קביעה כמותית של טאנינים בקליפת עץ אלון. ניתוח איכותני

טאנינים הם תרכובות פנוליות צמחיות טבעיות מורכבות בעלות מולקולריות גבוהה, המסוגלות לזרז חלבונים ואלקלואידים ולשיזוף עור גולמי של בעלי חיים, ולהפוך אותו למוצר עמיד ועמיד בפני ריקבון - עור.

המונח "טאנינים" הוצג על ידי המדען הצרפתי P. Seguin ב-1796.

טאנינים, או טאנינים, הם מילה נרדפת למונח "טאנינים". הוא מגיע מהכינוי הלטיני-קלטי לאלון - "שיזוף" - והוא נמצא בשימוש נרחב בספרות מדעית.

היכולת של חומרים אלו "לשזף" את החלבונים של עורות בעלי חיים, להפוך אותם אטומים למים ועמידים בפני ריקבון מיקרוביאלי מבוססת על יכולתם לקיים אינטראקציה עם קולגן, מה שמוביל ליצירת מבנים פולימרים יציבים. שיזוף הוא תהליך פיזי וכימי מורכב הקשור ליצירת קשרים מימן, קוולנטיים ואלקטרוולנטיים בין מולקולות קולגן וקבוצות פנוליות של טאנינים.

רק לפנולים רב-גרעיניים המכילים יותר מקבוצת OH אחת יש תכונות שיזוף. מדובר במולקולות פנוליות גדולות במשקל מולקולרי בין 300 ל-500 ולעיתים עד 20,000. פנולים חד-גרעיניים ואינם מכילים מספר רב של קבוצות OH נספגים רק על חלבונים, אך אינם יכולים ליצור קשרים צולבים בינם לבין קבוצות חלבון, חלבון מונומרי "צולב" קבוצות. הם משביתים חלבונים אנזימטיים במידה מסוימת, אך אינם גורמים להצמדות פנול-חלבון בקולגן, מרכיב החלבון העיקרי של העור. לכן, לפנולים בעלי משקל מולקולרי נמוך יש רק טעם עפיצות, הם נקראים גם טאנינים של מזון (תה).

מִיוּן

הניסיון הראשון לסווג טאנינים נעשה על ידי הכימאי השבדי I. Berzelius, אשר חילק את החומרים הללו לשתי קבוצות לפי יכולתם ליצור תרכובות שחורות בעלות גוון ירקרק או כחלחל עם מלחי Fe (III). לאחר מכן, הסיווג הפשוט הזה של טאנינים היווה את הבסיס לסיווג מדעי מדויק יותר שהוצע על ידי ק. פרוידנברג-
הום. הוא החל לחלק טאנינים בהתאם ליכולתם לבצע הידרוליזה תחת פעולת חומצות (או אנזימים) לשתי קבוצות:

1) טאנינים הניתנים להידרוליזה:

גלוטנינים;

אלגיטנינים;

דפסידים, או אסטרים שאינם סוכרים של חומצות קרבוקסיליות;

2) טאנינים שאינם ניתנים להידרוליזה (מעובה), או פלובאפנים, המחולקים לנגזרות:

קטכינים (פלבן-3-אולים);

Leukoanthocyanidins (פלאבן-3,4-דיולים);

הידרוסטילבנים.

טאנינים הניתנים להידרוליזה. גלוטנינים הם אסטרים של הקסוזות (בדרך כלל D-גלוקוז) וחומצה גאלית. ישנן חמש קבוצות OH בגלוקוז, שבזכותן ניתן ליצור אתרים מונו-, די-, טרי-, טטרה-, פנטה-ופוליגלואיל. נציג של קבוצת האתרים הפוליגלואילים הוא הטאנין הסיני, המתקבל מהעלים והצמחים (המררים) הנוצרים עליהם מהסומאק למחצה (Rhus semialata Murr.). נציג של אתרים polygalloyl הוא P-D-glucogallin מבודד משורש ריבס ועלי אקליפטוס.

אלגוטנינים הם אסטרים של D-גלוקוז וחומצות הקסדיפנוליות, הבוליות ואחרות, שנוצרות יחד עם חומצה אלגית. Ellagothannins נמצאים בקליפת פרי רימונים, קליפת אגוז, קליפת אלון, שתילי אלמון. צמחים מכילים בדרך כלל לא חומצה אלגית, אלא hexahydroxydiphenic.

במהלך הידרוליזה חומצית של טאנינים, חומצה זו הופכת לדילקטון - חומצה אלגית.

הדפסידים הם אסטרים של חומצה גאלית עם חומצות כיניות, כלורוגניות, קפאיות, הידרוקסינמיות, וגם פלבנים. אסטרים של חומצה גאלית וקטצ'ינים נמצאים בעלי תה. תיאוגלין בודד מעלי תה ירוק.

תיאוגלין (דפסיד)

טאנינים הניתנים להידרוליזה בעיקר מכילים LRs כמו בורסקאות בורסקאות, סומאק שיזוף, מטפס הרים נחשים, ברגניה עבות עלים, ברנט רפואי, אלמון שחור ו-o. אפור.

טאנינים מעובים בעיקר מכילים אלון מצוי, כנף זקוף, אוכמניות מצויות, דובדבן ציפורים.

טאנינים שאינם ניתנים להידרוליזה. הם אוליגומרים ופולימרים של קטכינים, לוקואנטוציאנידינים והידרוקסטילבנים, כאשר היחידות מקושרות זו לזו על ידי קשרי פחמן-פחמן חזקים בעמדות C2-C6, C2-C8, C4-C8, C5-C2. בנוסף, הם לעולם אינם מכילים שאריות סוכר.

במהלך היווצרות טאנינים מעובים, טבעת הפיראן של קטכין (לויקואנטוציאנידין) נשברת ואטום C2 מחובר בקשר C–C עם אטום C6 של מולקולת קטכין אחרת (לויקואנטוציאנידין). טאנינים מעובה אינם מתפרקים תחת פעולת חומצות; להיפך, הם נוטים להפוך מאוליגומרים לפולימרים ארוכים יותר (פילמור חומצי) עם היווצרות של תרכובות אמורפיות, לרוב בצבע אדום - פלובאפן. היווצרות טאנינים מעובה מתרחשת בצמח חי בתהליך הביוסינתזה ולאחר מותו - במהלך עיבוד טכנולוגי של עץ.

יצירת טאנינים מעובים ממונומרים

תכונות פיזיוכימיות

על פי המאפיינים הפיזיקליים הכימיים, טאנינים הם תרכובות אמורפיות בעלות צבע צהבהב או חום.

לטאנינים טבעיים יש משקל מולקולרי ממוצע של 500-5000, אבל תרכובות בודדות - עד 20,000. כאשר מחומם ל-180-200 מעלות צלזיוס, טאנינים (ללא נמס) נחרכים, משחררים פירוגלול או פירוקאטכול. הם מתמוססים בממסים אורגניים רבים (אצטון, אתנול, אתיל אצטט, פירידין), אך לא בכלורופורם, אתר נפט, בנזן. גם מסיס מאוד במים, רצוי חם. כאשר הם מומסים במים, הם נותנים תמיסות קולואידיות של תגובה חומצית חלשה. הם יוצרים קומפלקסים צבעוניים עם מלחים של מתכות כבדות. מושקע על ידי פתרונות של חומצות אמינו, חלבונים, אלקלואידים. טאנינים רבים הם תרכובות פעילות אופטית. יש להם טעם עפיצות. מתחמצן בקלות באוויר, מקבל צבע אדום-חום, לפעמים חום כהה. נוכחותם של הידרוקסידים ממתכת אלקלי מאיצה מאוד את חמצון הטאנינים. טאנינים הניתנים להידרוליזה מתפרקים לחומצות אורגניות וגלוקוז בפעולת חומצות או אנזימים.

