Dami ng pagpapasiya ng mga tannin sa balat ng oak. Qualitative Analysis

Ang mga tannin ay mga kumplikadong high-molecular na natural na phenolic compound ng halaman na may kakayahang mag-precipitating ng mga protina at alkaloid at mag-tanning ng hilaw na balat ng hayop, na ginagawa itong isang matibay, hindi nabubulok na produkto - katad.

Ang terminong "tannins" ay ipinakilala ng Pranses na siyentipiko na si P. Seguin noong 1796.

Ang mga tannin, o tannin, ay kasingkahulugan ng terminong "tannins". Ito ay mula sa Latin-Celtic na pagtatalaga para sa oak - "tan" - at malawakang ginagamit sa siyentipikong panitikan.

Ang kakayahan ng mga sangkap na ito na "tan" ang mga protina ng mga balat ng hayop, gawin silang hindi tinatablan ng tubig at lumalaban sa pagkabulok ng microbial ay batay sa kanilang kakayahang makipag-ugnayan sa collagen, na humahantong sa pagbuo ng mga matatag na istruktura ng polimer. Ang pangungulti ay isang kumplikadong pisikal at kemikal na proseso na nauugnay sa pagbuo ng hydrogen, covalent at electrovalent bonds sa pagitan ng mga molekula ng collagen at phenolic na grupo ng mga tannin.

Tanging ang mga polynuclear phenol na naglalaman ng higit sa isang pangkat ng OH ang may mga katangian ng pangungulti. Ang mga ito ay malalaking molekulang phenolic na may timbang na molekular mula 300 hanggang 500 at kung minsan ay hanggang 20,000. Ang mga mononuclear phenol at hindi naglalaman ng maraming OH na grupo ay naka-adsorb lamang sa mga protina, ngunit hindi maaaring bumuo ng mga cross-link sa pagitan ng kanilang mga sarili at mga grupo ng protina, "crosslink" monomeric protein mga pangkat. Inactivate nila ang mga enzymatic protein sa ilang mga lawak, ngunit hindi nagiging sanhi ng phenol-protein couplings sa collagen, ang pangunahing bahagi ng protina ng mga balat. Samakatuwid, ang mababang molekular na timbang phenols ay mayroon lamang isang astringent na lasa, sila ay tinatawag ding food (tea) tannins.

Pag-uuri

Ang unang pagtatangka na pag-uri-uriin ang mga tannin ay ginawa ng Swedish chemist na si I. Berzelius, na hinati ang mga sangkap na ito sa dalawang grupo ayon sa kanilang kakayahang bumuo ng mga itim na compound ng isang maberde o mala-bughaw na kulay na may Fe (III) na mga asin. Kasunod nito, ang simpleng pag-uuri ng mga tannin na ito ay naging batayan ng isang mas tumpak na pang-agham na pag-uuri na iminungkahi ni K. Freudenberg-
hom. Sinimulan niyang hatiin ang mga tannin depende sa kanilang kakayahang mag-hydrolyze sa ilalim ng pagkilos ng mga acid (o enzymes) sa dalawang grupo:

1) hydrolysable tannins:

Gallotannins;

Ellagotannins;

Depsides, o non-sugar esters ng mga carboxylic acid;

2) non-hydrolysable (condensed) tannins, o flobafens, na nahahati sa mga derivatives:

Catechins (flavan-3-ols);

Leukoanthocyanidins (flavan-3,4-diols);

Hydrostilbenes.

hydrolysable tannins. Ang mga Gallotannin ay mga ester ng hexoses (karaniwan ay D-glucose) at gallic acid. Mayroong limang pangkat ng OH sa glucose, dahil sa kung saan maaaring mabuo ang mga mono-, di-, tri-, tetra-, penta- at polygalloyl ethers. Ang isang kinatawan ng pangkat ng polygalloyl ethers ay ang Chinese tannin, na nakuha mula sa mga dahon at mga outgrowth (galls) na nabuo sa kanila ng semi-winged sumac (Rhus semialata Murr.). Ang isang kinatawan ng polygalloyl ethers ay ang P-D-glucogallin na nakahiwalay sa ugat ng rhubarb at dahon ng eucalyptus.

Ang mga Ellagotannin ay mga ester ng D-glucose at hexadiphenolic, hebulic at iba pang mga acid, na nabuo kasama ng ellagic acid. Ang mga ellagothannin ay matatagpuan sa balat ng prutas ng granada, balat ng walnut, balat ng oak, mga punla ng alder. Ang mga halaman ay karaniwang naglalaman ng hindi ellagic, ngunit hexahydroxydiphenic acid.

Sa panahon ng acid hydrolysis ng tannins, ang acid na ito ay na-convert sa dilactone - ellagic acid.

Ang mga depsides ay mga ester ng gallic acid na may quinic, chlorogenic, caffeic, hydroxycinnamic acids, at mga flavan din. Ang mga ester ng gallic acid at catechin ay matatagpuan sa mga dahon ng tsaa. Ang Theogallin ay nahiwalay sa mga dahon ng berdeng tsaa.

Theogallin (depsid)

Ang karamihan sa mga hydrolysable na tannin ay naglalaman ng mga LR gaya ng tannery tannery, tanning sumac, snake mountaineer, thick-leaved bergenia, medicinal burnet, black alder at o. kulay-abo.

Ang karamihan sa mga condensed tannin ay naglalaman ng karaniwang oak, erect cinquefoil, karaniwang blueberry, bird cherry.

Non-hydrolysable tannins. Ang mga ito ay mga oligomer at polymer ng catechin, leucoanthocyanidins at hydroxystilbenes, kung saan ang mga yunit ay naka-link sa isa't isa sa pamamagitan ng malakas na carbon-carbon bond sa mga posisyon na C2-C6, C2-C8, C4-C8, C5-C2. Bilang karagdagan, hindi sila naglalaman ng mga residu ng asukal.

Sa panahon ng pagbuo ng condensed tannins, ang pyran ring ng catechin (leukoanthocyanidin) ay nasira at ang C2 atom ay konektado ng isang C-C bond na may C6 atom ng isa pang catechin molecule (leucoanthocyanidin). Ang mga condensed tannin ay hindi nasisira sa ilalim ng pagkilos ng mga acid; sa kabaligtaran, sila ay may posibilidad na ibahin ang anyo mula sa mga oligomer sa mas mahabang polymer (acid polymerization) na may pagbuo ng mga amorphous, madalas na pulang kulay na mga compound - flobafen. Ang pagbuo ng condensed tannins ay nangyayari sa isang buhay na halaman sa proseso ng biosynthesis at pagkatapos ng kamatayan nito - sa panahon ng teknolohikal na pagproseso ng kahoy.

Ang pagbuo ng mga condensed tannin mula sa mga monomer

Mga katangian ng physiochemical

Ayon sa mga katangian ng physicochemical, ang mga tannin ay mga amorphous compound ng madilaw-dilaw o kayumanggi na kulay.

Ang mga natural na tannin ay may average na molekular na timbang na 500-5000, ngunit ang mga indibidwal na compound - hanggang sa 20,000. Kapag pinainit sa 180-200 ° C, ang mga tannin (nang walang natutunaw) ay nasusunog, na naglalabas ng pyrogallol o pyrocatechol. Natutunaw sila sa maraming mga organikong solvent (acetone, ethanol, ethyl acetate, pyridine), ngunit hindi sa chloroform, petroleum ether, benzene. Gayundin lubos na natutunaw sa tubig, mas mabuti na mainit. Kapag natunaw sa tubig, nagbibigay sila ng mga colloidal na solusyon ng mahinang acidic na reaksyon. Bumubuo sila ng mga kulay na complex na may mga asing-gamot ng mabibigat na metal. Precipitated sa pamamagitan ng mga solusyon ng amino acids, protina, alkaloids. Maraming tannin ang optically active compounds. Mayroon silang astringent na lasa. Madaling na-oxidize sa hangin, nakakakuha ng pulang-kayumanggi na kulay, minsan madilim na kayumanggi. Ang pagkakaroon ng alkali metal hydroxides ay lubos na nagpapabilis sa oksihenasyon ng mga tannin. Ang mga hydrolysable na tannin ay bumagsak sa mga organic na acid at glucose sa ilalim ng pagkilos ng mga acid o enzymes.

Paghihiwalay mula sa VRS

Ang mga tannin ay isang halo ng iba't ibang polyphenols na may isang kumplikadong istraktura, napaka-labile, kaya ang paghihiwalay at pagsusuri ng mga indibidwal na bahagi ng tannins ay napakahirap. Upang makuha ang dami ng tannins, ang mga herbal na hilaw na materyales ay kinukuha ng mainit na tubig, pinalamig, at pagkatapos ay ang katas ay naproseso nang sunud-sunod:

1) petrolyo eter o benzene (para sa paglilinis mula sa chlorophyll, terpenoids, lipids);

2) diethyl ether, na kumukuha ng mga catechin, hydroxycinnamic acid at iba pang mga phenolic compound;

3) ethyl acetate, kung saan pumasa ang mga leukoanthocyanidins, esters ng hydroxycinnamic acid, atbp.

