidi kontsentratsioonis 0,1%.
Positiivne kontrollproov (K+)	1 ml (üks viaal)	Kliiniliselt ja seroloogiliselt kinnitatud süüfilise diagnoosiga inimese vereseerum, mis sisaldab reagiini antikehi kardiolipiini, letsitiini, kolesterooli vastu, on inaktiveeritud läbipaistev vedelik, värvitu või kergelt kollakas. Sisaldab säilitusainet - naatriumasiidi kontsentratsioonis 0,1%.
Negatiivne kontroll (K-)	1 ml (üks viaal)	Inimese vereseerum, mis ei sisalda reagiini antikehi kardiolipiini, letsitiini, kolesterooli ja Treponema pallidumi vastu, on inaktiveeritud läbipaistev vedelik, värvitu või kergelt kollakas. Sisaldab säilitusainet - naatriumasiidi kontsentratsioonis 0,1%.
Reaktsiooniplaadid	50 tk (üks pakk)	Plastikust lamineeritud papist 10 väljaga kaardid värviliste ringidega reaktsiooni seadistamiseks, polüetüleenkotis.
segamispulgad	500 tk (üks pakk)	Puidust, polüetüleenkotis.
villimispudel	3 ml (üks tükk)	Valmistatud läbipaistvast plastikust polüetüleenkotis.
Täitmisnõel (suurus 20)	1 arvuti	Polüetüleenkotis.

^ Komplekt on ette nähtud 500 määramise tegemiseks. 3. ETTEVAATUSABINÕUD
● Patsientide vere seerumi (või plasma) proovidega töötamisel tuleb neid käsitseda potentsiaalselt nakkusohtlike objektidena, järgides ettevaatusabinõusid (SP 3.3.2.1288-03).

● Ei ole lubatud muuta analüüsiprotseduuri, lühendada reaktsiooniaega, kasutada teiste tootjate reaktiive, samuti Louis RPR testkomplekti teiste seeriate reagente.

● Tuleb võtta meetmeid reaktiivide ristsaastumise vältimiseks.

● Lewis RPR testi komponendid sisaldavad säilitusainena 0,1% naatriumasiidi, mis võib allaneelamisel olla mürgine.

^ 4. ANALÜÜSIKS VAJALIK SEADMED JA MATERJALID

1. Vahetatavate otsikutega poolautomaatsed dosaatorid vedeliku doseerimisvahemikuga 10-100 µl, 100-1000 µl;

2. Taimer;

3. Külmik;

4. Latekskindad;

5. SHAKER S3 orbitaalmikser või sarnane orbitaalrotaator.

^ 5. ANALÜÜSID PROOVID

Reaktsioonis võib kasutada patsiendi soojendatud ja kuumutamata seerumit või vereplasmat. Ärge kasutage proove, millel on bakterite kasvu jälgi, mis on hemolüüsitud või külmunud. Proove võib säilitada miinus 20 °C juures 4-6 nädalat.

^ 6. ANALÜÜSI LÄBIVIIMINE

6.1. Lahuste ja reaktiivide valmistamine

Kõiki reaktiive ja proove tuleb enne analüüsi alustamist hoida 30 minutit temperatuuril 18–25 °C.

Enne kasutamist loksutage diagnostilise suspensiooni (pudel 1) korralikult.

Valmistage ette süsteem diagnostika väljastamiseks. Selleks eemaldage villimiseks mõeldud plastpudelilt kork ja ühendage nõel tihedalt selle kaelaga. Süsteemi täitmiseks pigistage viaal ja langetage nõela ots diagnostilise suspensiooni (viaal 1) sisse. Vabastage plastviaali surve, et tõmmata suspensioon sisse. Võimalik on kasutada vahetatava otsaga pipeti dosaatorit.

MÄRGE:

Diagnostika plastviaalis hoidmine lühendab selle säilivusaega. Pärast testimist valage järelejäänud suspensioon originaalklaasi viaali. Pärast seda loputage plastpudel nõelaga destilleeritud veega ja kuivatage õhu käes.

Pärast reaktsiooniplaatidega pakendi avamist hoida neid ainult temperatuuril 18–25 °C. Ärge puudutage kruuse sõrmedega.