בידוד מ-VRS

טאנינים הם תערובת של פוליפנולים שונים בעלי מבנה מורכב, מאוד לאבילי, ולכן הבידוד והניתוח של רכיבים בודדים של טאנינים קשים מאוד. כדי להשיג את כמות הטאנינים, חומרי הגלם הצמחיים מופקים במים חמים, מקוררים, ולאחר מכן מעבדים את התמצית ברצף:

1) אתר נפט או בנזן (לטיהור מכלורופיל, טרפנואידים, שומנים);

2) דיאתיל אתר, המפיק קטכינים, חומצות הידרוקסינמיות ותרכובות פנוליות אחרות;

3) אתיל אצטט, שלתוכו עוברים לויקונטוציאנידינים, אסטרים של חומצה הידרוקסינמית וכו'.

התמצית המימית הנותרת עם טאנינים ותרכובות פנוליות אחרות ושברים 2 ו-3 (דיאתיל אתר ואתיל אצטט) מופרדת לרכיבים בודדים באמצעות סוגים שונים של כרומטוגרפיה. להשתמש:

כרומטוגרפיה של ספיחה על עמודות של תאית, פוליאמיד (לפעמים, במקום פוליאמיד, משתמשים באבקת גול);

כרומטוגרפיה מחיצה על עמודות סיליקה ג'ל;

כרומטוגרפיה של חילופי יונים;

סינון ג'ל על עמודי Sephadex וכו'.

הזיהוי של טאנינים בודדים מבוסס על השוואת Rf בשיטות כרומטוגרפיות (על הנייר, בשכבה דקה של סורבנט), מחקרים ספקטרליים, תגובות איכותיות וחקר תוצרי מחשוף (לטאנינים הניתנים להידרוליזה).

מיצוי איכותי של טאנינים

ניתן לחלק תגובות איכותיות לקביעת טאנינים לשתי קבוצות:

1) כללי (תצהיר) - כדי לזהות נוכחות של טאנינים;

2) קבוצה (צבע) - לבסס את השתייכותם של טאנינים לקבוצה מסוימת.

קודם כל, לביצוע תגובות איכותיות, מכינים מיצוי מימי של טאנינים מ-VP.

טאנינים מתגלים באמצעות התגובות הבאות:

שילוב עם תמיסת ג'לטין 1% בתמיסת 10% NaCl. מופיעה עכירות, נעלמת כאשר מוסיפים עודפי ג'לטין. התגובה היא ספציפית;

משקעים עם מלחים של אלקלואידים (לדוגמה, כינין סולפט). נוצר משקע לבן;

שילוב עם תמיסה 5% של אשלגן דיכרומט (K2Cr2O7). נוצר משקעים חומים או אובך. אותה תגובה משמשת גם כתגובה היסטוכימית לאיתור לוקליזציה של טאנינים ב-VP;

שילוב עם תמיסה של אצטט עופרת בסיסי: נוצר משקע לבן;

בשילוב עם ונילין (בנוכחות של 70% גופרית או חומצה הידרוכלורית מרוכזת), טאנינים המכילים מונומרים מסוג קטכין מפתחים צבע אדום.

סיווג הטאנינים מתבצע באמצעות התגובות הבאות:

עם תמיסה של 1% של אלום אמוניום ברזל (או מקורות אחרים של Fe3 + יוני): טאנינים הניתנים להידרוליזה נותנים צבע שחור-כחול, ודחוס - שחור-ירוק;

עם תמיסה של 10% של אצטט עופרת בינוני בחומצה אצטית 10%: טאנינים ניתנים להידרוליזה משקעים במשקע צמרירי לבן, בעוד טאנינים מעובה נשארים בתמיסה וניתן לזהותם גם לאחר מכן (למשל, על ידי צבע ירקרק-שחור עם Fe3+);

עם תערובת של תמיסת פורמלדהיד 40% ו-HCl מרוכז: טאנינים מעובה משקעים, בעוד שהניתנים להידרוליזה נשארים בתמיסה מימית (שניתן לזהות על ידי צבע כחלחל-שחור בבדיקה הנוספת עם Fe3+);

עם גבישי NaNO2 ותמיסה של 0.1 M HCl: בנוכחות טאנינים בתמצית של VP, מופיע צבע חום;

עם תמיסה של HCl ותוספת של 1% תמיסה (או גבישים) של ונילין, טאנינים הניתנים להידרוליזה, המורכבים ממונומרים של קטצ'ין, נותנים צבע אדום בוהק בחימום. ניתן לזהות טאנינים הניתנים להידרוליזה, המורכבים ממונומרים לאוקואנתוציאנידין, על ידי חימום התמצית עם תמיסה של HCl: מופיע צבע אדום (עקב היווצרות אנתוציאנידינים, הנותנים צבע אדום בערכי pH חומציים);

כאשר מוסיפים מי ברום ומחממים אותם, הטאנינים המעובים בתמצית מ-VP משקעים החוצה.

בקביעה כרומטוגרפית של טאנינים, מיצוי האתנול מה-VP מוחל על קו ההתחלה של לוח הכרומטוגרפיה Silufol, ממוקם בתא הכרומטוגרפי (עם הממיסים המתאימים המפורטים ב-ND), ולאחר ההפרדה, הצלחת נראית ב אור UV וצוין שלחלק מנגזרות הקטצ'ין יש פלואורסצנטי כחול, המוגבר על ידי עיבוד הכרומטוגרמות עם תמיסה של 1% של ונילין ב-HCl מרוכז. לאחר שמירת הכרומטוגרמות באדי HCl, ולאחר מכן חימום בתנור בטמפרטורה של 105 מעלות צלזיוס למשך 2 דקות, הטאנינים מסוג leucoanthocyanidin הופכים לאנתוציאנידינים ורודים או אדומים-סגולים.

כימות של טאנינים

ניתן לחלק שיטות לקביעה כמותית של טאנינים ב-VP לגרבימטרית, טיטרימטרית ופיזיקוכימית.

שיטות גרבימטריות מבוססות על משקעים כמותיים של טאנינים עם מלחים של מתכות כבדות, ג'לטין או ספיחה עם אבקת הולי. שיטות לזרז טאנינים עם אצטט נחושת או ג'לטין איבדו מחשיבותם.

עם זאת, שיטת המשקל האחיד (BEM) משמשת בתעשיית העור. השיטה מבוססת על יכולתם של טאנינים ליצור קשרים חזקים עם קולגן העור. לשם כך, תמצית המים המתקבלת מה-MPC מחולקת לשני חלקים שווים. חלק אחד הוא אידוי, מיובש ושוקל; השני מטופל באבקת עור (עור), מסוננת. את התסנין מאדים, מיובשים ושוקלים. ההבדל בין השאריות היבשות של החלק הראשון והשני (כלומר, שליטה וניסיון) קובע את תכולת הטאנינים בתמיסה.

השיטה הטיטרימטרית הכלולה ב-SP RB (גיליון 2, עמ' 348), הנקראת שיטת Leventhal-Neubauer, מבוססת על חמצון של קבוצות OH פנוליות עם אשלגן פרמנגנט (MnO4) בנוכחות חומצה אינדיגו סולפונית, שהיא אשלגן. רגולטור ואינדיקטור של התגובה. לאחר חמצון מוחלט של טאנינים, חומצה אינדיגו סולפונית מתחילה להתחמצן לאיסטין, וכתוצאה מכך צבע התמיסה משתנה מכחול לצהוב זהוב.

שיטה טיטרימטרית נוספת לקביעת טאנינים היא שיטת המשקעים של טאנין עם אבץ סולפט, ולאחר מכן טיטרציה קומפלקסומטרית עם Trilon B בנוכחות קסילן תפוז (המשמשת במיוחד לקביעת טאנין בעלים של סומאק טאני ובורסקאי בורסקאי ).