Ang natitirang aqueous extract na may tannins at iba pang phenolic compound at fractions 2 at 3 (diethyl ether at ethyl acetate) ay pinaghihiwalay sa mga indibidwal na sangkap gamit ang iba't ibang uri ng chromatography. Gamitin ang:

Adsorption chromatography sa mga haligi ng selulusa, polyamide (kung minsan, sa halip na polyamide, gole powder ang ginagamit);

Partition chromatography sa mga column ng silica gel;

Ion exchange chromatography;

Pagsala ng gel sa mga column ng Sephadex, atbp.

Ang pagkakakilanlan ng mga indibidwal na tannin ay batay sa paghahambing ng Rf sa mga pamamaraan ng chromatographic (sa papel, sa isang manipis na layer ng sorbent), mga spectral na pag-aaral, mga reaksyon ng husay at pag-aaral ng mga produkto ng cleavage (para sa hydrolysable tannins).

Qualitative extraction ng tannins

Ang mga husay na reaksyon para sa pagpapasiya ng mga tannin ay maaaring nahahati sa dalawang grupo:

1) pangkalahatan (deposition) - upang makita ang pagkakaroon ng mga tannin;

2) grupo (kulay) - upang maitaguyod ang pag-aari ng mga tannin sa isang partikular na grupo.

Una sa lahat, para sa pagsasagawa ng mga husay na reaksyon, ang isang may tubig na pagkuha ng mga tannin mula sa VP ay inihanda.

Natutukoy ang mga tannin gamit ang mga sumusunod na reaksyon:

Pinagsasama sa 1% gelatin solution sa 10% NaCl solution. Lumilitaw ang labo, nawawala kapag idinagdag ang labis na gulaman. Ang reaksyon ay tiyak;

Precipitating na may mga asing-gamot ng alkaloids (halimbawa, quinine sulfate). Isang puting namuo ang mga form;

Pinagsasama sa isang 5% na solusyon ng potassium dichromate (K2Cr2O7). Nagkakaroon ng brown precipitate o haze. Ang parehong reaksyon ay ginagamit din bilang isang histochemical reaksyon para sa pag-detect ng lokalisasyon ng mga tannin sa VP;

Pagsasama sa isang solusyon ng pangunahing lead acetate: isang puting precipitate ay nabuo;

Ang pagsasama sa vanillin (sa pagkakaroon ng 70% sulfuric o concentrated hydrochloric acid), ang mga tannin na naglalaman ng catechin-type na mga monomer ay nagkakaroon ng pulang kulay.

Ang pag-uuri ng mga tannin ay isinasagawa gamit ang mga sumusunod na reaksyon:

Sa isang 1% na solusyon ng iron ammonium alum (o iba pang mga mapagkukunan ng Fe3 + ions): ang hydrolysable tannins ay nagbibigay ng isang itim-asul na kulay, at condensed - itim-berde;

Sa pamamagitan ng 10% na solusyon ng medium lead acetate sa 10% acetic acid: ang hydrolyzable tannins ay namuo sa isang puting flocculent precipitate, habang ang condensed tannins ay nananatili sa solusyon at maaari ding matukoy sa dakong huli (halimbawa, sa pamamagitan ng greenish-black coloration na may Fe3+);

Sa pinaghalong 40% na solusyon sa formaldehyde at puro HCl: namuo ang mga condensed tannin, habang ang mga hydrolyzable ay nananatili sa may tubig na solusyon (na maaaring makilala ng isang mala-bughaw-itim na kulay sa karagdagang pagsubok na may Fe3+);

Sa mga kristal ng NaNO2 at isang solusyon ng 0.1 M HCl: sa pagkakaroon ng mga tannin sa katas ng VP, lumilitaw ang isang kayumanggi na kulay;

Sa isang solusyon ng HCl at pagdaragdag ng 1% na solusyon (o mga kristal) ng vanillin, ang mga hydrolysable na tannin, na binubuo ng mga catechin monomer, ay nagbibigay ng maliwanag na pulang kulay kapag pinainit. Ang hydrolysable tannins, na binubuo ng leucoanthocyanidin monomers, ay maaaring makita sa pamamagitan ng pag-init ng extract na may HCl solution: lumilitaw ang isang pulang kulay (dahil sa pagbuo ng mga anthocyanidins, na nagbibigay ng pulang kulay sa acidic na mga halaga ng pH);

Kapag ang bromine na tubig ay idinagdag at pinainit, ang condensed tannins sa katas mula sa VP ay namuo.

Sa chromatographic determination ng tannins, ang ethanol extract mula sa VP ay inilapat sa panimulang linya ng Silufol chromatographic plate, na inilagay sa chromatographic chamber (na may naaangkop na mga solvent na tinukoy sa ND), at pagkatapos ng paghihiwalay, ang plate ay titingnan sa UV light at ito ay nabanggit na ang ilang mga catechin derivatives ay may asul na pag-ilaw, na pinahusay sa pamamagitan ng pagproseso ng mga chromatogram na may 1% na solusyon ng vanillin sa puro HCl. Matapos panatilihin ang mga chromatogram sa singaw ng HCl, na sinusundan ng pag-init sa oven sa temperatura na 105 ° C sa loob ng 2 min, ang mga tannin ng uri ng leucoanthocyanidin ay nagiging pink o red-violet anthocyanidins.

Ang dami ng tannin

Ang mga pamamaraan para sa quantitative determination ng tannins sa VP ay maaaring nahahati sa gravimetric, titrimetric at physicochemical.

Ang mga pamamaraan ng gravimetric ay batay sa quantitative precipitation ng mga tannin na may mga salts ng mabibigat na metal, gelatin, o adsorption na may holly powder. Nawala ang kahalagahan ng mga pamamaraan para sa pagpapalabas ng mga tannin na may tansong acetate o gelatin.

Gayunpaman, ang Uniform Weight Method (BEM) ay ginagamit sa industriya ng katad. Ang pamamaraan ay batay sa kakayahan ng mga tannin na bumuo ng malakas na mga bono sa collagen ng balat. Upang gawin ito, ang nagresultang katas ng tubig mula sa MPC ay nahahati sa dalawang pantay na bahagi. Ang isang bahagi ay sumingaw, pinatuyo at tinimbang; ang pangalawa ay ginagamot sa isang pulbos ng balat (balat), sinala. Ang filtrate ay sumingaw, tuyo at tinimbang. Ang pagkakaiba sa pagitan ng mga tuyong nalalabi ng ika-1 at ika-2 bahagi (i.e., kontrol at karanasan) ay tumutukoy sa nilalaman ng mga tannin sa solusyon.

Ang pamamaraan ng titrimetric na kasama sa SP RB (Isyu 2, p. 348), na tinatawag na pamamaraang Leventhal-Neubauer, ay batay sa oksihenasyon ng mga phenolic OH na grupo na may potassium permanganate (MnO4) sa pagkakaroon ng indigo sulfonic acid, na isang regulator at indicator ng reaksyon. Matapos ang kumpletong oksihenasyon ng mga tannin, ang indigo sulfonic acid ay nagsisimulang mag-oxidize sa isatin, bilang isang resulta kung saan ang kulay ng solusyon ay nagbabago mula sa asul hanggang sa ginintuang dilaw.

Ang isa pang pamamaraan ng titrimetric para sa pagtukoy ng mga tannin ay ang paraan ng pag-ulan ng tannin na may zinc sulfate, na sinusundan ng complexometric titration na may Trilon B sa pagkakaroon ng xylene orange (ginamit, lalo na, upang matukoy ang tannin sa mga dahon ng tannic sumac at tannery tannin. ).

Mga pisikal at kemikal na pamamaraan para sa pagtukoy ng mga tannin:

Colorimetric - nauugnay sa kakayahan ng mga tannin na magbigay ng mga kulay na compound na may phosphorus-molybdic o phosphorus-tungstic acids sa pagkakaroon ng Na2CO3 o sa Folin-Denis reagent (para sa mga phenol). Ang SP RB (Vol. 1; 2.8.14) ay nag-aalok ng photocolorimetric determination ng mga tannin na nakuha mula sa VP sa isang may tubig na solusyon na may solusyon ng isang phosphorus-molybdenum reagent sa pagkakaroon ng sodium carbonate sa wavelength na 760 nm;

Chromato-spectrophotometric at nephelometric na pamamaraan, na pangunahing ginagamit sa siyentipikong pananaliksik.

Pamamahagi sa mundo ng halaman, mga kondisyon ng pagbuo at papel sa mga halaman

Ang mga tannin ay malawak na ipinamamahagi sa kaharian ng halaman. Ang mga ito ay matatagpuan sa fungi, algae, ferns, horsetails, mosses, club mosses, at sa mas matataas na halaman (angiosperms at gymnosperms). Maraming mga conifer ang nag-iipon ng medyo malaking halaga ng mga tannin. Ang kanilang pinakamataas na akumulasyon ay natagpuan sa mga indibidwal na kinatawan ng mga dicotyledonous na halaman, habang sa mga monocots ito ay nabanggit lamang sa ilang mga pamilya. Mababang nilalaman ng tannins sa mga cereal. Sa mga dicotyledon, ang ilang mga pamilya (halimbawa, Rosaceae, Buckwheat, Legumes, Willows, Sumac, Beech, Heather) ay kinabibilangan ng maraming genera at species, kung saan ang nilalaman ng mga tannin ay umaabot sa 20-30% o higit pa. Ang pinakamataas na nilalaman ng tannins ay natagpuan sa mga pathological formations - galls (hanggang sa 60-80%). Ang mga makahoy na anyo ay mas mayaman sa mga tannin kaysa sa mala-damo. Ang mga tannin ay hindi pantay na ipinamamahagi sa mga organo at tisyu ng mga halaman. Nag-iipon sila pangunahin sa balat at kahoy ng mga puno at shrubs, pati na rin sa mga underground na bahagi ng mala-damo na perennials; Ang mga berdeng bahagi ng mga halaman ay mas mahirap sa tannins. Sa partikular, ang mga tannin ay naipon:

Sa ilalim ng lupa organo (Potentilla erectus, Burnet officinalis, Badan makapal na dahon);

Kore (karaniwang oak);

Grass (mga uri ng St. John's wort);

Mga prutas (karaniwang blueberry, bird cherry, malagkit na alder at

tungkol sa. kulay-abo);

Mga dahon (tanning sumac, leather skumpia).