^ 6.2. Analüüsi läbiviimine

kvaliteedi meetod.

Kasutades poolautomaatset dosaatorit, jagage plaadi ringile 50 µl seerumit või plasmat.

Kasutades kinnitatud nõelaga plastpudelit (või poolautomaatset dosaatorit), kandke 1 tilk (16 µl) diagnostikaainet seerumitilga kõrval olevale ringile ilma segamata.

Kombineerige segamispulga abil mõlemad tilgad, jaotades need ühtlaselt kogu kruusi pinnale.

Asetage plaat orbitaalrotaatori platvormile ja pöörake horisontaaltasandil 8 minutit kiirusega 100 pööret minutis.

MÄRGE:

Iga katse peab tingimata sisaldama reaktsiooni komplekti kuuluvate positiivsete (K+, viaal 2) ja negatiivse (K-, viaal 3) kontrollproovidega. Reaktsioon kontrollproovidega toimub sarnaselt ülalkirjeldatud kvalitatiivse analüüsi läbiviimise skeemile.

^ Poolkvantitatiivne meetod.

Reaktsioon viiakse läbi testitud seerumiproovi seerialahjendustega (1:2–1:1024) 0,9% naatriumkloriidi lahuses (soolalahus), kasutades poolautomaatset jaoturit:

Jagage 50 µl soolalahust testtopsidesse.

Lisage ringile nr 1 50 µl seerumit või plasmat ja segage mitu korda soolalahusega, tõmmates seerumit automaatse pipetiga sisse ja välja.

Kasutades sama automaatset pipetti, kandke 50 µl ringile nr 2 ja korrake segamisprotseduuri. Viige 50 µl ringile nr 3.

Korrake sama protseduuri ringidega nr 3-10, kandes 50 µl sobivat lahjendust järgmisele ringile. Selle tulemusena tuleks testitavad seerumid saada lahjendustes 1:2; 1:4; 1:8; 1:16; 1:32; 1:64; 1:128; 1:256; 1:512; 1:1024. Eemaldage viimasest ringist 50 µl.

Kasutades kinnitatud nõelaga plastpudelit, kandke 1 tilk (16 µl) diagnostilist ainet igale ringile iga lahjendatud seerumi tilga kõrvale, segamata.

Segage segamispulga abil mõlemad tilgad, jaotades need kogu kruusi pinnale (suurimast lahjendusest väikseima).

Asetage plaat orbitaalrotaatori platvormile ja pöörake horisontaaltasandil 8 minutit kiirusega 100 pööret minutis.

Registreerige tulemused kohe (ärge kuivatage).

^ 7. TULEMUSTE REGISTREERIMINE JA TÕLGENDAMINE

7.1. Kvalitatiivse analüüsi tulemuste tõlgendamine:

Tulemused salvestatakse visuaalselt heas valguses:

POSITIIVNE REAKTSIOON – keskmise ja suure esinemine

Agregaadid valgustatusega

reaktsioonikeskkond

NÕRK REAKTSIOON – haruldaste moodustumine

väikesed agregaadid

NEGATIIVNE REAKTSIOON – puuduvad nähtavad agregaadid,

Vormiriietus on olemas

Osakeste jaotus

ühtlane hall värv

Reaktsioon K+ juuresolekul – keskmised ja suured agregaadid

diagnostiline

Reaktsioon K – juuresolekul – nähtavaid agregaate pole,

Diagnosticum täheldatud ühtlane

Osakeste jaotus

^ 7.2. Tulemuste tõlgendamine poolkvantitatiivses analüüsis:

Tulemused salvestatakse visuaalselt heas valguses, nagu on kirjeldatud kvalitatiivse analüüsi jaoks. Proovi tiitrit tuleks pidada viimaseks lahjenduseks, mille puhul määratakse nõrgalt positiivne tulemus. Tiiter K+ diagnostilise esinemise korral ≥ 1:2. Diagnostika juuresolekul K-tiitrit ei ole.

MÄRGE:

Tuleb meeles pidada, et "Lewise RPR-testi" kasutamisel täheldatakse teiste haigustega patsientidel mõnikord valepositiivseid reaktsioone. Seetõttu tuleks iga positiivset tulemust jälgida meetodiga, mis kasutab spetsiifilist treponemaalset antigeeni, näiteks Lewise RPHA testi (tootja NEARMEDIC PLUS LLC) või muid spetsiifilisi reaktiivide komplekte.