שיטות פיזיקליות וכימיות לקביעת טאנינים:

קולורימטרי - קשור ליכולת של טאנינים לתת תרכובות צבעוניות עם חומצות זרחן-מוליבדיות או זרחניות-טונגסטיות בנוכחות Na2CO3 או עם ריאגנט Folin-Denis (לפנולים). SP RB (כרך 1; 2.8.14) מציע קביעה פוטו-קולורימטרית של טאנינים המופקים מ-VP לתמיסה מימית עם תמיסה של מגיב זרחן-מוליבדן בנוכחות נתרן קרבונט באורך גל של 760 ננומטר;

שיטות כרומטו-ספקטרופוטומטריות ונפלומטריות, המשמשות בעיקר במחקר מדעי.

תפוצה בעולם הצומח, תנאי היווצרות ותפקיד בצמחים

הטאנינים מופצים באופן נרחב בממלכת הצמחים. הם נמצאים בפטריות, אצות, שרכים, זנב סוסים, טחבים, טחבים, ובצמחים גבוהים יותר (אנגיוספרמים וגימנוספרמים). עצי מחט רבים צוברים כמות גדולה למדי של טאנינים. ההצטברות המקסימלית שלהם נמצאה בנציגים בודדים של צמחים דו-פסיגיים, בעוד שבחד-צוגיות זה צוין רק בחלק מהמשפחות. תכולה נמוכה של טאנינים בדגנים. בדו-פסיגים, משפחות מסוימות (לדוגמה, Rosaceae, כוסמת, קטניות, ערבות, סומאק, אשור, אברש) כוללות סוגים ומינים רבים, שבהם תכולת הטאנינים מגיעה ל-20-30% או יותר. התוכן הגבוה ביותר של טאנינים נמצא בתצורות פתולוגיות - מרה (עד 60-80%). צורות עצי עשירות יותר בטאנינים מאשר עשבוניות. הטאנינים מפוזרים בצורה לא אחידה על פני איברים ורקמות של צמחים. הם מצטברים בעיקר בקליפה ובעץ של עצים ושיחים, כמו גם בחלקים התת-קרקעיים של צמחים רב-שנתיים עשבוניים; חלקים ירוקים של צמחים עניים הרבה יותר בטאנינים. בפרט, טאנינים מצטברים:

באיברים תת קרקעיים (Potentilla erectus, Burnet officinalis, Badan עבי עלים);

קור (אלון מצוי);

דשא (סוגי סנט ג'ון וורט);

פירות (אוכמניות מצויות, דובדבן ציפורים, אלמון דביק ו

על אודות. אפור);

עלים (סומאק שיזוף, skumpia עור).

טאנינים מצטברים בוואקווולים, ובמהלך הזדקנות התא הם נספגים על דפנות התא. לרוב בצמחים יש תערובת של טאנינים ניתנים להידרוליזה ומתעבים עם דומיננטיות של תרכובות מקבוצה כזו או אחרת.

תכולת הטאנינים בצמחים משתנה בהתאם לעונת הגידול ולגיל הצמחים. הצטברותם מלווה בו זמנית בעלייה חדה במסה של מערכות השורשים. עם גיל הצמחים, כמות הטאנינים בהם יורדת. עונת הגידול משפיעה לא רק על ההרכב הכמותי, אלא גם על ההרכב האיכותי של הטאנינים.

צמחים הגדלים בשמש צוברים יותר טאנינים מאלה הגדלים בצל (לדוגמה, בצמחים טרופיים הם יוצרים הרבה יותר מאשר בצמחים בקווי רוחב ממוזגים). תכולת הטאנינים בצמחים מושפעת גם מגובה, עונה - במיוחד באזורים עם אקלים עונתי בולט. תכולת הטאנינים תלויה הן בגורמים אקלימיים, בקרקע והן בגורמים צמחיים גנטיים (תורשתיים).

הוכח כי רוב הטאנינים בעלים נמצאים בתאי הפרנכימה המקיפים את הווריד, כלומר הטאנינים נוצרים בעלים ומשם עוברים לתאי הפלואם של הצרורות המוליכים, דרכם הם נישאים לכל אורכם. הצמח. בעלי תכונות קוטל חיידקים (בשל אופיים הפנולי), הם מונעים ריקבון עץ ומהווים חומרים המגנים על הצמחים מפני מזיקים ומחוללי מחלות. טאנינים מעורבים גם בתהליכי חילוף החומרים בצמחים. הם מופקדים כמוצרי חילוף, אשר לאחר מכן ניתן להשתמש בהם במהלך התעוררות באביב וצמיחה של איברים צומחים.

פעולה ויישום ביו-רפואי

טאנינים ו-LR המכילים אותם משמשים בעיקר כחומרים עפיצים, אנטי דלקתיים והמוסטטיים.

תמיסות טאנין נקשרות לחלבוני העור, ויוצרות סרט אטום למים. זהו הבסיס לשימוש הרפואי שלהם בצורה של עפיצות, שכן הסרט הנוצר על הריריות מונע דלקת נוספת, ומוחל על הפצע, הם מקרישים את הדם ולכן פועלים כסוכנים המוסטטיים מקומיים. התכונה של יצירת סרט על הלשון קובעת את הטעם העפיצות האופייני של טאנינים.

בתור עפיצות;

סוכנים המוסטטיים;

תרופות אנטי דלקתיות;

תרופות אנטי מיקרוביאליות;

וגם בתור:

ויטמין P וחומרים אנטי-סקלרוטיים (טאנינים ניתנים להידרוליזה ומעובה);

נוגדי חמצון והיפוקסנטים (טאנינים מעובים);

סוכנים נגד גידולים (טאנינים מעובה);

תרופות נגד הרעלה עם גליקוזידים, אלקלואידים ומלחים של מתכות כבדות (טאנינים).

הוכח כי למינונים גדולים של טאנינים יש השפעה אנטי-גידולית, למינונים בינוניים יש אפקט רגיש לרדיו, ולמינונים קטנים יש השפעה אנטי קרינה.

טאנינים נמצאים בשימוש נרחב גם בתעשיית העור, הקוניאק והמזון.

קציר של VP המכיל טאנינים

הקציר מתבצע במהלך תקופת התוכן המקסימלי של טאנינים. התייבש במהירות בטמפרטורה של 50-60 מעלות צלזיוס, שכן אחסון ממושך של חומרי גלם טריים מוביל לביקוע הידרוליטי של טאנינים ניתנים להידרוליזה ומתעבים בהשפעת אנזימים. יבש VP מאוחסן בשלמותו במקום יבש בצורה ארוזה. במהלך אחסון VP כתוש, קצב החמצון של טאנינים עולה, והצבע משתנה.

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

טאנינים (טאנינים) - אלו הן תערובות מורכבות של פולימרים צמחיים בעלי מולקולרי גבוה של תרכובות פנוליות במשקל מולקולרי של 300 עד 5000 (בערך 500-3000), עם טעם עפיצות, המסוגלים ליצור קשרים חזקים עם חלבונים, להפוך עור גולמי של בעלי חיים לעור שזוף.

המהות של תהליך השיזוף היא יצירת קשרי מימן חזקים בין ההידרוקסילים הפנוליים של טאנינים ומולקולות חלבון קולגן. התוצאה היא מבנה צולב חזק - העור, עמיד בפני חום, לחות, מיקרואורגניזמים, אנזימים, כלומר. לא רקוב.

תרכובות פוליפנוליות בעלות משקל מולקולרי נמוך יותר (פחות מ-300) נספגות רק על חלבונים, אך אינן מסוגלות ליצור קומפלקסים יציבים, ואינן משמשות כחומרי שיזוף. גם פוליפנולים בעלי משקל מולקולרי גבוה (עם משקל מולקולרי של יותר מ-5000) אינם חומרי שיזוף, מכיוון שהמולקולות שלהם גדולות מדי ואינן חודרות בין סיני קולגן.