Ang mga tannin ay nag-iipon sa mga vacuole, at sa panahon ng pagtanda ng cell sila ay na-adsorbed sa mga dingding ng cell. Kadalasan sa mga halaman mayroong isang halo ng hydrolyzable at condensed tannins na may pamamayani ng mga compound ng isang grupo o iba pa.

Ang nilalaman ng tannins sa mga halaman ay nag-iiba depende sa panahon ng paglaki at edad ng mga halaman. Ang kanilang akumulasyon ay sabay-sabay na sinamahan ng isang matalim na pagtaas sa masa ng mga sistema ng ugat. Sa edad ng mga halaman, bumababa ang dami ng tannin sa kanila. Ang lumalagong panahon ay nakakaapekto hindi lamang sa dami, kundi pati na rin sa husay na komposisyon ng mga tannin.

Ang mga halaman na lumalaki sa araw ay nag-iipon ng mas maraming tannin kaysa sa mga tumutubo sa lilim (halimbawa, sa mga tropikal na halaman ay bumubuo sila ng higit pa kaysa sa mga halaman na may katamtamang latitude). Ang nilalaman ng tannins sa mga halaman ay apektado din ng altitude, season - lalo na sa mga lugar na may binibigkas na pana-panahong klima. Ang nilalaman ng tannins ay depende sa parehong klimatiko, lupa at genetic (namamana) na mga kadahilanan ng halaman.

Ito ay itinatag na ang karamihan sa mga tannin sa mga dahon ay matatagpuan sa mga selula ng parenchyma na nakapalibot sa ugat, ibig sabihin, ang mga tannin ay nabuo sa mga dahon at mula doon ay pumasa sa mga phloem cell ng mga vascular bundle, kung saan sila ay dinadala sa kabuuan. ang halaman. Ang pagkakaroon ng mga katangian ng bactericidal (dahil sa kanilang phenolic na kalikasan), pinipigilan nila ang pagkabulok ng kahoy at mga sangkap na nagpoprotekta sa mga halaman mula sa mga peste at pathogen. Ang mga tannin ay kasangkot din sa mga proseso ng metabolismo ng halaman. Ang mga ito ay idineposito bilang mga ekstrang produkto, na maaaring magamit sa panahon ng paggising ng tagsibol at paglago ng mga vegetative organ.

Aksyon at aplikasyon ng biomedical

Ang mga tannin at LR na naglalaman ng mga ito ay pangunahing ginagamit bilang mga astringent, anti-inflammatory at hemostatic agent.

Ang mga solusyon sa tannin ay nagbubuklod sa mga protina ng balat, na bumubuo ng isang pelikulang hindi tinatablan ng tubig. Ang kanilang medikal na paggamit sa anyo ng mga astringent ay batay dito, dahil ang pelikula na nabuo sa mauhog na lamad ay pumipigil sa karagdagang pamamaga, at inilapat sa sugat, pinapalitan nila ang dugo at samakatuwid ay kumikilos bilang mga lokal na ahente ng hemostatic. Ang pag-aari ng pagbuo ng isang pelikula sa dila ay tumutukoy sa katangian ng astringent na lasa ng tannins.

Bilang mga astringent;

Mga ahente ng hemostatic;

Mga gamot na anti-namumula;

Mga ahente ng antimicrobial;

at bilang din:

P-bitamina at anti-sclerotic agent (hydrolysable at condensed tannins);

Antioxidants at hypooxants (condensed tannins);

Mga ahente ng antitumor (condensed tannins);

Antidotes para sa pagkalason sa glycosides, alkaloids at salts ng mabibigat na metal (tannins).

Ipinakita na ang malalaking dosis ng tannin ay may epektong antitumor, ang mga medium na dosis ay may epektong radiosensitizing, at ang maliliit na dosis ay may epektong antiradiation.

Ang mga tannin ay malawakang ginagamit din sa industriya ng balat, cognac at pagkain.

Paghahanda ng VP na naglalaman ng mga tannin

Ang pag-aani ay isinasagawa sa panahon ng pinakamataas na nilalaman ng mga tannin. Mabilis na matuyo sa temperatura na 50-60 ° C, dahil ang matagal na pag-iimbak ng mga sariwang hilaw na materyales ay humahantong sa hydrolytic cleavage ng hydrolysable at condensed tannins sa ilalim ng impluwensya ng mga enzyme. Ang pinatuyong VP ay iniimbak nang buo sa isang tuyo na lugar sa isang nakabalot na anyo. Sa panahon ng pag-iimbak ng durog na VP, ang rate ng oksihenasyon ng mga tannin ay tumataas, at nagbabago ang kulay.

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Mga tannin (tannin) - ito ay mga kumplikadong pinaghalong planta na may mataas na molekular na polimer ng mga phenolic compound na may molekular na timbang na 300 hanggang 5000 (mga 500-3000), na may astringent na lasa, na may kakayahang bumuo ng malakas na mga bono sa mga protina, na nagiging hilaw na balat ng hayop sa tanned leather.

Ang kakanyahan ng proseso ng pangungulti ay ang pagbuo ng malakas na mga bono ng hydrogen sa pagitan ng mga phenolic hydroxyls ng tannins at mga molekula ng protina ng collagen. Ang resulta ay isang malakas na cross-linked na istraktura - ang balat, lumalaban sa init, kahalumigmigan, microorganisms, enzymes, i.e. hindi bulok.

Ang mga polyphenolic compound na may mas mababang molekular na timbang (mas mababa sa 300) ay na-adsorbed lamang sa mga protina, ngunit hindi nakakabuo ng mga matatag na complex, at hindi ginagamit bilang mga tanning agent. Ang mga polyphenol na may mataas na molekular na timbang (na may timbang na molekular na higit sa 5000) ay hindi rin mga ahente ng pangungulti, dahil ang kanilang mga molekula ay masyadong malaki at hindi tumagos sa pagitan ng mga collagen fibrils.

Kaya, ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng mga tannin at iba pang mga polyphenolic compound ay ang kakayahang bumuo ng malakas na mga bono ng hydrogen na may mga protina.

Ang terminong "tannins" ay unang ginamit ng Pranses na siyentipiko na si Seguin noong 1796 upang tumukoy sa mga sangkap na naroroon sa mga extract ng ilang mga halaman na maaaring magsagawa ng proseso ng pangungulti. Ang isa pang pangalan para sa tannins - "tannins" ay mula sa Latinized form ng Celtic na pangalan para sa oak - " kulay-balat”, na ang balat ay matagal nang ginagamit sa pagproseso ng balat.

Ang unang siyentipikong pananaliksik sa larangan ng tannin chemistry ay nagsimula noong ikalawang kalahati ng ika-18 siglo. Ang mga ito ay sanhi ng mga praktikal na pangangailangan ng industriya ng katad. Ang unang nai-publish na gawain ay ang gawain ni Gledich (1754) "Sa paggamit ng mga blueberries bilang isang hilaw na materyal para sa produksyon ng mga tannins." Ang unang monograp ay ang monograp ni Dekker, na inilathala noong 1913, na nagbubuod ng lahat ng naipon na materyal sa mga tannin. Ang paghahanap, paghihiwalay at pagtatatag ng istraktura ng mga tannin ay isinagawa ng mga domestic scientist na si L.F. Ilyin, A.L. Kursanov, M.N. Zaprometov, F.M. Flavitsky, G. Povarnin, A.I. Oparin at iba pa; mga dayuhang siyentipiko G. Procter, K. Freidenberg, E. Fischer, P. Karrer at iba pa.

Pamamahagi sa mundo ng halaman

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Ang mga tannin ay malawak na ipinamamahagi sa wildlife. Sila ay matatagpuan higit sa lahat sa mga halaman, ngunit matatagpuan din sa algae, fungi at lichens. Ang pinakakaraniwang mga tannin sa mga kinatawan ng mga dicotyledon, kung saan sila ay naipon sa maximum na dami. Ang mga monocotyledon ay karaniwang hindi naglalaman ng mga tannin, ang mga tannin ay matatagpuan sa mga pako, at sa mga horsetail, lumot, club mosses halos wala sila, o ang mga ito ay nasa kaunting dami.

Ang mga pamilyang may pinakamataas na nilalaman ng tannins ay:

• sumac - Anacardiaceae (tanning sumac, leather skumpia);
• rosaceous - Rosaceae (burnet officinalis, cinquefoil erect);
• beech - Fagaceae (ordinaryong oak (d. pedunculate) at d. mabato);
• bakwit - Polygonaceae (malaking serpentine at z. karne-pula);
• heather - Ericaceae (bearberry, lingonberry);
• birch - Betulaceae (grey alder at o. sticky), atbp.