Süüfilise RPR-test (03.13 või 03.14) Reaktiivide komplekt kardiolipiini antigeeni vastaste antikehade tuvastamiseks flokulatsioonitestis

Kardiolipiini antigeeni vastaste antikehade tuvastamise reaktiivide komplekti kasutamise juhised flokulatsioonitestis Süüfilise RPR-test

16. juuli 2007 registreerimistunnistus nr FSR 2007/00406

EESMÄRK Süüfilise RPR test

Süüfilise serodiagnostikaks ja selle ravitulemuste jälgimiseks.

KOMPLEKTI OMADUSED

2.1. Tööpõhimõte

Test põhineb kardiolipiini antigeeni koostoimel süüfilisega patsiendi seerumis või plasmas olevate vastavate antikehadega (reaginidega). Et suurendada nähtavaid erinevusi reaktsiooni positiivse ja negatiivse tulemuse vahel, lisati antigeenile söeosakesed. Reagiinide olemasolul proovis tekivad mustad agregaadid, mis on palja silmaga nähtavad. Reaginide puudumisel flokulatsiooni ei toimu ja söepulber jääb homogeenseks.

2.2. Määrake kompositsioon

Reagent 1-RPR-antigeen - söeosakeste 0,02% vesisuspensioon, mis on sensibiliseeritud kolesterooli, kardiolipiini, letsitiini seguga; Homogeenne suspensioon hallist mustani, eraldub säilitamise ajal mustaks sademeks ja selgeks värvituks supernatandiks.

Reaktiiv 2 - positiivne kontrollseerum (K +) - inaktiveeritud, sisaldab kardiolipiini antigeeni vastaseid antikehi tiitris vähemalt 1: 4 (tiiter on märgitud iga seeria passis); selge värvitu või helekollane vedelik.

Reaktiiv 3 - negatiivne kontrollseerum (K -) - inaktiveeritud; selge värvitu või helekollane vedelik.

Pakett sisaldab ka reaktsioonikaarte.

Komplekt on saadaval kahes konfiguratsioonis:

komplekt nr 1 (mõeldud 100 definitsiooni jaoks);

komplekt nr 2 (mõeldud 500 definitsiooni jaoks).

KOMPLEKTI ANALÜÜTILISED JA DIAGNOSTILISED OMADUSED

Komplekt on ette nähtud 100 või 500 määramise tegemiseks, sealhulgas kontrollproovid.

ETTEVAATUSABINÕUD

Komplekt on bioloogiliselt ohutu, kuid uuritavaid proove tuleks käsitleda potentsiaalselt nakkusohtlike materjalidena.

SEADMED JA MATERJALID

– Orbitaalne loksutaja (mis tahes kaubamärk vibratsiooni amplituudiga 10-20 mm).

- Automaatne mikropipett, 50 µl otsikutega.

- Füsioloogiline lahus - 0,9% naatriumkloriidi lahus puhastatud vees (destilleeritud või deioniseeritud).

ANALÜÜSITUD PROOVID

Natiivne või kuumutatud seerum või plasma. Hemolüüsitud, küloosseid või idandatud proove ei tohi kasutada. Uurimiseks mõeldud seerumit võib säilitada kuni 7 päeva temperatuuril 2-8 °C või kuni 3 kuud. temperatuuril miinus 20 o C.

TESTIMINE Süüfilise RPR-test

7.1. Proovi ettevalmistamine

Kõiki reaktiive hoitakse enne analüüsimist 15-20 minutit toatemperatuuril.

RPR antigeeni suspensiooni loksutatakse kuni homogeensuseni.

7.2. Analüüsi läbiviimine

Kvalitatiivne definitsioon

Kandke mikropipetiga 50 µl (üks tilk kumbagi) K+, K- ja testproove ühekordse kaardi rakkudele (üks rakk proovi kohta). Hajutada vedelik mikropipeti otsaga kogu süvendi pinnale. Kasutage iga proovi jaoks eraldi otsikut.