לפיכך, ההבדל העיקרי בין טאנינים לתרכובות פוליפנוליות אחרות הוא היכולת ליצור קשרי מימן חזקים עם חלבונים.

המונח "טאנינים" שימש לראשונה על ידי המדען הצרפתי סגוין בשנת 1796 כדי להתייחס לחומרים המצויים בתמציות של צמחים מסוימים שיכולים לבצע את תהליך השיזוף. שם אחר לטאנינים - "טאנינים" מגיע מהצורה הלטינית של השם הקלטי לאלון - " לְהִשְׁתַזֵף", שקליפתו שימשה זה מכבר לעיבוד עור.

המחקר המדעי הראשון בתחום הכימיה של הטאנינים מתחיל במחצית השנייה של המאה ה-18. הם נגרמו על ידי הצרכים המעשיים של תעשיית העור. העבודה הראשונה שפורסמה היא עבודתו של Gledich (1754) "על השימוש באוכמניות כחומר גלם לייצור טאנינים". המונוגרפיה הראשונה הייתה המונוגרפיה של דקר, שפורסמה ב-1913, אשר סיכמה את כל החומר שהצטבר על טאנינים. החיפוש, הבידוד וביסוס מבנה הטאנינים בוצעו על ידי מדעני בית ל.פ. אילין, א.ל. קורסנוב, מ.נ. זפרומטוב, פ.מ. Flavitsky, G. Povarnin, A.I. אופרין ואחרים; מדענים זרים G. Procter, K. Freidenberg, E. Fischer, P. Karrer ואחרים.

תפוצה בממלכת הצמחים

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

טאנינים מופצים באופן נרחב בחיות הבר. הם מצויים בעיקר בצמחים, אך מצויים גם באצות, פטריות וחזזיות. הטאנינים הנפוצים ביותר בקרב נציגי דו-פסיגים, שבהם הם מצטברים בכמויות מקסימליות. חד-פסיגיים בדרך כלל אינם מכילים טאנינים, טאנינים נמצאים בשרכים, ובזנבות, טחבים, טחבים הם כמעט נעדרים, או שהם בכמות מינימלית.

המשפחות עם התכולה הגבוהה ביותר של טאנינים הן:

• sumac - Anacardiaceae (סומאק שיזוף, skumpia עור);
• Rosaceae - Rosaceae (brunt officinalis, cinquefoil זקוף);
• אשור - Fagaceae (אלון רגיל (ד. pedunculate) ו-d. סלעי);
• כוסמת - Polygonaceae (סרפנטין גדול ו-z. בשר-אדום);
• אברש - Ericaceae (דובי, לינגון);
• ליבנה - Betulaceae (אלמון אפור ו-o. sticky) וכו'.

תפקיד לחיי הצמח

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

התפקיד הביולוגי של חיי הצומח לא הובהר במלואו. ישנן מספר השערות:

1. טאנינים - תוצרי פסולת של פעילות חיונית של אורגניזמים צמחיים;
2. טאנינים הם צורה אחת של חומרי הזנה רזרבה. זה מצוין על ידי לוקליזציה שלהם באיברים התת-קרקעיים ובקליפת המוח;
3. טאנינים מבצעים תפקיד מגן, tk. כאשר צמחים נפגעים, הם יוצרים קומפלקסים עם חלבונים היוצרים סרט מגן המונע חדירת אורגניזמים פיטו-פתוגניים. יש להם תכונות קוטל חיידקים ופטריות;
4. טאנינים מעורבים בתהליכי חיזור, הם נושאי חמצן בצמחים.

ביוסינתזה, לוקליזציה והצטברות טאנינים בצמחים

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

הביוסינתזה של טאנינים הניתנים להידרוליזה ממשיכה לאורך מסלול השיקימט, טאנינים מעובים נוצרים לאורך נתיב מעורב (שיקימט ואצטט-מלונאט).

טאנינים נמצאים במצב מומס ב-vacuoles של תאים צמחיים; במהלך הזדקנות התא, הם נספגים על דפנות התא. הם ממוקמים בתאי האפידרמיס, תאים פריאטליים המקיפים את צרורות כלי הדם (ורידי העלים), בתאי הפרנכימליים של קרני הליבה, הקליפה, העץ והפלואם.

טאנינים מצטברים בכמויות גדולות בעיקר באיברים התת-קרקעיים של צמחים עשבוניים רב-שנתיים (קני שורש של ברגניה, סרפנטין, כנף, קני שורש ושורשי ברנט), בקליפת עץ ובעץ של עצים ושיחים (קליפת אלון, ויבורנום), בפירות ( פירות של דובדבן ציפורים, אוכמניות, שתילי אלמון), לעתים רחוקות יותר בעלים (עלים של skumpia, סומאק, תה).

הצטברות הטאנינים תלויה בגורמים גנטיים, בתנאי אקלים וסביבתיים. בצמחים עשבוניים, ככלל, הכמות המינימלית של טאנינים מצוינת באביב בתקופת צמיחת היורה, ואז התוכן שלהם גדל ומגיע למקסימום בתקופת הניצנים והפריחה (לדוגמה, קני שורש Potentilla). עד סוף עונת הגידול, כמות הטאנינים יורדת בהדרגה. בברנט מצטבר המקסימום של טאנינים בשלב התפתחות עלי הרוזטה, בשלב הפריחה תכולתם פוחתת ובסתיו היא עולה שוב. שלב הצמחייה משפיע לא רק על הכמות, אלא גם על ההרכב האיכותי של הטאנינים. באביב, בתקופת זרימת המוהל בקליפת העצים והשיחים ובשלב הצמיחה המחודשת של ניצנים בצמחים עשבוניים, מצטברים בעיקר טאנינים הניתנים להידרוליזה, ובסתיו, בשלב מוות הצמח, טאנינים מעובים ותוצרי הפילמור שלהם. , פלובאפנים (אדומים).

התנאים הנוחים ביותר להצטברות טאנינים הם התנאים של אקלים ממוזג (אזור יער וחגורה אלפינית בהרים גבוהים).

התכולה הגבוהה ביותר של טאנינים צוינה בצמחים הגדלים על קרקעות גיר צפופות, על קרקעות כרנוזם רופפות וקרקעות חוליות תכולתם נמוכה יותר. קרקעות עשירות בזרחן תורמות להצטברות טאנינים, קרקעות עשירות בחנקן מפחיתות את תכולת הטאנינים.

קציר, ייבוש ואחסון של חומרי גלם המכילים טאנינים

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

קצירת חומרי צמחי מרפא המכילים טאנינים מתבצעת על פי כללים כלליים. עם זאת, ישנם כמה חריגים לכלל:

• קני שורש Potentilla נקצרים בקיץ, במהלך הפריחה, כי. תכולת הטאנינים המעובה בהם די גדולה, והם גם לוקחים בחשבון את העובדה שאחרי פריחת הצמח וקמילת החלק האווירי שלו, בסתיו, כמעט בלתי אפשרי לזהות כנף בעשב הביצות. מקומות;
• קני שורש של הסליל נחפרים מיד לאחר פריחת הצמח;
• יש לחפור קני שורש ושורשי צריבה במהלך תקופת הפרי, כאשר תפרחות אדומות כהות נראות בקלות בעשב;
• שתילי אלמון נקצרים בסוף הסתיו או החורף, כאשר העלים אינם מפריעים.

יבש את חומרי הגלם שנאספו במייבשים בטמפרטורה שאינה עולה על 60 ºС (40-60 ºС). עם ייבוש טבעי, חומרי הגלם מונחים בשכבה דקה באוויר הפתוח או בחדר מאוורר סגור.