Tungkulin sa buhay ng halaman

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Ang biyolohikal na papel para sa buhay ng halaman ay hindi pa ganap na naipaliwanag. Mayroong ilang mga hypotheses:

1. tannins - mga basurang produkto ng mahahalagang aktibidad ng mga organismo ng halaman;
2. Ang mga tannin ay isang anyo ng mga reserbang sustansya. Ito ay ipinahiwatig ng kanilang lokalisasyon sa mga underground na organo at ang cortex;
3. ang mga tannin ay gumaganap ng isang proteksiyon na function, tk. kapag ang mga halaman ay nasira, bumubuo sila ng mga complex na may mga protina na lumikha ng isang proteksiyon na pelikula na pumipigil sa pagtagos ng mga phytopathogenic na organismo. Mayroon silang bactericidal at fungicidal properties;
4. Ang mga tannin ay kasangkot sa mga proseso ng redox, ay mga carrier ng oxygen sa mga halaman.

Biosynthesis, lokalisasyon at akumulasyon ng mga tannin sa mga halaman

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Ang biosynthesis ng hydrolysable tannins ay sumusunod sa shikimate pathway, ang condensed tannins ay nabuo kasama ang isang mixed path (shikimate at acetate-malonate).

Ang mga tannin ay nasa isang dissolved state sa mga vacuoles ng mga cell ng halaman; sa panahon ng pagtanda ng cell, sila ay na-adsorbed sa mga cell wall. Ang mga ito ay naisalokal sa mga selula ng epidermis, mga parietal na selula na nakapalibot sa mga vascular bundle (mga ugat ng dahon), sa mga parenchymal na selula ng mga core ray, bark, kahoy at phloem.

Ang mga tannin ay naiipon sa malalaking dami pangunahin sa mga underground na organo ng pangmatagalang halaman na mala-damo (rhizomes ng bergenia, serpentine, cinquefoil, rhizomes at mga ugat ng burnet), sa balat at kahoy ng mga puno at shrubs (bark ng oak, viburnum), sa mga prutas ( mga bunga ng cherry ng ibon, blueberries, alder seedlings), mas madalas sa mga dahon (dahon ng skumpia, sumac, tsaa).

Ang akumulasyon ng mga tannin ay nakasalalay sa mga genetic na kadahilanan, klimatiko at mga kondisyon sa kapaligiran. Sa mala-damo na mga halaman, bilang isang panuntunan, ang pinakamababang halaga ng tannins ay nabanggit sa tagsibol sa panahon ng paglago ng shoot, pagkatapos ang kanilang nilalaman ay tumataas at umabot sa maximum sa panahon ng namumulaklak at namumulaklak (halimbawa, Potentilla rhizomes). Sa pagtatapos ng lumalagong panahon, unti-unting bumababa ang dami ng tannin. Sa burnet, ang maximum na tannins ay naipon sa yugto ng pag-unlad ng mga dahon ng rosette, sa yugto ng pamumulaklak ay bumababa ang kanilang nilalaman, at sa taglagas ay tumataas muli. Ang yugto ng mga halaman ay nakakaapekto hindi lamang sa dami, kundi pati na rin sa husay na komposisyon ng mga tannin. Sa tagsibol, sa panahon ng daloy ng katas sa balat ng mga puno at shrubs at sa yugto ng muling paglaki ng mga shoots sa mala-damo na mga halaman, ang hydrolyzable tannins ay pangunahing naiipon, at sa taglagas, sa yugto ng pagkamatay ng halaman, condensed tannins at kanilang mga produkto ng polymerization. , flobaphenes (pula).

Ang pinaka-kanais-nais na mga kondisyon para sa akumulasyon ng mga tannin ay ang mga kondisyon ng isang mapagtimpi na klima (forest zone at high-mountain alpine belt).

Ang pinakamataas na nilalaman ng tannins ay nabanggit sa mga halaman na lumalaki sa siksik na calcareous na mga lupa; sa maluwag na chernozem at mabuhangin na mga lupa, ang kanilang nilalaman ay mas mababa. Ang mga lupang mayaman sa posporus ay nag-aambag sa akumulasyon ng mga tannin, ang mga lupang mayaman sa nitrogen ay nagbabawas sa nilalaman ng mga tannin.

Pag-aani, pagpapatuyo at pag-iimbak ng mga hilaw na materyales na naglalaman ng mga tannin

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Ang pag-aani ng mga materyales sa halamang gamot na naglalaman ng mga tannin ay isinasagawa ayon sa mga pangkalahatang tuntunin. Gayunpaman, may ilang mga pagbubukod sa panuntunan:

• Ang potentilla rhizomes ay ani sa tag-araw, sa panahon ng pamumulaklak, dahil. ang nilalaman ng condensed tannins sa kanila ay medyo malaki, at isinasaalang-alang din nila ang katotohanan na pagkatapos ng halaman ay kumupas at ang mga aerial na bahagi nito ay nalanta, sa taglagas, ang Potentilla ay halos imposible na makita sa damo ng mga marshy na lugar;
• ang mga rhizome ng coil ay hinukay kaagad pagkatapos ng pamumulaklak ng halaman;
• Ang mga rhizome at mga ugat ng burnet ay dapat na mahukay sa panahon ng fruiting, kapag ang madilim na pulang inflorescences ay madaling makita sa halamanan;
• Ang mga punla ng alder ay inaani sa huling bahagi ng taglagas o taglamig, kapag ang mga dahon ay hindi makagambala.

Patuyuin ang mga nakolektang hilaw na materyales sa mga dryer sa temperatura na hindi hihigit sa 60 ºС (40-60 ºС). Sa natural na pagpapatayo, ang mga hilaw na materyales ay inilatag sa isang manipis na layer sa open air o sa isang closed ventilated room.

Ang mga hilaw na materyales ay maaaring tuyo sa araw, dahil. ang mga tannin ay hindi nabubulok sa ilalim ng impluwensya ng mga sinag ng ultraviolet.

Mag-imbak ng mga hilaw na materyales na naglalaman ng mga tannin ay dapat na alinsunod sa mga pangkalahatang tuntunin. Ang mga bird cherry at blueberry na prutas ay nakaimbak nang hiwalay, kasama ng iba pang mga prutas. Ang mga punla ng alder ay iniimbak kasama ng lahat ng uri ng hilaw na materyales, dahil. ang mga punla ay makahoy at, tulad ng ipinakita ng karanasan, ay hindi napinsala ng mga peste ng kamalig.

Mga katangiang pisikal at kemikal

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Ang mga tannin ay nakahiwalay sa mga hilaw na materyales ng gulay sa anyo ng isang halo ng mga polimer at mga amorphous na sangkap ng dilaw o dilaw-kayumanggi na kulay, walang amoy, astringent na lasa, napaka-hygroscopic. Natutunaw sila nang maayos sa tubig (lalo na sa mainit na tubig) na may pagbuo ng mga koloidal na solusyon; natutunaw din sila sa ethyl at methyl alcohols, acetone, ethyl acetate, butanol, pyridine. Hindi matutunaw sa chloroform, benzene, diethyl ether at iba pang non-polar solvents, optically active.

Madaling na-oxidized sa hangin. May kakayahang bumuo ng malakas na intermolecular bond na may mga protina at iba pang polimer (pectic substance, cellulose, atbp.). Sa ilalim ng pagkilos ng mga enzyme at acid, ang mga hydrolysable na tannin ay nabubulok sa kanilang mga bahagi ng constituent, ang mga condensed tannin ay na-polymerize.

Mula sa may tubig solusyon precipitated sa pamamagitan ng gelatin, alkaloids, lead acetate, potassium dichromate, cardiotonic glycosides.

Bilang mga sangkap na may likas na phenolic, ang mga tannin ay madaling na-oxidize ng potassium permanganate sa isang acidic na kapaligiran at iba pang mga oxidizing agent, bumubuo ng mga kulay na complex na may mga asing-gamot ng mabibigat na metal, ferric iron, at bromine na tubig.

Madaling ma-adsorbed sa skin powder, cellulose, cotton wool.

Pagsusuri ng mga hilaw na materyales na naglalaman ng mga tannin

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Upang makuha ang dami ng tannins, ang mga hilaw na materyales ng gulay ay nakuha na may mainit na tubig sa isang ratio na 1:30 o 1:10.

Qualitative Analysis

Ginagamit ang mga qualitative reactions (precipitation at color) at chromatographic examination.

ako. Pangkalahatang mga reaksyon ng pag-ulan- upang makita ang mga tannin sa mga hilaw na materyales:

1. Ang isang tiyak na reaksyon ay ang gelatin precipitation reaction, gamit ang isang 1% gelatin solution sa isang 10% sodium chloride solution. Lumilitaw ang flocculent precipitate o turbidity, nawawala kapag idinagdag ang labis na gelatin. Ang isang negatibong reaksyon sa gelatin ay nagpapahiwatig ng kawalan ng mga tannin.
2. Reaksyon sa mga asing-gamot ng alkaloid, gamit ang isang 1% na solusyon ng quinine chloride. Lumilitaw ang isang amorphous precipitate dahil sa pagbuo ng mga hydrogen bond sa pagitan ng mga hydroxyl group ng tannins at ng nitrogen atoms ng alkaloid.

Ang mga reaksyong ito ay nagbibigay ng parehong epekto anuman ang pangkat ng mga tannin. Ang isang bilang ng mga reaksyon ay ginagawang posible upang matukoy kung ang mga tannin ay kabilang sa isang partikular na grupo.