Kandke kõikidesse süvenditesse 20 µl RPR antigeeni. Asetage kaardid orbitaalshakeri platvormile ja pöörake horisontaaltasandil 8 minutit kiirusega 180 pööret minutis. Vahetult pärast seda registreerige tulemused.

K+ ja K- uuring tuleb läbi viia iga uuritava proovi seeriaga.

Poolkvantitatiivne määramine (tiitri määramine)

Seda tehakse ainult proovidega, mis andsid positiivse reaktsiooni.

Valmistage ühekordselt kasutatavatel kaartidel uuritud proovide ja K + - kahekordsed seerialahjendused 1:2 kuni 1:1024. Kasutage iga proovi jaoks eraldi kaarti.

Kaartidega töötades ärge puudutage lahtreid sõrmedega!

Kandke 50 µl (üks tilk) soolalahust kõikidesse testisüvenditesse. Seejärel lisage 50 μl (üks tilk) esimest uuritavat proovi esimese kaardi lahtrisse nr 1 ja segage füsioloogilise soolalahusega. Seejärel võtke lahtrist nr 1 50 µl (üks tilk) 1:2 lahjendatud proovi, viige lahtrisse nr 2 ja segage. Korrake protseduuri, kuni saadakse viimane lahjendus (1:1024) süvendis nr 10. Kasutades mikropipeti otsa, jaotage tilgad üle kogu süvendite pinna, liikudes suuremalt lahjenduselt väiksemale.

Kandke kõikidesse süvenditesse 20 µl RPR antigeeni. Asetage kaardid orbitaalrotaatori platvormile ja pöörake neid horisontaaltasandil 8 minutit kiirusel 180 pööret minutis. Vahetult pärast seda salvestage tulemused, alustades K + .

Kasutamata jäänud reaktiive võib pärast pakendi esmast avamist hoida tihedalt suletud viaalides temperatuuril 2–8 °C kuni komplekti kõlblikkusaja lõpuni.

Hoidke avatud kaardikotte toatemperatuuril.

REGISTREERIMINE JA TULEMUSTE RAKENDAMINE Süüfilise RPR-test

Kvalitatiivne definitsioon

Positiivne reaktsioon – proovis on näha suured, keskmised või väikesed agregaadid.

Negatiivne reaktsioon – proovis pole nähtavaid agregaate.

Märge: Plekkide esinemine proovis pärast reaktsiooni või ebaühtlane värvumine nähtavate agregaatide puudumisel ei ole positiivse reaktsiooni tunnus

Poolkvantitatiivne määramine

Tiitrimise tulemusi võetakse arvesse samamoodi nagu kvalitatiivsel määramisel.

RPR antigeeni vastaste antikehade tiiter proovis on viimane lahjendus, milles saadakse positiivne reaktsioon (nähtavad agregaadid erinevad).

Uuritavas proovis sisalduvat antikehade tiitrit võetakse arvesse tingimusel, et reaktsiooni käigus saadud antikeha tiiter K +-s erineb passis märgitud väärtusest mitte rohkem kui ühe lahjenduse võrra.

Märge : Reagiinide (kardiolipiinivastaste antikehade) esinemine inimese seerumis või plasmas võib lisaks süüfilisele esineda ka mitmete muude haiguste ja keha füsioloogiliste seisundite korral, nagu nakkuslik mononukleoos, rasedus, viiruslik kopsupõletik, süsteemne erütematoosluupus. , reumatoidartriit, malaaria, pidalitõbi jne. Sellega seoses tuleb kõik Syphilis RPR-testi komplekti kasutades saadud positiivsed tulemused kinnitada, kasutades komplekte spetsiifiliste analüüsimeetoditega, kasutades treponemaalset antigeeni (soovitatav on kasutada Syphilis-RPHA-testi või sobivad ensüümi immuunanalüüsi süsteemid).