חומרי גלם ניתן לייבש בשמש, כי. טאנינים אינם מתפרקים בהשפעת קרניים אולטרה סגולות.

חומרי גלם לאחסן המכילים טאנינים צריכים להיות בהתאם לכללים הכלליים. פירות דובדבן ואוכמניות מאוחסנים בנפרד, יחד עם פירות אחרים. שתילי סמסה מאוחסנים יחד עם כל סוגי חומרי הגלם, כי. שתילים הם עציים וכפי שהוכיח הניסיון, אינם נפגעים ממזיקי אסם.

תכונות פיזיקליות וכימיות

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

טאנינים מבודדים מחומרי גלם צמחיים בצורה של תערובת של פולימרים והם חומרים אמורפיים בעלי צבע צהוב או צהוב-חום, חסר ריח, טעם עפיצות, היגרוסקופי מאוד. הם מתמוססים היטב במים (במיוחד במים חמים) עם היווצרות תמיסות קולואידיות; הם גם מסיסים באתיל ומתיל אלכוהול, אצטון, אתיל אצטט, בותנול, פירידין. בלתי מסיס בכלורופורם, בנזן, דיאתיל אתר וממיסים לא קוטביים אחרים, פעילים אופטית.

מתחמצן בקלות באוויר. מסוגל ליצור קשרים בין-מולקולריים חזקים עם חלבונים ופולימרים אחרים (חומרים פקטיים, תאית וכו'). תחת פעולתם של אנזימים וחומצות, טאנינים הניתנים להידרוליזה מתפרקים לחלקים המרכיבים שלהם, טאנינים מעובה מתפלמרים.

מתמיסות מימיות המושקעות על ידי ג'לטין, אלקלואידים, אצטט עופרת, אשלגן דיכרומט, גליקוזידים קרדיוטוניים.

כחומרים בעלי אופי פנולי, טאנינים מתחמצנים בקלות על ידי אשלגן פרמנגנט בסביבה חומצית וחומרי חמצון אחרים, יוצרים קומפלקסים צבעוניים עם מלחים של מתכות כבדות, ברזל ברזל ומי ברום.

מסוגל להיספג בקלות על אבקת עור, תאית, צמר גפן.

ניתוח חומרי גלם המכילים טאנינים

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

כדי להשיג את כמות הטאנינים, חומרי גלם צמחיים מופקים במים חמים ביחס של 1:30 או 1:10.

ניתוח איכותני

נעשה שימוש בתגובות איכותיות (משקעים וצבע) ובבדיקה כרומטוגרפית.

אני. תגובות משקעים כלליות- לזיהוי טאנינים בחומרי גלם:

1. תגובה ספציפית היא תגובת משקעי הג'לטין, תוך שימוש בתמיסת ג'לטין 1% בתמיסת נתרן כלורי 10%. מופיעים משקעים או עכירות גושיים, נעלמים כאשר מוסיפים עודפי ג'לטין. תגובה שלילית עם ג'לטין מצביעה על היעדר טאנינים.
2. תגובה עם מלחים של אלקלואידים, באמצעות תמיסה 1% של כינין כלוריד. משקע אמורפי מופיע עקב יצירת קשרי מימן בין קבוצות ההידרוקסיל של טאנינים ואטומי החנקן של האלקלואיד.

תגובות אלו נותנות את אותו האפקט ללא קשר לקבוצת הטאנינים. מספר תגובות מאפשרות לקבוע האם טאנינים שייכים לקבוצה מסוימת.

II. קְבוּצָה תגובות איכותיותעבור טאנינים:

№	מֵגִיב	טאנינים הניתנים להידרוליזה	טאנינים מעובים
1	חומצה גופרתית מדוללת	הִידרוֹלִיזָה	פלובאפן אדום-חום (קראסני)
2	מי ברום (5 גרם ברום בליטר מים)	———	משקע כתום או צהוב
3	תמיסה של 1% של אלום אמוניום ברזל (לא משתמשים בתחמוצת ברזל כלוריד, כי לתמיסה יש תגובה חומצית)	צבע שחור-כחול או משקעים	צבע שחור-ירוק או משקעים
4	תמיסה של 10% של אצטט בינוני עופרת (הוסף בו-זמנית תמיסה של 10% של חומצה אצטית)	משקע לבן, בלתי מסיס בחומצה אצטית (המשקע מסונן ובתסנין נקבעת תכולת הטאנינים המעובה, עם תמיסה 1% של אלום ברזל אמוניום - צבע שחור-ירוק)	משקע לבן, מסיס בחומצה אצטית
5	מבחן Stiasni (תמיסת פורמלדהיד 40% עם חומצה הידרוכלורית מרוכזת)	———	משקע אדום לבנים (המשקע מסונן ותכולת הטאנינים הניתנים להידרוליזה נקבעת בתסנין, בתווך ניטרלי עם תמיסה 1% של אלום ברזל אמוניום - צבע שחור-כחול)
6	תמיסה 1% של ונילין בחומצה הידרוכלורית מרוכזת	———	מכתים כתום-אדום (קטצ'ינים)

התגובה עם תמיסת אלכוהול 1% של אלום אמוניום ברזל כלולה בכל המסמכים הרגולטוריים לחומרי גלם רפואיים כתגובה לקביעת האותנטיות שלהם. התגובה מומלצת על ידי GF XI ומתבצעת הן עם מרתח של חומרי גלם (קליפת עץ אלון, קני שורש סרפנטין, שתילי אלמון, אוכמניות), והן לפתיחת טאנינים ישירות בחומרי גלם יבשים (קליפת אלון, קליפת ויבורנום, קני שורש ברגניה) .

כימות

קיימות כ-100 שיטות שונות לקביעה כמותית של טאנינים, אותן ניתן לחלק לקבוצות העיקריות הבאות.

1. גרבימטרי, או על ידי משקלשיטות- מבוסס על משקעים כמותיים של טאנינים על ידי ג'לטין, יוני מתכות כבדות או ספיחה על ידי אבקת עור (עירומה).

למטרות טכניות, השיטה הגרבימטרית עם שימוש באבקת הולה - שיטת האחיד המשוקלל (BEM) סטנדרטית בכל העולם.

התמצית המימית של הטאנינים מחולקת לשני חלקים שווים. חלק אחד של התמצית מאודה ומייבש עד למשקל קבוע. חלק נוסף של התמצית מטופל באבקת עור ומסנן. הטאנינים נספגים על אבקת העור ונשארים על הפילטר. התסנין והשטיפות מאודות ומייבשים למשקל קבוע. תכולת הטאנינים מחושבת מההבדל במסה של שאריות יבשות.

השיטה לא מדויקת, כי אבקת עור סופחת גם תרכובות פנוליות במשקל מולקולרי נמוך, וזה די מייגע ויקר.

1. טיטרימטרישיטות. אלו כוללים:

א) ג'לטינישיטה- מבוסס על יכולתם של טאנינים ליצור קומפלקסים בלתי מסיסים עם חלבונים. תמציות מימיות מחומרי גלם עוברות טיטרציה עם תמיסה של 1% של ג'לטין; בנקודת השקילות, מתחמי הג'לטין טנאט מתמוססים בעודף מהריאגנט. הטיטר נקבע על ידי טאנין טהור. נקודת השקילות נקבעת על ידי בחירת הנפח הקטן ביותר של תמיסת טיטרציה הגורמת למשקעים מלאים של טאנינים.

השיטה היא המדויקת ביותר, כי מאפשר לך לקבוע את כמות הטאנינים האמיתיים. חסרונות: אורך ההגדרה והקושי לקבוע את נקודת השקילות.