II. Grupo husay na reaksyon para sa tannins:

№	Reagent	Mga hydrolysable na tannin	Mga condensed tannin
1	palabnawin ang sulfuric acid	hydrolysis	pula-kayumanggi flobafen (kraseni)
2	bromine water (5g ng bromine sa 1 litro ng tubig)	———	orange o dilaw na namuo
3	1% na solusyon ng iron ammonium alum (iron oxide chloride ay hindi ginagamit, dahil ang solusyon nito ay may acidic na reaksyon)	itim-asul na kulay o sediment	kulay itim-berde o sediment
4	10% na solusyon ng lead medium acetate (sabay-sabay na magdagdag ng 10% na solusyon ng acetic acid)	puting namuo, hindi matutunaw sa acetic acid (ang namuo ay sinala at ang nilalaman ng condensed tannins ay tinutukoy sa filtrate, na may 1% na solusyon ng iron ammonium alum - black-green na kulay)	puting namuo, natutunaw sa acetic acid
5	Stiasni test (40% formaldehyde solution na may concentrated hydrochloric acid)	———	isang brick-red precipitate (ang precipitate ay sinala at ang nilalaman ng hydrolysable tannins ay tinutukoy sa filtrate, sa isang neutral na daluyan na may 1% na solusyon ng iron ammonium alum - black-blue coloration)
6	1% na solusyon ng vanillin sa puro hydrochloric acid	———	orange-red staining (catechins)

Ang reaksyon na may 1% na solusyon sa alkohol ng iron ammonium alum ay kasama sa lahat ng mga dokumento ng regulasyon para sa mga hilaw na materyales bilang isang reaksyon upang matukoy ang kanilang pagiging tunay. Ang reaksyon ay inirerekomenda ng GF XI at isinasagawa kapwa sa isang decoction ng mga hilaw na materyales (oak bark, serpentine rhizomes, alder seedlings, blueberries), at direktang buksan ang mga tannin sa mga tuyong hilaw na materyales (oak bark, viburnum bark, bergenia rhizomes) .

dami

Mayroong tungkol sa 100 iba't ibang mga pamamaraan para sa dami ng pagpapasiya ng mga tannin, na maaaring nahahati sa mga sumusunod na pangunahing grupo.

1. gravimetric, o base sa bigat paraan- batay sa quantitative precipitation ng tannins sa pamamagitan ng gelatin, heavy metal ions o adsorption sa pamamagitan ng skin (hubad) powder.

Para sa mga teknikal na layunin, ang gravimetric na pamamaraan sa paggamit ng holla powder - ang weighted uniform method (BEM) ay pamantayan sa buong mundo.

Ang may tubig na katas ng tannins ay nahahati sa dalawang pantay na bahagi. Ang isang bahagi ng katas ay sumingaw at pinatuyo sa pare-pareho ang timbang. Ang isa pang bahagi ng katas ay ginagamot sa pulbos ng balat at sinala. Ang mga tannin ay na-adsorbed sa leather powder at nananatili sa filter. Ang filtrate at washings ay sumingaw at tuyo sa pare-pareho ang timbang. Ang nilalaman ng mga tannin ay kinakalkula mula sa pagkakaiba sa masa ng mga tuyong nalalabi.

Ang pamamaraan ay hindi tumpak, dahil Ang pulbos ng balat ay sumisipsip din ng mababang molekular na timbang na mga phenolic compound, na sa halip ay matrabaho at mahal.

1. Titrimetric paraan. Kabilang dito ang:

a) gelatinous paraan- batay sa kakayahan ng mga tannin na bumuo ng mga hindi matutunaw na complex na may mga protina. Ang mga may tubig na katas mula sa mga hilaw na materyales ay na-titrate ng isang 1% gelatin solution; sa equivalence point, ang gelatin tannate complex ay natutunaw sa labis na reagent. Ang titer ay tinutukoy ng purong tannin. Natutukoy ang equivalence point sa pamamagitan ng pagpili ng pinakamaliit na volume ng titrated solution na nagdudulot ng kumpletong pag-ulan ng tannins.

Ang pamamaraan ay ang pinaka-tumpak, dahil nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang dami ng tunay na tannin. Mga disadvantages: ang haba ng kahulugan at ang kahirapan sa pagtatatag ng equivalence point.

b) Permanganometric paraan(Ang pamamaraan ng Leventhal-Neubauer ay binago ni A.L. Kursanov). Ang pamamaraang pharmacopoeial na ito ay batay sa madaling oksihenasyon ng mga tannin na may potassium permanganate sa isang acidic na daluyan sa pagkakaroon ng isang tagapagpahiwatig at isang katalista ng indigo sulfonic acid, na sa punto ng katumbas ay nagiging isatin, at ang kulay ng solusyon ay nagbabago mula sa asul sa gintong dilaw.

Mga tampok ng pagpapasiya na nagpapahintulot sa titrating lamang ng mga macromolecule ng tannins: ang titration ay isinasagawa sa mataas na diluted na solusyon (ang pagkuha ay diluted 20 beses) sa temperatura ng kuwarto sa isang acidic na daluyan, ang potassium permanganate ay idinagdag nang dahan-dahan, patak sa pamamagitan ng patak, na may masiglang pagpapakilos.

Ang pamamaraan ay matipid, mabilis, madaling gawin, ngunit hindi sapat na tumpak, dahil Ang potassium permanganate ay bahagyang nag-oxidize ng mababang molekular na timbang na mga phenolic compound.

1. Physico-kemikal paraan.

a) Photoelectrocolorimetric Ang mga pamamaraan ay batay sa kakayahan ng mga tannin na bumuo ng mga kulay na compound na may ferric salts, phosphoric-tungstic acid, Folin-Denis reagent, atbp.

b) Chromatospectrophotometric at nephelometric paraan ginagamit sa siyentipikong pananaliksik.

Mga paraan ng paggamit ng mga hilaw na materyales, medikal na aplikasyon, paghahanda

text_fields

text_fields

arrow_pataas

Bilang karagdagan sa mga mapagkukunan ng pang-industriya na produksyon ng medikal na tannin, ang lahat ng mga bagay na pinag-aaralan ay kasama sa Order No. 79 na may petsang Marso 18, 1997, na nagpapahintulot sa hindi reseta na pagbebenta ng mga hilaw na materyales mula sa mga parmasya.

Sa mga extemporaneous recipe at sa bahay, ang mga hilaw na materyales ay ginagamit sa anyo ng mga decoction at bilang bahagi ng mga bayad.

Ang mga herbal na paghahanda ay hindi ginawa (ang mga likidong katas ng bergenia rhizomes at burnet rhizomes at mga ugat ay kasalukuyang hindi kasama sa Rehistro ng Estado).

Tannin at pinagsamang paghahanda "Tanalbin" (isang complex ng tannin na may casein protein) at "Tansal" (isang complex ng tanalbin na may phenyl salicylate) ay nakuha mula sa mga dahon ng tannin leather, tanning sumac, Chinese at Turkish galls. Mula sa mga punla ng alder, nakuha ang gamot na "Altan".

Ang mga hilaw na materyales at paghahanda na naglalaman ng mga tannin ay ginagamit panlabas at panloob

• astringents,
• pang-alis ng pamamaga,
• bactericidal at
• mga ahente ng hemostatic.

Batay sa aksyon sa kakayahan ng mga tannin na magbigkis sa mga protina na may pagbuo ng mga siksik na albuminate. Sa pakikipag-ugnay sa isang inflamed mucous membrane o ibabaw ng sugat, isang manipis na pelikula sa ibabaw ay nabuo na nagpoprotekta sa mga sensitibong nerve endings mula sa pangangati. Mayroong isang sealing ng mga lamad ng cell, pagpapaliit ng mga daluyan ng dugo, ang pagpapalabas ng mga exudate ay bumababa, na humahantong sa isang pagbawas sa proseso ng nagpapasiklab.

Dahil sa kakayahan ng mga tannin na bumuo ng mga precipitates na may mga alkaloid, cardiotonic glycosides, mga asing-gamot ng mabibigat na metal, ang kanilang ginagamit bilang antidotes sa kaso ng pagkalason sa mga sangkap na ito.

Sa panlabas

• na may mga sakit ng oral cavity, pharynx, larynx (stomatitis, gingivitis, pharyngitis, tonsilitis), pati na rin ang
• para sa mga paso, ang mga decoction ng bark ng oak, rhizomes ng bergenia, serpentine, cinquefoil, rhizomes at mga ugat ng burnet, tannin, "Altan" ay ginagamit.

sa loob

• para sa mga sakit sa gastrointestinal (colitis, enterocolitis, diarrhea, dysentery), ang mga paghahanda ng tannin ay ginagamit (Tanalbin, Tansal), Altan, decoctions ng blueberries, bird cherry (lalo na sa pediatric practice), alder seedlings, bergenia rhizomes, serpentine , cinquefoil, rhizomes at mga ugat ng burnet.

Parang hemostatic pondo

• para sa may isang ina, gastric at hemorrhoidal dumudugo, decoctions ng viburnum bark, rhizomes at roots ng burnet, rhizomes ng cinquefoil, alder seedlings ay ginagamit.

Ang mga decoction ay inihanda sa isang ratio ng 1:5 o 1:10.