PARIM ENNE KUUPÄEV. SÄILITAMISE JA VEOTINGIMUSED

Hind nõudmisel

Toote saate ostukorvi lisada, määrates koguse

Tootja: Nearmedic

Riik Venemaa

Üksus var.: pakkimine

Pakendi tüüp: pappkarp

Artikkel: 7-02-4

Kirjeldus

Reaktiivikomplekt Lewis RPR test kardiolipiini, letsitiini, kolesterooli reagiini antikehade määramiseks inimese plasmas või seerumis süüfilise diagnoosimisel Lewis RPR (Rapid Plasma Reagin - anticardiolipin) testisüsteem esmaseks skriininguks ja süüfilise ravi efektiivsuse hindamiseks kiire plasma reagiini test Mõeldud 500 uuringu jaoks, sealhulgas kontrollproovid

Funktsionaalne eesmärk

Kvalitatiivne ja kvantitatiivne määramine doonorite läbivaatuse käigus, ennetav ja esmane läbivaatus süüfilise kahtluse korral, latentse süüfilise diagnoosimine, ravi efektiivsuse jälgimine (tiitri langus 4 või enam korda).
Kiire plasmareagiini test (mikroreaktsiooni analoog) - flokulatsiooni test kardiolipiini / kolesterooli / letsitiini (sorbeeritakse söe peentele osakestele, et parandada sademe visualiseerimist) antikehade olemasolu.
Saate tulemusi 8 minuti jooksul.
Analüüsiks piisab 50 µl kuumutamata plasmast või sõrme vereseerumist.
Mitte-treponemaalsetest testimissüsteemidest kõige tundlikum. Vähendab kõrge tiitriga seerumite puhul prosooni nähtuse tõenäosust.
Kasutusvalmis väga stabiilsed reaktiivid, sealhulgas kontrollseerumid ja doseeritud tilguti. Paigaldamine ühekordselt kasutatavatele 18 mm süvendiga plaatidele, mida on lihtne tritureerida ja kvantifitseerida.

Tehnilised andmed

*Diagnostilise testi määramine - Süüfilise ravi efektiivsuse sõeluuring ja hindamine.
Uurimispõhimõte – Mittetreponemaalse flokulatsiooni test.
Määratud indikaator – Reagini antikehad süüfilise skriiningdiagnoosimisel.
Kontrastaine visuaalse arvestuse hõlbustamiseks – peeneks hajutatud kivisüsi – on kohustuslik.
Määramiste arv – vähemalt 500 (reaktsiooniplaadid vähemalt 50x10 määramiseks)
Kõlblikkusaeg - vähemalt 18 kuud alates valmistamiskuupäevast.
Ülejäänud säilivusaeg tarnimisel on vähemalt 15 kuud.
Komponentide kõlblikkusaeg pärast viaalide avamist on vähemalt 2 kuud.
Analüüsi aeg - mitte rohkem kui 8 minutit.
Analüüsi temperatuur on toatemperatuur.
Komponentide ettevalmistamine - Kasutusvalmis komponendid, sealhulgas kontrollseerumid.
Antigeeni väljakaevamiseks mõeldud doseerimispudelid peavad sisalduma testimissüsteemi pakendis – kohustuslik.
Vene Föderatsiooni tervishoiuministeeriumi registreerimistunnistuse olemasolu (nr FSR 2008/03715).
Komplekt vastab täielikult TU 9398-006-40371634-2008 nõuetele.
Komplekti koostis (pakendis - vähemalt 500 testi):
1. Testitavad erütrotsüüdid - 2 fl.x5 ml, punakaspruun suspensioon jagatakse säilitamise ajal kaheks fraktsiooniks.
2. Positiivne kontroll (K +) - 1 ml, läbipaistev kollakas vedelik, tilgutipudelites.
3. Negatiivne kontroll (K -) - 1 ml, läbipaistev kollakas vedelik, tilgutipudelites.
4. Reaktsiooniplaadid - 50 tk.
5. Pudel villimiseks - 3 ml.
6. Reaktiivi valamisnõel suurus 20.
7. Pulgad segamiseks - 500 tk.
Reaktsioonisegu maht on 100 μl.
Tulemuste stabiilsus 12 tunni jooksul

Erinevalt trihhomonast või gonokokkidest ei saa kahvatut treponeemi määrdumisel tuvastada. Kui inimesel puuduvad ilmsed haigusnähud, on süüfilise diagnoosimiseks uuringute jaoks parim bioloogiline materjal veri. Süüfilise vereanalüüs on üsna usaldusväärne ka siis, kui patsiendil on süüfilis.