ב) פרמנגננומטרישיטה(שיטת לבנטל-נויבאואר ששונתה על ידי A.L. Kursanov). שיטה פרמקופיאלית זו מבוססת על יכולת חמצון קלה של טאנינים עם פרמנגנט אשלגן במדיום חומצי בנוכחות אינדיקטור וזרז של חומצה אינדיגו סולפונית, שבנקודת השקילות הופכת לאיסטין, וצבע התמיסה משתנה מכחול. לצהוב זהוב.

תכונות הקביעה המאפשרות טיטרציה רק ​​של מקרומולקולות של טאנינים: טיטרציה מתבצעת בתמיסות מדוללות מאוד (המיצוי מדולל 20 פעמים) בטמפרטורת החדר במדיום חומצי, אשלגן פרמנגנט מתווסף לאט, טיפה אחר טיפה, תוך ערבוב נמרץ.

השיטה חסכונית, מהירה, קלה לביצוע, אבל לא מספיק מדויקת, כי אשלגן פרמנגנט מחמצן חלקית תרכובות פנוליות במשקל מולקולרי נמוך.

1. פיזיקו-כימישיטות.

א) פוטו-אלקטרו-קולורימטרי השיטות מבוססות על היכולת של טאנינים ליצור תרכובות צבעוניות עם מלחי ברזל, חומצה זרחתית-טונגסטית, ריאגנט Folin-Denis וכו'.

ב) כרומטוספקטרופוטומטריו נפלומטרישיטותמשמש במחקר מדעי.

דרכי שימוש בחומרי גלם, יישומים רפואיים, תכשירים

שדות טקסט

שדות טקסט

arrow_upward

בנוסף למקורות הייצור התעשייתי של טאנין רפואי, כל החפצים הנבדקים כלולים בצו מס' 79 מיום 18.3.97, המאפשר מכירה ללא מרשם של חומרי גלם מבתי מרקחת.

במתכונים מזדמנים ובבית משתמשים בחומרי גלם בצורת מרתחים וכחלק מאגרות.

תכשירים צמחיים אינם מיוצרים (תמציות נוזליות של קני שורש ברגניה וקני שורש ושורשים חריפים אינם נכללים כיום במרשם המדינה).

טאנין ותכשירים משולבים "Tanalbin" (קומפלקס של טאנין עם חלבון קזאין) ו"Tansal" (קומפלקס של טנלבין עם פניל ​​סליצילט) מתקבלים מעלי טאנין שיזוף, סומאק, סיני וטורקיה. משתילים של אלמון הושגה התרופה "אלטן".

נעשה שימוש בחומרי גלם ותכשירים המכילים טאניניםכלפי חוץ ובפנים

• עפיצות,
• אנטי דלקתי,
• קוטל חיידקים ו
• חומרים המוסטטיים.

מבוסס פעולהעל יכולתם של טאנינים להיקשר לחלבונים עם היווצרות אלבומינאטים צפופים. במגע עם קרום רירי דלקתי או משטח פצע, נוצר סרט משטח דק המגן על קצות עצבים רגישים מפני גירוי. יש איטום של ממברנות התא, היצרות של כלי דם, שחרור של exudates פוחת, מה שמוביל לירידה בתהליך הדלקתי.

בשל יכולתם של טאנינים ליצור משקעים עם אלקלואידים, גליקוזידים קרדיוטוניים, מלחים של מתכות כבדות, משמש כתרופות נגדבמקרה של הרעלה עם חומרים אלה.

כְּלַפֵּי חוּץ

• עם מחלות של חלל הפה, הלוע, הגרון (סטומטיטיס, דלקת חניכיים, דלקת הלוע, דלקת שקדים), כמו גם
• עבור כוויות, decoctions של קליפת אלון, קני שורש של bergenia, סרפנטין, cinquefoil, קני שורש ושורשים של ברנט, טאנין, "Altan" משמשים.

בְּתוֹך

• למחלות מערכת העיכול (קוליטיס, אנטרוקוליטיס, שלשולים, דיזנטריה), נעשה שימוש בתכשירי טאנינים (Tanalbin, Tansal), Altan, מרתחות של אוכמניות, דובדבן ציפורים (במיוחד בטיפול בילדים), שתילי אלמון, קני שורש ברגניה, סרפנטין, cinquefoil ו-rhizomes, rhizomes שורשי ברנט.

כמו המוסטטיכְּסָפִים

• עבור דימום רחם, קיבה וטחורים, מרתחים של קליפת ויבורנום, קני שורש ושורשי צריבה, קני שורש של cinquefoil, שתילי אלמון משמשים.

מרתחים מוכנים ביחס של 1:5 או 1:10.

אין להשתמש במרתחים מרוכזים מאוד , מכיוון שבמקרה זה סרט האלבומינאט מתייבש, מופיעים סדקים ומתרחש תהליך דלקתי משני.

הוקם באופן ניסיוני פעילות אנטי גידוליתטאניניםתמצית מימית של פרי הקרפ של פרי הרימון (ללימפוסרקומה, סרקומה ומחלות אחרות) והתכשיר "הנרול", המתקבל על בסיס ellagitannins ופוליסכרידים של תפרחת עשב אש אנגסטיפוליה (לסרטן הקיבה והריאות) ).

פלט אוסף:

שיטות לקביעה כמותית של טאני בחומרי גלם צמחיים רפואיים

מיכאילובה אלנה ולדימירובנה

cand. ביול. Sci., Assistant, VSMA על שם V.I. נ.נ. ברדנקו,

וורונז'

אימייל: מילנוק[מוגן באימייל] מְשׁוֹטֵט.he

ואסילייבה אנה פטרובנה

מרטינובה דריה מיכאילובנה

תלמיד VGMA אותם. נ.נ. בורדנקו, וורונז'

אימייל: darjamartynova[מוגן באימייל] מְשׁוֹטֵט.he

טאנינים (DV) הם קבוצה נפוצה מאוד של חומרים פעילים ביולוגית (BAS) של צמחים, בעלי תכונות פרמקולוגיות שונות, וזו הסיבה לשימוש הנרחב שלהם ברפואה. לכן, הבעיה של קביעת האיכות הטובה של תרופות וחומרי גלם מצמחי מרפא (MPR) המכילים קבוצה זו של חומרים פעילים ביולוגית רלוונטית מאוד. אחת השיטות העיקריות לביסוס האיכות הטובה של MPS היא ניתוח פיטוכימי כמותי. נכון לעכשיו, ישנן מספר שיטות המאפשרות ניתוח מסוג זה של MPC המכיל DV, אך נתוני הספרות מפוזרים. בהקשר לאמור לעיל, יש צורך לבצע שיטתיות של שיטות הניתוח הכמותי של DVvLRS.

השיטות הקלאסיות לקביעת תכולת החומרים הפעילים הן שיטות גרבימטריות (משקל) ושיטות טיטרימטריות. השיטה הגרבימטרית מבוססת על תכונתם של חומרים פעילים להיגרר על ידי ג'לטין, יוני מתכות כבדות ואבקת עור (עירומה). השלב הראשון הוא קביעת המסה של שאריות יבשות בתמצית המימית מה-MPC. לאחר מכן מיובשים את התמצית למשקל קבוע. השלב הבא הוא שחרור התמצית מהחומר הפעיל בעיבוד באבקת הולי. במקרה זה, משקע משקע, אשר מוסר לאחר מכן על ידי סינון, שוב נקבעת כמות השאריות היבשות וכמות ה-AI נקבעת על פי ההבדל במסות המצוינות של השאריות היבשות.

שיטות טיטרימטריות כוללות:

1. טיטרציה עם תמיסת ג'לטין. שיטה זו מבוססת גם על תכונתם של חומרים פעילים להיות משקעים על ידי חלבונים (ג'לטין). תמציות מימיות מחומרי גלם עוברות טיטרציה בתמיסת ג'לטין 1%. הטיטר נקבע על ידי טאנין טהור. נקודת השקילות נקבעת על ידי בחירת הנפח הקטן ביותר של טיטרנט שגורם למשקעים מלאים של חומרים פעילים. שיטה זו היא מאוד ספציפית ומאפשרת לך לבסס את התוכן של DV אמיתי, אך ארוך בביצוע, והקמת נקודת השקילות תלויה בגורם האנושי.