Huwag gumamit ng masyadong puro decoctions , dahil sa kasong ito ang albuminate film ay natuyo, lumilitaw ang mga bitak, at nangyayari ang pangalawang proseso ng pamamaga.

Eksperimental na itinatag aktibidad ng antitumor tannin isang may tubig na katas ng pericarp ng prutas ng granada (para sa lymphosarcoma, sarcoma at iba pang mga sakit) at ang gamot na "Hanerol", na nakuha batay sa mga ellagitannins at polysaccharides ng mga inflorescences ng fireweed (willow-herb) (para sa kanser sa tiyan at baga).

Output ng koleksyon:

MGA PAMAMARAAN PARA SA DAMI NG PAGTATAYA NG MGA TANNIES SA MGA RAW NA MATERYAL NA HALAMAN NG GAMOT

Mikhailova Elena Vladimirovna

cand. biol. Sci., Assistant, VSMA na pinangalanang V.I. N.N. Burdenko,

Voronezh

Email: milenok[email protected] rambler.en

Vasilyeva Anna Petrovna

Martynova Daria Mikhailovna

mag-aaral ng VSMA N.N. Burdenko, Voronezh

Email: darjamartynova[email protected] rambler.en

Ang Tannins (DV) ay isang napaka-karaniwang pangkat ng mga biologically active substances (BAS) ng mga halaman, na mayroong iba't ibang mga katangian ng pharmacological, na siyang dahilan ng kanilang malawakang paggamit sa medisina. Samakatuwid, ang problema sa pagtukoy ng magandang kalidad ng mga gamot at mga hilaw na materyales ng halamang gamot (MPR) na naglalaman ng pangkat na ito ng mga biologically active substance ay napaka-kaugnay. Ang isa sa mga pangunahing pamamaraan para sa pagtatatag ng magandang kalidad ng MPS ay isang quantitative phytochemical analysis. Sa kasalukuyan, mayroong ilang mga pamamaraan na nagpapahintulot sa ganitong uri ng pagsusuri ng MPC na naglalaman ng DV, ngunit ang data ng panitikan ay nakakalat. Kaugnay ng mga nabanggit, kinakailangan na i-systematize ang mga pamamaraan ng quantitative analysis ng DVvLRS.

Ang mga klasikal na pamamaraan para sa pagtukoy ng nilalaman ng mga aktibong sangkap ay gravimetric (timbang) at mga pamamaraan ng titrimetric. Ang pamamaraang gravimetric ay batay sa pag-aari ng mga aktibong sangkap na mauunahan ng gelatin, mga heavy metal ions, at pulbos ng balat (hubad). Ang unang hakbang ay upang matukoy ang masa ng tuyong nalalabi sa may tubig na katas mula sa MPC. Ang katas ay pagkatapos ay tuyo sa pare-pareho ang timbang. Ang susunod na yugto ay ang pagpapalabas ng katas mula sa aktibong sangkap sa pamamagitan ng pagproseso na may holly powder. Sa kasong ito, ang isang namuo ay namuo, na pagkatapos ay tinanggal sa pamamagitan ng pagsasala, ang halaga ng tuyong nalalabi ay muling tinutukoy, at ang dami ng mga aktibong sangkap ay tinutukoy ng pagkakaiba sa ipinahiwatig na masa ng tuyong nalalabi.

Kasama sa mga pamamaraan ng titrimetric ang:

1. Titration na may gelatin solution. Ang pamamaraang ito ay nakabatay din sa pag-aari ng mga aktibong sangkap na mauunahan ng mga protina (gelatin). Ang mga may tubig na katas mula sa mga hilaw na materyales ay na-titrated na may 1% gelatin solution. Ang titer ay tinutukoy ng purong tannin. Ang equivalence point ay itinakda sa pamamagitan ng pagpili sa pinakamaliit na volume ng titrant na nagiging sanhi ng kumpletong pag-ulan ng mga aktibong sangkap. Ang pamamaraang ito ay lubos na tiyak at nagbibigay-daan sa iyo na itatag ang nilalaman ng totoong DV, ngunit sa halip ay mahaba ang pagpapatupad, at ang pagtatatag ng equivalence point ay nakasalalay sa kadahilanan ng tao.

2. Permanganatometric titration. Ang pamamaraang ito ay ipinakita sa General Pharmacopoeia Monograph at batay sa madaling oxidizability ng DV sa pamamagitan ng potassium permanganate sa isang acidic na daluyan sa pagkakaroon ng indigo sulfonic acid. Sa dulong punto ng titration, ang kulay ng solusyon ay nagbabago mula sa asul hanggang sa ginintuang dilaw. Sa kabila ng ekonomiya, bilis, kadalian ng pagpapatupad, ang pamamaraan ay hindi sapat na tumpak, na nauugnay sa kahirapan sa pagtatatag ng equivalence point, pati na rin sa labis na pagtatantya ng mga resulta ng pagsukat dahil sa malakas na kakayahan sa pag-oxidizing ng titrant.

3. Complexometric titration na may Trilon B na may preliminary precipitation ng DV zinc sulfate. Ang pamamaraan ay ginagamit para sa dami ng pagpapasiya ng tannin sa mga hilaw na materyales ng tanning sumac at tanning sumac. Ang Xylenol orange ay ginagamit bilang indicator.

Kasama sa mga pamamaraang physicochemical para sa quantitative determination ng DV sa mga materyal na halamang gamot ang photoelectrocolorimetric, spectrophotometric, amperometric na paraan at ang paraan ng potentiometric at coulometric titration.

1. Paraang photoelectrocolorimetric. Ito ay batay sa kakayahan ng DI na bumuo ng mga kulay na kemikal na compound na may mga iron (III) salts, phosphotungstic acid, Folin-Denis reagent at iba pang mga substance. Ang isa sa mga reagents ay idinagdag sa pinag-aralan na katas mula sa MPC, pagkatapos ng hitsura ng isang matatag na kulay, ang optical density ay sinusukat sa isang photocolorimeter. Ang porsyento ng AI ay natutukoy mula sa isang calibration curve na binuo gamit ang isang serye ng mga tannin solution na alam na konsentrasyon.

2. Pagpapasiya ng spectrophotometric. Matapos makuha ang isang may tubig na katas, ang bahagi nito ay i-centrifuge sa loob ng 5 minuto sa 3000 rpm. Ang isang 2% na may tubig na solusyon ng ammonium molybdate ay idinagdag sa centrifuge, pagkatapos nito ay natunaw ng tubig at iniwan ng 15 minuto. Ang intensity ng nagresultang kulay ay sinusukat sa isang spectrophotometer sa wavelength na 420 nm sa isang cuvette na may kapal ng layer na 10 mm. Ang pagkalkula ng mga tanides ay isinasagawa ayon sa isang karaniwang sample. Ang GSO ng tannin ay ginagamit bilang karaniwang sample.

3. Pagpapasiya ng Chromatographic. Upang makilala ang mga condensed tannin, ang alkohol (95% ethyl alcohol) at mga water extract ay nakuha at ang papel at manipis na layer na chromatography ay isinasagawa. GSO ng catechin ay ginagamit bilang isang karaniwang sample. Ang paghihiwalay ay isinasagawa sa mga solvent system butanol - acetic acid - tubig (BUW) (40: 12: 28), (4: 1: 2), 5% acetic acid sa Filtrak na papel at Silufol plate. Ang pagtuklas ng mga zone ng mga sangkap sa chromatogram ay isinasagawa sa UV light, na sinusundan ng paggamot na may 1% na solusyon ng iron ammonium alum o isang 1% na solusyon ng vanillin, puro hydrochloric acid. Sa hinaharap, posibleng magsagawa ng quantitative analysis sa pamamagitan ng elution mula sa DV plate na may ethyl alcohol at pagsasagawa ng spectophotometric analysis, na kumukuha ng absorption spectrum sa hanay na 250-420 nm.

4. Paraan ng amperometric. Ang kakanyahan ng pamamaraan ay upang sukatin ang electric current na nangyayari sa panahon ng oksihenasyon ng –OH na mga grupo ng mga natural na phenolic antioxidant sa ibabaw ng gumaganang elektrod sa isang tiyak na potensyal. Preliminarily, ang isang graphical na pag-asa ng signal ng reference sample (quercetin) sa konsentrasyon nito ay binuo at, gamit ang nagresultang pagkakalibrate, ang nilalaman ng mga phenol sa mga sample sa ilalim ng pag-aaral ay kinakalkula sa mga yunit ng konsentrasyon ng quercetin.

5. Potentiometric titration. Ang ganitong uri ng titration ng aqueous extract (sa partikular, decoctions ng oak bark) ay isinasagawa gamit ang isang solusyon ng potassium permanganate (0.02 M), ang mga resulta ay naitala gamit ang pH meter (pH-410). Ang pagpapasiya ng end point ng titration ay isinagawa ayon sa paraan ng Gran gamit ang computer program na "GRAN v.0.5". Ang potentiometric na uri ng titration ay nagbibigay ng mas tumpak na mga resulta, dahil ang equivalence point ay malinaw na naayos sa kasong ito, na nag-aalis ng bias ng mga resulta dahil sa human factor. Ang potentiometric titration ay lalong mahalaga kumpara sa indicator titration sa pag-aaral ng mga may kulay na solusyon, tulad ng mga aqueous extract na naglalaman ng AD.