Ärge üllatuge, kui teil palutakse enne tööle asumist, operatsiooni või raseduskontrolli ajal süüfilise suhtes vereanalüüsi teha. See on levinud protseduur, mis on mõeldud elanikkonna sõeluuringuks. Seega tuvastatakse nakkuse kandjad ja patsiendid varases staadiumis.

Igaüks, kes on olnud kaitsmata vahekorras või kahtlustab, et partner on kandja, võib soovida läbi viia kiire diagnoosi. Täna on võimalik kodus ise testida.

Eriti oluline on süüfilise vereanalüüs nakkuse ravimisel: tulemuste põhjal otsustatakse valitud ravimeetodi tõhusus ja tehakse järeldusi patsiendi paranemise kohta.

Saatekirja analüüsiks saab mitte ainult venereoloog-nahaarstilt, vaid ka üldarstilt, günekoloogilt või uroloogilt. Analüüs tehakse omal algatusel, ostes apteegist kiirtestimise komplekti.

Kuidas protseduuriks valmistuda

Süüfilise vereanalüüsiks võib erinevatel juhtudel võtta kapillaar- või veeniverd. Kodused kiirtestid annavad vastuse ühele veretilgale sõrmest. Sel juhul pole erilist ettevalmistust vaja. Üldine soovitus on hoiduda suitsetamisest vahetult enne proovi võtmist ja alkoholist 24 tunni jooksul.

Sarnased nõuded esitatakse ka venoosse vere võtmisel. Patsientidel, kellel on probleeme immuunsusega, ei soovitata neil lisaks analüüside eelõhtul rasket füüsilist tööd teha. Päev enne proovivõttu on parem süüa kergeid eineid ja magada piisavalt.

Venoosse vere tarnimine toimub hommikul tühja kõhuga.

Treponema või selle jälgede otsimise viisid

Süüfilise vereanalüüsi laboratoorsete meetodite aluseks on organismi võime anda immuunvastus patogeeni ilmnemisele. Kuna uuritakse plasmat või vereseerumit, nimetati kogu reaktsioonide rühma seroloogilisteks.

Süüfilise seroloogiline diagnoos hõlmab mittetreponemaalseid ja treponemaalseid antikehade analüüse. Esimesi kasutatakse sagedamini sõeluuringuks ja ravi efektiivsuse hindamiseks ning teisi diagnoosimiseks.

Esimese süüfilise serodiagnoosi viis läbi August Wasserman 1906. aastal. Tänaseni pole see oma tähtsust kaotanud ja seda kutsutakse arendaja auks - Wassermani reaktsiooniks (РВ, RW) või komplemendi sidumise reaktsiooniks (RSK).

100 aasta jooksul on laboripraktika oluliselt arenenud ning nüüd tuvastatakse IgM ja IgG antikehad järgmistel viisidel (tabel 1).

Mitte-treponemaalsed reaktsioonid

Mõiste "mittetreponemaalne" ühendab endas reaktsioone, mis tuvastavad antikehi mitte patogeeni, vaid hävitatud treponema membraanide või peremeesrakkude lipiidide vastu. Sadestamisreaktsiooni käigus interakteerub reaktiiv (kardiolipiini antigeen) antikehadega (kui neid on) ja antigeen-antikeha kompleks sadestub. Katseklaasis tekivad valged helbed. Laborant hindab tulemust palja silmaga RPR, MPR, RST ja TRUST puhul või mikroskoobi all (VDRL, USR). Vastuseks peetakse järgmist:

• positiivne, kui ilmuvad suured helbed (4+, 3+);
• nõrgalt positiivne keskmise suurusega helveste ilmnemisega (2+, 1+);
• negatiivne - helbeid pole (-).

Nakatumise hetkest kuni mittetreponemaalsete testide positiivse reaktsioonini võib kuluda kuni 1,5 kuud. Hard chancre näitab süüfilist enne analüüsi 1-4 nädalat.

Langevate antikehade tiitrit mõõdetakse kvantitatiivse sadestamisreaktsiooni käigus. Selleks lahjendatakse plasma või seerum vastavalt juhistele. See analüüs iseloomustab ravi efektiivsust. Kui tiiter langeb, siis on paranemine edukas, kui olukord ei muutu, tuleks ravimeid vahetada.