2. טיטרציה פרמנגננטומטרית. שיטה זו מוצגת ב- General Pharmacopoeia Monograph ומבוססת על יכולת חמצון קלה של DV על ידי אשלגן פרמנגנט במדיום חומצי בנוכחות חומצה אינדיגו סולפונית. בנקודת הסיום של הטיטרציה, צבע התמיסה משתנה מכחול לצהוב זהוב. למרות החיסכון, המהירות, קלות היישום, השיטה אינה מדויקת דיה, מה שקשור לקושי לקבוע את נקודת השקילות, כמו גם להערכת יתר של תוצאות המדידה עקב יכולת החמצון החזקה של הטיטרנט.

3. טיטרציה קומפלקסומטרית עם Trilon B עם משקעים ראשוניים של DV אבץ סולפט. השיטה משמשת לקביעה כמותית של טאנין בחומרי הגלם של סומאק שיזוף וסומאק שיזוף. קסילנול כתום משמש כאינדיקטור.

שיטות פיזיקוכימיות לקביעה כמותית של DV בחומרי צמחי מרפא כוללים את השיטה הפוטואלקטרו-קולורימטרית, הספקטרופוטומטרית, האמפומטרית ואת שיטת הטיטרציה הפוטנציומטרית והקולומטרית.

1. שיטה פוטו-אלקטרוקולורימטרית. זה מבוסס על היכולת של DI ליצור תרכובות כימיות צבעוניות עם מלחי ברזל (III), חומצה פוספוטונגסטית, ריאגנט Folin-Denis וחומרים אחרים. אחד מהריאגנטים מתווסף לתמצית הנחקרת מ-MPC, לאחר הופעת צבע יציב, הצפיפות האופטית נמדדת בפוטו-קולורימטר. אחוז ה-AI נקבע מעקומת כיול הבנויה באמצעות סדרה של תמיסות טאנין בריכוז ידוע.

2. קביעה ספקטרופוטומטרית. לאחר קבלת תמצית מימית, חלק ממנה עובר צנטריפוגה למשך 5 דקות ב-3000 סל"ד. לצנטריפוגה מוסיפים תמיסה מימית 2% של אמוניום מוליבדאט, ולאחר מכן מדללים אותה במים ומשאירים אותה למשך 15 דקות. עוצמת הצבע המתקבל נמדדת בספקטרופוטומטר באורך גל של 420 ננומטר בקובטה בעובי שכבה של 10 מ"מ. חישוב הטנידים מתבצע על פי מדגם סטנדרטי. GSO של טאנין משמש כמדגם סטנדרטי.

3. קביעה כרומטוגרפית. לזיהוי טאנינים מעובה, מתקבלים תמציות אלכוהול (95% אתילי אלכוהול) ומים ומבצעים כרומטוגרפיה של נייר ושכבות דקה. GSO של קטצ'ין משמש כמדגם סטנדרטי. ההפרדה מתבצעת במערכות ממסים בוטנול - חומצה אצטית - מים (BUW) (40: 12: 28), (4: 1: 2), חומצה אצטית 5% על נייר Filtrak וצלחות Silufol. זיהוי אזורים של חומרים על הכרומטוגרמה מתבצע באור UV, ולאחר מכן טיפול בתמיסה של 1% של ברזל אמוניום אלום או בתמיסה של 1% של ונילין, חומצה הידרוכלורית מרוכזת. בעתיד, ניתן לבצע ניתוח כמותי על ידי אלוציה מצלחת DV עם אלכוהול אתילי וביצוע אנליזה ספקטופוטומטרית, תוך לקיחה של ספקטרום הספיגה בטווח של 250-420 ננומטר.

4. שיטה אמפרומטרית. מהות השיטה היא למדוד את הזרם החשמלי המתרחש במהלך חמצון של קבוצות –OH של נוגדי חמצון פנוליים טבעיים על פני האלקטרודה הפועלת בפוטנציאל מסוים. באופן ראשוני, נבנית תלות גרפית של האות של דגימת הייחוס (קוורצטין) בריכוז שלה, ובאמצעות הכיול המתקבל, תכולת הפנולים בדגימות הנבדקות מחושבת ביחידות של ריכוז קוורצטין.

5. טיטרציה פוטנציומטרית. סוג זה של טיטרציה של תמצית מימית (במיוחד מרתחים של קליפת אלון) בוצע עם תמיסה של פרמנגנט אשלגן (0.02 M), התוצאות נרשמו באמצעות מד pH (pH-410). קביעת נקודת הסיום של הטיטרציה בוצעה על פי שיטת Gran באמצעות תוכנת המחשב "GRAN v.0.5". סוג הטיטרציה הפוטנציומטרי נותן תוצאות מדויקות יותר, שכן נקודת השקילות קבועה בבירור במקרה זה, מה שמבטל את הטיית התוצאות הנובעת מהגורם האנושי. טיטרציה פוטנציומטרית חשובה במיוחד בהשוואה לטיטרציה מחוונים בחקר תמיסות צבעוניות, כגון תמציות מימיות המכילות AD.

6. טיטרציה קולומטרית. שיטת הקביעה הכמותית של תכולת החומרים הפעילים ב-PM במונחים של טאנין על ידי טיטרציה קולומטרית היא שהתמצית הנחקרת מחומר הגלם מגיבה עם הטיטרנט הקולומטרי - יוני היפויודיטים, הנוצרים במהלך חוסר פרופורציה של יוד שנוצר אלקטרו בבסיס אלקליין. בינוני. יצירת אלקטרו של יוני היפויודיט מתבצעת מתמיסת 0.1 M של אשלגן יודיד בתמיסת חיץ פוספט (pH 9.8) על אלקטרודת פלטינה בחוזק זרם קבוע של 5.0 mA.

לפיכך, לקביעה כמותית של DV ב-MHM, נעשה שימוש בשיטות כאלה לקביעה כמותית של DV ב-MHM, כגון שיטות טיטרימטריות (כולל טיטרציה עם ג'לטין, אשלגן פרמנגנט, טיטרציה קומפלקסומטרית עם Trilon B, טיטרציה פוטנציומטרית וקולומטרית), גרבימטרית. , שיטות פוטו-אלקטרו-קולורימטריות, ספקטרופוטומטריות ואמפומטריות.

בִּיבּלִיוֹגְרָפִיָה:

1. Vasilyeva A.P. חקר הדינמיקה של תכולת הטאנינים במרתח קליפת עץ אלון במהלך האחסון // עלון חדשנות לנוער. - 2012. - V. 1, No. 1. - S. 199-200.
2. פרמקופיה המדינה של ברית המועצות, מהדורה XI, מס'. 1. - מ.: רפואה, 1987. - 336 עמ'.
3. גרינקביץ' נ.י., ל.נ. Safronych ניתוח כימי של צמחי מרפא. - מ., 1983. - 176 עמ'.
4. Ermakov A.I., Arasimovich V.V. קביעת תכולת הטאנינים הכוללת. שיטות מחקר ביולוגי של צמחים: Uch. תועלת. לנינגרד: Agropromizdat. 1987. - 456 עמ'.
5. איסלמבקוב ש.יו. Karimdzhanov S.M., Mavlyanov A.K. טאנינים צמחיים // כימיה של תרכובות טבעיות. - 1990. - מס' 3. - סי' 293-307.
6. Kemertelidze E.P., Yavich P.A., Sarabunovich A.G. קביעה כמותית של טאנין // בית מרקחת. - 1984. מס' 4. - ש' 34-37.
7. טְפִיחָה. הפדרציה הרוסית מס' 2436084 שיטה לקביעה קולומטרית של תכולת הטאנינים בחומרי גלם צמחיים; דצמבר 04/06/2010, פרסום. 12/10/2011. [משאב אלקטרוני]. מצב גישה. כתובת אתר: http://www.freepatent.ru/patents/2436084 (תאריך גישה: 02.12.2012).
8. Ryabinina E.I. השוואה בין שיטות כימיות-אנליטיות לקביעת טאנינים ופעילות נוגדת חמצון של חומרי גלם צמחיים // ניתוח ובקרה. - 2011. - V. 15, No. 2. - S. 202-204.
9. Fedoseeva L.M. חקר הטאנינים של איברי צומח תת-קרקעיים ומעל-קרקעיים של בדאן עבי-עלים, הגדלים באלטאי. // כימיה של חומרי גלם צמחיים. - 2005. מס' 3. ש' 45-50.