6. Coulometric titration. Ang paraan ng dami ng pagpapasiya ng nilalaman ng mga aktibong sangkap sa PM sa mga tuntunin ng tannin sa pamamagitan ng coulometric titration ay ang pinag-aralan na katas mula sa hilaw na materyal ay tumutugon sa coulometric titrant - hypoiodite ions, na nabuo sa panahon ng disproportionation ng electrogenerated iodine sa isang alkaline daluyan. Ang electrogeneration ng mga hypoiodite ions ay isinasagawa mula sa isang 0.1 M na solusyon ng potassium iodide sa isang phosphate buffer solution (pH 9.8) sa isang platinum electrode sa isang pare-parehong kasalukuyang lakas na 5.0 mA.

Kaya, para sa quantitative determination ng DV sa MHM, ang mga ganitong pamamaraan para sa quantitative determination ng DV sa MHM ay ginagamit, tulad ng mga pamamaraan ng titrimetric (kabilang ang titration na may gelatin, potassium permanganate, complexometric titration na may Trilon B, potentiometric at coulometric titration), gravimetric , photoelectrocolorimetric, spectrophotometric, at amperometric na pamamaraan.

Bibliograpiya:

1. Vasilyeva A.P. Ang pag-aaral ng dynamics ng nilalaman ng tannins sa decoction ng oak bark sa panahon ng imbakan // Youth innovation bulletin. - 2012. - V. 1, No. 1. - S. 199-200.
2. State Pharmacopoeia ng USSR, XI edition, No. 1. - M.: Medisina, 1987. - 336 p.
3. Grinkevich N.I., L.N. Safronych Chemical analysis ng mga halamang panggamot. - M., 1983. - 176 p.
4. Ermakov A.I., Arasimovich V.V. Pagpapasiya ng kabuuang nilalaman ng mga tannin. Paraan ng biological research ng mga halaman: Uch. Pakinabang. Leningrad: Agropromizdat. 1987. - 456 p.
5. Islambekov Sh.Yu. Karimdzhanov S.M., Mavlyanov A.K. Mga tannin ng gulay // Chemistry ng natural compounds. - 1990. - Bilang 3. - C. 293-307.
6. Kemertelidze E.P., Yavich P.A., Sarabunovich A.G. Dami ng pagpapasiya ng tannin // Pharmacy. - 1984. Bilang 4. - S. 34-37.
7. Sinabi ni Pat. Russian Federation No. 2436084 Paraan para sa coulometric na pagpapasiya ng nilalaman ng mga tannin sa mga hilaw na materyales ng gulay; dec. 04/06/2010, publ. 12/10/2011. [Electronic na mapagkukunan]. Access mode. URL: http://www.freepatent.ru/patents/2436084 (petsa ng access: 02.12.2012).
8. Ryabinina E.I. Paghahambing ng mga pamamaraan ng chemical-analytical para sa pagtukoy ng mga tannin at aktibidad ng antioxidant ng mga hilaw na materyales ng gulay // Analytics at kontrol. - 2011. - V. 15, No. 2. - S. 202-204.
9. Fedoseeva L.M. Ang pag-aaral ng tannins ng underground at aboveground vegetative organs ng makapal na dahon, lumalaki sa Altai. // Chemistry ng mga hilaw na materyales ng halaman. - 2005. Bilang 3. S. 45-50.

Ang mga may-ari ng patent RU 2439568:

Ang imbensyon ay nauugnay sa larangan ng pharmacology at maaaring magamit upang matukoy ang mga tannin sa mga materyales ng halaman. Ang pamamaraan para sa pagtukoy ng mga tannin sa mga hilaw na materyales ng halaman ay binubuo sa pagkuha ng isang sample ng mga hilaw na materyales na may tubig sa panahon ng kumukulo, paglamig, pagsala, pagsukat ng optical density ng isang aliquot sample sa isang wavelength na 277 nm at pagkalkula ng nilalaman ng kabuuan ng lahat ng tannins ayon sa isang tiyak na formula, pagkatapos ay idagdag sa aliquot sample ng filtrate Ang isang 1% na solusyon ng collagen sa 1% acetic acid ay inalog, sinala, ang optical density ng filtrate ay sinusukat sa isang wavelength na 277 nm at ang nilalaman ng precipitated Ang mga tannin ay kinakalkula gamit ang isang tiyak na formula. Ang pamamaraan ay ginagawang posible upang madagdagan ang katumpakan ng pagtukoy ng nilalaman ng mga tannin sa mga hilaw na materyales ng gulay at upang piliing matukoy ang precipitated at non-precipitated tannins sa mga hilaw na materyales ng gulay.

Ang imbensyon ay nauugnay sa industriya ng parmasyutiko, sa larangan ng pharmacognosy at kimika ng parmasyutiko, at maaaring gamitin upang kontrolin ang kalidad ng mga materyales ng halaman na naglalaman ng mga tannin.

Isang kilalang paraan para sa pagtukoy ng mga tannin sa mga materyales ng halamang gamot (MPR) sa pamamagitan ng coulometry sa mga tuntunin ng tannin (S. G. Abdullina at iba pa. Coulometric na pagpapasiya ng mga tannin sa mga materyales sa halamang gamot. // Pharmacy. No. 4. - 2010. - P. 13 -labing lima).

Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang paggamit ng mga karagdagang kagamitan (coulometer), isang tiyak na titrant (potassium hypoiodide), na sa mga tuntunin ng mga katangian ng oxidizing ay lumalapit sa potassium permanganate at hindi ginagawang posible ang pagkakaiba sa pagitan ng mataas at mababang molekular na timbang na tannin.

Mayroon ding kilala na paraan para sa pagtukoy ng nilalaman ng tannin at gallic acid derivatives sa tsaa sa pamamagitan ng conductometry (Patent No. 2127878. Paraan para sa hiwalay na pagtukoy ng tannin at catechins (sa mga tuntunin ng gallic acid) sa tsaa. M.: 1999).

Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang paggamit ng mga nakakalason na organikong solvent (isobutyl alcohol), pati na rin ang paggamit ng isang reaksyon ng kulay na may Fe (III), ang produkto kung saan ay isang kulay na tambalan na hindi matatag sa kulay sa paglipas ng panahon.

Mayroon ding kilala na paraan para sa dami ng pagtukoy ng mga tannin sa mga tuntunin ng tannin sa mga dahon ng skumpia at sumac sa pamamagitan ng paraan ng complexometry pagkatapos ng pag-ulan ng mga tannin na may mga zinc salts (GOST 4564-79. Leaf of skumpia. Mga Pagtutukoy; GOST 4565- 79. Dahon ng sumac. Mga Pagtutukoy).

Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang tagal ng pagsusuri at ang kahirapan sa pagtukoy ng equivalence point.

Mayroon ding kilala na paraan para sa quantitative determination ng tannins sa pamamagitan ng spectrophotometric method pagkatapos ng reaksyon sa Folin-Ciocalteu reagent sa mga tuntunin ng gallic acid (Mga patnubay para sa mga paraan ng pagkontrol sa kalidad at kaligtasan ng biologically active food supplements. Gabay. R 4.1.1672 -03. - M. - 2004 - p.94-95).

Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang imposibilidad ng hiwalay na pagpapasiya ng mababa at mataas na molekular na timbang na tannin.

Ang pinakamalapit sa iminungkahing pamamaraan ay ang mga tannin ay tinutukoy ng spectrophotometry sa mga tuntunin ng gallic acid (Mga alituntunin para sa mga pamamaraan ng kontrol sa kalidad at kaligtasan ng mga biologically active na pandagdag sa pagkain. Gabay. R 4.1.1672-03. - M. - 2004 g. - P 120).

Ang kawalan ng pamamaraang ito ay ang paulit-ulit na pagbabanto ng sample ng pagsubok, bilang isang resulta kung saan ang konsentrasyon ng mga tannin sa solusyon ay hindi gaanong natukoy. Gayundin sa pamamaraang ito, ang reference na solusyon ay isang buffer solution, na nagpapahirap sa pagsusuri. Bilang karagdagan, ang pamamaraang ito ay hindi ginagawang posible upang hiwalay na matukoy ang nilalaman ng mababang timbang ng molekular at mataas na timbang ng molekular na tannin.

Ang layunin ng pag-imbento ay upang mapabuti ang katumpakan ng pagpapasiya ng mga tannin at ang posibilidad ng magkahiwalay na pagpapasiya ng mga namuo at hindi nabubuong tannin sa mga materyales ng halaman.

Ang problema ay nalutas sa pamamagitan ng pagkuha ng isang sample ng mga hilaw na materyales na may tubig sa panahon ng kumukulo, paglamig, pag-filter, pagsukat ng optical density ng isang aliquot sample sa isang wavelength na 277 nm at pagkalkula ng nilalaman ng kabuuan ng lahat ng tannins ayon sa formula

50 - dami ng prasko, ml,

W - hilaw na materyal na moisture content, %,

1% collagen solution sa 1% acetic acid ay idinagdag sa isang aliquot ng filtrate, inalog, sinala, ang optical density ng filtrate ay sinusukat sa wavelength na 277 nm at ang nilalaman ng precipitated tannins ay kinakalkula ng formula

D 1 - optical density ng solusyon 1,

D 2 - optical density ng solusyon 2,

m nav - ang bigat ng sample ng mga hilaw na materyales, g,

V a - dami ng sample ng aliquot, ml,

250 - kabuuang dami ng pagkuha, ml,

50 - dami ng prasko, ml,

508 - tiyak na index ng pagsipsip ng gallic acid (optical density ng 1% na solusyon ng gallic acid 1 mg / ml),

W - nilalaman ng kahalumigmigan ng hilaw na materyal, %.