Kui rääkida mikroreaktsioonist, siis see tähendab, et vaja on paar tilka uuritavat materjali. Need testid on väga mugavad suurte populatsioonide skriinimiseks või koduseks kasutamiseks. Testikomplektid on odavad ja standardsel kujul. Näiteks "Syphilis-AgKL-RMP", mida toodab CJSC "EKOlab", "Profitest" firmast New Vision Diagnostics, SD BIOLINE, mida toodab Standard Diagnostics.

Sadestamisreaktsioonide puuduseks on nende madal täpsus. RPR tuvastab primaarse süüfilise vahemikus 70 kuni 90%, sekundaarset - 100% ja hilist - 30-50%. Mitte-treponemaalsete testide valepositiivsed tulemused on haruldased ja esinevad 3% juhtudest. Täpse tulemuste saamise takistuseks võivad olla vead vereproovide võtmisel, säilitamisel või analüüsijärjekorra rikkumine.

Positiivse sadereaktsiooni järgi süüfilise diagnoosi ei panda. Otsuse tegemiseks tuleb teha spetsiifilised treponemaalsed testid.

Treponemaalsed testid

Patsiendi veres saab tuvastada antikehi otse treponema antigeenide vastu. Selleks on välja töötatud spetsiifilised serodiagnostika meetodid. Need testid on väga tundlikud.

Wassermani reaktsioon

Kõige tuttavam ja ajaproovitud on Wassermani reaktsioon (RV) süüfilisele. Selle rakendamiseks võetakse kubitaalveenist 5 ml verd, proovist saadakse seerum, selle enda komplement inaktiveeritakse ja seejärel töödeldakse ühte osa treponemaalse antigeeniga ja teist kardiolipiiniga.

Tulemust hinnatakse hemolüüsi kiiruse järgi:

• hemolüüsi täielik või märkimisväärne hilinemine - positiivne reaktsioon (4+, 3+);
• osaline viivitus - nõrgalt positiivne (2+);
• väike viivitus – kahtlane reaktsioon (1+);
• täielik hemolüüs - negatiivne tulemus (-).

Positiivseid kvalitatiivseid tulemusi kontrollitakse uuesti kvantitatiivse meetodiga. Reagiinide tiitrit peetakse vereseerumi maksimaalseks lahjenduseks kuni hemolüüsi täieliku või olulise hilinemiseni. Ravi efektiivsuse hindamiseks on ette nähtud kvantitatiivne RV-test.

Wassermani reaktsioon on mõttekas läbi viia 2-3 nädalat pärast šankri ilmumist. Ta näitab sekundaarset süüfilist 100% juhtudest, tertsiaarset - 75%.

Passiivne hemaglutinatsioonireaktsioon (RPHA)

Preparaat katseks valmistatakse loomade erütrotsüütidest sensibiliseerimise teel Treponema pallidum antigeeniga. Rakud lisatakse patsiendi seerumis. Testi kestus on 1 tund. Antikehade olemasolul tekib aglutinatsioonireaktsioon ja laborant näeb mikrosüvendites spetsiifilisi mustreid.

Testi ärakiri:

• aglutineerunud rakkude ring - positiivne tulemus (4+, 3+, 2+);
• rõngas lahti - kahtlane tulemus (+/-, 1+);
• punkt keskel on negatiivne tulemus (-).

Passiivse hemaglutinatsiooni reaktsioon annab positiivseid tulemusi kaua pärast ravi. Valepositiivse vastuse võib saada pidalitõve või mononukleoosi nakatumise korral. Kvantitatiivne RPHA viiakse läbi proovide lahjendamise teel.

Ensüüm-immunoanalüüs (ELISA)

Seda kasutatakse süüfilise varajaseks diagnoosimiseks. Tuvastab ensüümiga märgistatud inimese immunoglobuliine ja spetsiaalset reagenti kasutades treponema vastaste IgM, IgA, IgG antikehade olemasolu. Vastuse määrab proovide värvimuutus: mida rohkem antikehi, seda küllastunud on segu värvus.

Meetod on väga tundlik ja spetsiifiline. See ei anna valepositiivseid tulemusi teiste infektsioonidega patsientide nakatumise korral. Kõrge tundlikkus antikehade suhtes piirab ELISA kasutamise võimalust paranemisastme jälgimiseks.