Sa praktikal, ang pamamaraan ay isinasagawa bilang mga sumusunod. Humigit-kumulang 2.0 (tumpak na tinimbang) ang mga durog na hilaw na materyales, na sinala sa isang salaan na may diameter na butas na 3 mm, ay inilalagay sa isang 500 ml na prasko, ibuhos ang 250 ML ng tubig na pinainit hanggang kumukulo at pakuluan ng 30 minuto sa ilalim ng reflux na may paminsan-minsang pagpapakilos. Palamig sa temperatura ng silid, palabnawin ng tubig hanggang 250 ML, salain sa pamamagitan ng cotton wool upang ang mga particle ng hilaw na materyal ay hindi makapasok sa may tubig na katas. Ang unang 50 ml ng filtrate ay itatapon.

Ang 1-4 ml ng may tubig na katas ay inilalagay sa isang 50 ml volumetric flask, na nababagay sa marka ng tubig (solusyon 1). Sukatin ang optical density ng solusyon 1 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing.

Ang 30 ML ng may tubig na katas ay inilalagay sa isang sukat na lalagyan na may kapasidad na 50 ML, 2-10 ML ng precipitation reagent ay idinagdag, inalog para sa 30-60 minuto, naayos, sinala. Ang 1-4 ml ng nagresultang filtrate ay inilipat sa isang flask na may kapasidad na 50 ml, na nababagay sa marka ng tubig (solusyon 2). Sukatin ang optical density ng solusyon 2 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing.

Ang imbensyon ay inilalarawan ng mga sumusunod na halimbawa.

Halimbawa 1. Para sa pagsusuri kinuha ang mga hilaw na materyales ng gulay - bark ng oak.

Humigit-kumulang 2.0 (tumpak na tinimbang) ang durog na hilaw na balat ng oak, na sinala sa isang salaan na may diameter ng butas na 3 mm, ay inilalagay sa isang 500 ml na prasko, ibinuhos ng 250 ML ng tubig na pinainit hanggang kumukulo at pinakuluan ng 30 minuto sa ilalim ng reflux na may paminsan-minsang pagpapakilos. . Palamig sa temperatura ng silid, palabnawin ng tubig hanggang 250 ML, salain sa pamamagitan ng cotton wool upang ang mga particle ng hilaw na materyal ay hindi makapasok sa may tubig na katas. Ang unang 50 ML ng filtrate ay itatapon.

Ang 2 ml ng isang may tubig na katas mula sa bark ng oak ay inilalagay sa isang volumetric flask na may kapasidad na 50 ml, na nababagay sa tubig hanggang sa marka (solusyon 1). Sukatin ang optical density ng solusyon 1 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing. Ang D 1 para sa bark ng oak ay 0.595.

Ang 30 ML ng may tubig na katas ay inilalagay sa isang sukat na lalagyan na may kapasidad na 50 ML, 2 ML ng precipitation reagent ay idinagdag, inalog ng 30 minuto, naayos, na-filter. Ang 2 ml ng nakuha na filtrate ay inilipat sa isang flask na may kapasidad na 50 ml, na nababagay sa marka na may tubig (solusyon 2). Sukatin ang optical density ng solusyon 2 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing. Ang D 2 para sa bark ng oak ay 0.276.

Halimbawa 2. Para sa pagsusuri, kinuha ang materyal ng halaman ng serpentine rhizome.

Humigit-kumulang 2.0 (tumpak na tinimbang) ng durog na hilaw na materyal ng serpentine rhizome, na sinala sa isang salaan na may diameter ng butas na 3 mm, ay inilalagay sa isang prasko na may kapasidad na 500 ML, ibuhos ang 250 ML ng tubig na pinainit hanggang sa kumukulo at pakuluan. para sa 30 minuto sa ilalim ng reflux na may paminsan-minsang pagpapakilos. Palamig sa temperatura ng silid, palabnawin ng tubig hanggang 250 ML, salain sa pamamagitan ng cotton wool upang ang mga particle ng hilaw na materyal ay hindi makapasok sa may tubig na katas. Ang unang 50 ml ng filtrate ay itatapon.

Ang 1 ml ng isang may tubig na katas mula sa rhizome ng coil ay inilalagay sa isang volumetric flask na may kapasidad na 50 ml, na nababagay sa tubig hanggang sa marka (solusyon 1). Sukatin ang optical density ng solusyon 1 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing.

Ang 30 ML ng may tubig na katas ay inilalagay sa isang 50 ML volumetric na lalagyan, 7 ML ng precipitation reagent ay idinagdag, inalog para sa 60 minuto, nanirahan, sinala. Ang 1 ml ng nakuha na filtrate ay inilipat sa isang flask na may kapasidad na 50 ml, na nababagay sa marka na may tubig (solusyon 2). Sukatin ang optical density ng solusyon 2 sa wavelength na 277 nm. Ginagamit ang tubig bilang paghahambing.

Ang iminungkahing pamamaraan ay nagpapabuti sa katumpakan ng pagtukoy ng nilalaman ng mga tannin sa mga hilaw na materyales ng gulay at piling tinutukoy ang namuo at hindi na-precipitated na mga tannin sa mga hilaw na materyales ng gulay.

Isang paraan para sa pagtukoy ng mga tannin sa mga hilaw na materyales ng gulay sa mga tuntunin ng gallic acid, na binubuo sa pagkuha ng isang sample ng mga hilaw na materyales na may tubig habang kumukulo, pinapalamig, sinasala, sinusukat ang optical density ng isang aliquot sample sa isang wavelength na 277 nm at pagkalkula ng nilalaman ng kabuuan ng lahat ng tannins ayon sa pormula:

kung saan x a - ang nilalaman ng kabuuan ng mga tannin sa mga tuntunin ng gallic acid,%;




50 - dami ng prasko, ml;
508 - tiyak na index ng pagsipsip ng gallic acid (optical density ng 1% na solusyon ng gallic acid 1 mg / ml);
W - hilaw na materyal na moisture content, %,
isang 1% na solusyon ng collagen sa 1% acetic acid ay idinagdag sa isang aliquot ng filtrate, inalog, na-filter, ang optical density ng filtrate ay sinusukat sa isang wavelength na 277 nm, at ang nilalaman ng precipitated tannins ay kinakalkula gamit ang formula :

kung saan ang X ay ang nilalaman ng precipitated tannins sa mga tuntunin ng gallic acid,%;
D 1 - optical density ng solusyon 1;
D 2 - optical density ng solusyon 2;
m nav - masa ng sample ng mga hilaw na materyales, g;
V a - dami ng aliquot sample, ml;
250 - kabuuang dami ng pagkuha, ml;
50 - dami ng prasko, ml;
508 - tiyak na index ng pagsipsip ng gallic acid (optical density ng isang 1% na solusyon ng gallic acid 1 mg / ml);
W - nilalaman ng kahalumigmigan ng hilaw na materyal, %.

Mga katulad na patent:

Ang imbensyon ay nauugnay sa gamot, lalo na sa psychoneurology, at naglalarawan ng isang paraan para sa paghula sa pagbawi ng mga neurological function sa mga pasyente sa talamak na panahon ng ischemic stroke sa pamamagitan ng pagsasagawa ng mga klinikal at biochemical na pag-aaral ng kabuuang konsentrasyon ng albumin (TAC) sa serum ng dugo sa g /l, kung saan karagdagan sa 5-7 Sa araw ng sakit, ang epektibong konsentrasyon ng albumin (ECA) ay natutukoy, ang albumin binding reserve (ARA) ay kinakalkula, at kung ang tagapagpahiwatig na ito ay mas mababa sa isa, isang negatibong resulta ng Ang pagpapanumbalik ng mga function ng neurological sa mga pasyente sa talamak na panahon ng ischemic stroke ay hinuhulaan.

Ang imbensyon ay nauugnay sa medisina, sa biological na pananaliksik sa oncology, at maaaring gamitin upang matukoy ang pagbuo ng isang malignant na proseso sa mga tumor sa utak pagkatapos ng surgical treatment.

Ang imbensyon ay nauugnay sa gamot, partikular sa oncology, at naglalarawan ng isang paraan para sa pagsusuri ng pagiging epektibo ng neoadjuvant chemotherapy para sa kanser sa pantog sa pamamagitan ng pagsusuri sa isang pasyente, kung saan ang pinakamataas na intensity ng autofluorescence ng tumor tissue sa berdeng rehiyon ng spectrum ay naitala sa yugto. ng pangunahing diagnosis at 1 buwan pagkatapos ng preoperative chemotherapy at may pagtaas sa mga halaga ng pasyente ng maximum na intensity ng autofluorescence ng tumor tissue sa pamamagitan ng 15% mula sa una at higit pa, ang pagiging epektibo ng paggamot ay tinasa bilang isang bahagyang regression ng proseso ng tumor, sa kawalan ng mga pagbabago sa intensity ng autofluorescence ng tumor tissue mula sa mga nauna, ang pagpapapanatag ng proseso ay tinutukoy, na may pagbawas sa intensity ng autofluorescence ng tumor tissue ng 15% at higit pa mula sa paunang tandaan ang pag-unlad ng proseso ng tumor.