Immunofluorestsentstestid (IF)

Selle rühma analüüsid võimaldavad teil kiiresti tuvastada treponema nakatumise enne šankri ilmumist. Annab positiivseid tulemusi esimese nädala lõpuks pärast nakatumist. Tundlikkus on 100% lähedal. Testi toimeaineks on inimese globuliinide vastased fluorestseiini antikehad. Ühendades seerumi antikehadega, loovad nad helendavad kompleksid. Testi tulemuse määrab sära intensiivsus:

• kollakasroheline särav sära - 4+;
• roheline - 3+;
• kahvaturoheline - 2+;
• vaevumärgatav sära - 1+;
• tausta määrdumine või varjud on negatiivne tulemus.

Treponema pallidum immobilisatsioonireaktsioon (RIT)

Testi kasutatakse süüfilise varjatud vormide tuvastamiseks. See on töömahukas ja tehniliselt keeruline. Meetod põhineb elavate treponeemide immobiliseerimisel kompleksi "antigeen + antikeha" toimel. Testimiseks kasutatavaid baktereid kasvatatakse küülikutel. Kõik analüüsimiseks mõeldud klaasnõud peavad olema steriilsed. Patsiendilt võetakse veri tingimusel, et ta võttis antibiootikume hiljemalt kuu aega enne analüüsi päeva. Seerumile lisatakse treponeemid. Mikroskoobi okulaarist otsib laborant liikumatuid baktereid.

Tulemuse dešifreerimine:

• kui treponeemide immobilisatsioon on üle 50% - tulemus on 4+;
• 31-50% - nõrgalt positiivne 3+;
• 21-30% - kahtlane 2+;
• kuni 20% - negatiivne.

Immunoblot (Western blot)

Kõige kaasaegsem meetod süüfilise diagnoosimiseks, välistades teiste spetsiifiliste testide valepositiivsed vastused. Kliinilises praktikas kasutatakse seda kinnitusena. Patsiendi seerum kantakse nitrotselluloosmembraanile, mis on kaetud elektroforeetiliselt eraldatud Treponema pallidum antigeenidega. IgG ja IgM antikehade olemasolul ilmuvad testile triibud.

Katsesüsteemi tulemuste tõlgendamine toimub ribade asukoha ja nende intensiivsuse järgi.

Lõplik diagnoos põhineb mittetreponemaalsetel ja treponemaalsetel testidel.

Allikad:

Akovbyan V.A., Prokhorenkov V.I., Novikov A.I., Guzey T.N. // Süüfilis: Illustr. käed sisse (Toim. V.I. Prohhorenkov). - M.: Medkniga, 2002. - S. 194-201.

Dmitriev G.A., Frigo N.V. // Süüfilis. Kliiniline ja laboratoorne diferentsiaaldiagnostika. – M.: Med. raamat, 2004. - S. 26-45.

Loseva O.K., Lovenetsky A.N. Epidemioloogia, kliinik, süüfilise diagnoosimine ja ravi: juhend arstidele. - M., 2000.

Novikov A.I. et al. Western blot kui süüfilise laboratoorse diagnoosi kinnitav test. - Klin. labor. Diagnostika”, 2011, nr 8.– Lk 4 -45.

Pankratov V.G., Pankratov O.V., Navrotski A.L. jne // Retsept (lisa: International Scientific and Practical Conf. "Modern Approaches to diagnostika, ravi ja ennetamine sugulisel teel levivate infektsioonide", Grodno, 2005). - Lk.165-169.

Pankratov V.G., Pankratov O.V., Krukovich A.A. jne // Tervishoid. - 2006. - nr 6. - Lk 35-39.

Rodionov A.N. // Süüfilis: juhend arstidele. - Peterburi: Peeter, 1997. - S. 226-245.

Jurado R.L. // STD. - 1997. - nr 3. - S. 3-10.

Schmidt B.L. // Esimene Venemaa dermatovenereoloogide kongress: abstraktne. teaduslik töötab. - Peterburi, 2003. - T. II. – S. 40-

Romanowski B., Sutherland R., Flick G.H. et al. // Ann. Intern. Med. -1991. - V. 114. - P. 1005-1009. Mis on süüfilise seroloogiline diagnoos