הבעלים של הפטנט RU 2439568:

ההמצאה מתייחסת לתחום הפרמקולוגיה וניתן להשתמש בה לקביעת טאנינים בחומרים צמחיים. השיטה לקביעת טאנינים בחומרי גלם צמחיים מורכבת מהפקת דגימת חומרי גלם עם מים במהלך הרתחה, קירור, סינון, מדידת צפיפות אופטית של דגימת aliquot באורך גל של 277 ננומטר וחישוב תכולת סכום כל הטאנינים. לפי נוסחה מסוימת, לאחר מכן מוסיפים לדגימה של התסנין תמיסה של 1% של קולגן ב-1% חומצה אצטית מנערת, מסוננת, הצפיפות האופטית של התסנין נמדדת באורך גל של 277 ננומטר ותכולת המשקעים. טאנינים מחושב באמצעות נוסחה מסוימת. השיטה מאפשרת להגביר את הדיוק בקביעת תכולת הטאנינים בחומרי גלם צמחיים ולקבוע באופן סלקטיבי טאנינים משקעים ולא משקעים בחומרי גלם צמחיים.

ההמצאה מתייחסת לתעשיית התרופות, תחום הפרמקוגנוזה וכימיה פרמצבטית, וניתן להשתמש בה כדי לבקר את איכות החומרים הצמחיים המכילים טאנינים.

שיטה ידועה לקביעת טאנינים בחומרי צמחי מרפא (MPM) על ידי קולומטריה מבחינת טאנין (S. G. Abdullina ואחרים. קביעה קולומטרית של טאנינים בחומרי צמחי מרפא. // בית מרקחת. מס' 4. - 2010. - P. 13 -חמש עשרה).

החיסרון בשיטה זו הוא שימוש בציוד נוסף (קולומטר), טיטרנט ספציפי (פוטסיום היפויודיד), שמבחינת תכונות החמצון מתקרב לאשלגן פרמנגנט ואינו מאפשר להבדיל בין טאנינים בעלי משקל מולקולרי גבוה לנמוך.

ידועה גם שיטה לקביעת תכולת טאנין ונגזרות חומצה גאלית בתה על ידי מוליכות (פטנט מס' 2127878. שיטה לקביעה נפרדת של טאנין וקטכינים (במונחים של חומצה גאלית) בתה. מ': 1999).

החיסרון בשיטה זו הוא שימוש בממיסים אורגניים רעילים (isobutyl alcohol), וכן שימוש בתגובת צבע עם Fe (III), שהתוצר שלה הוא תרכובת צבעונית שאינה יציבה בצבע לאורך זמן.

ידועה גם שיטה לקביעה כמותית של טאנינים מבחינת טאנין בעלים של skumpia וסומאק בשיטת קומפלקסומטריה לאחר משקעים של טאנינים עם מלחי אבץ (GOST 4564-79. Leaf of skumpia. מפרטים; GOST 4565- 79. עלה של סומאק. מפרטים).

החיסרון בשיטה זו הוא משך הניתוח והקושי לקבוע את נקודת השקילות.

ידועה גם שיטה לקביעה כמותית של טאנינים בשיטה הספקטרופוטומטרית לאחר תגובה עם ריאגנט Folin-Ciocalteu מבחינת חומצה גאלית (הנחיות לשיטות בקרת איכות ובטיחות של תוספי מזון פעילים ביולוגית. מדריך. R 4.1.1672 -03. - מ' - 2004 - עמ' 94-95).

החיסרון של שיטה זו הוא חוסר האפשרות של קביעה נפרדת של טאנינים בעלי משקל מולקולרי נמוך וגבוה.

הקרוב ביותר לשיטה המוצעת הוא שהטאנינים נקבעים בספקטרופוטומטריה במונחים של חומצה גאלית (הנחיות לשיטות בקרת איכות ובטיחות של תוספי מזון פעילים ביולוגית. מדריך. R 4.1.1672-03. - M. - 2004 g. - P. 120).

החיסרון של שיטה זו הוא דילול חוזר ונשנה של דגימת הבדיקה, וכתוצאה מכך ריכוז הטאנינים בתמיסה נקבע בצורה גרועה. גם בשיטה זו, פתרון הייחוס הוא פתרון חיץ, מה שמקשה על הניתוח. בנוסף, שיטה זו אינה מאפשרת לקבוע בנפרד את תכולת הטאנינים במשקל מולקולרי נמוך ובעל משקל מולקולרי גבוה.

מטרת ההמצאה היא לשפר את הדיוק בקביעת טאנינים ואת האפשרות לקביעה נפרדת של טאנינים משקעים ובלתי ניתנים למשק בחומרי גלם צמחיים.

הבעיה נפתרת על ידי העובדה שדגימה של חומר הגלם מופקת עם מים במהלך הרתיחה, מקוררת, סינון, הצפיפות האופטית של דגימת aliquot נמדדת באורך גל של 277 ננומטר ותכולת סכום כל הטאנינים היא מחושב לפי הנוסחה

50 - נפח בקבוק, מ"ל,

W - תכולת לחות של חומר גלם, %,

תמיסה 1% של קולגן בחומצה אצטית 1% מתווספת למנה של התסנין, מנערת, מסוננת, הצפיפות האופטית של התסנין נמדדת באורך גל של 277 ננומטר ותכולת הטאנינים המשקעים מחושבת לפי הנוסחה

D 1 - צפיפות אופטית של תמיסה 1,

D 2 - צפיפות אופטית של תמיסה 2,

m nav - משקל מדגם חומרי הגלם, g,

V a - נפח דגימת כמות, מ"ל,

250 - נפח מיצוי כולל, מ"ל,

50 - נפח בקבוק, מ"ל,

508 - אינדקס ספיגה ספציפי של חומצה גאלית (צפיפות אופטית של 1% תמיסה של חומצה גאלית 1 מ"ג/מ"ל),

W - תכולת לחות חומר גלם, %.

באופן מעשי, השיטה מתבצעת כדלקמן. כ-2.0 (שנשקלים במדויק) חומרי גלם מרוסקים, מנופים במסננת בקוטר חור של 3 מ"מ, שמים בבקבוק של 500 מ"ל, יוצקים 250 מ"ל מים מחוממים לסף רתיחה ומרתיחים 30 דקות בריפלוקס תוך ערבוב מדי פעם. מצננים לטמפרטורת החדר, מדללים במים ל-250 מ"ל, מסננים דרך צמר גפן כדי שחלקיקי חומר הגלם לא ייכנסו לתמצית המימית. 50 המ"ל הראשונים של התסנין נזרקים.

1-4 מ"ל של תמצית מימית מונחים בבקבוק נפח של 50 מ"ל, מותאם לסימון עם מים (פתרון 1). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 1 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה.

30 מ"ל של תמצית מימית מונחים במיכל מדידה עם קיבולת של 50 מ"ל, מוסיפים 2-10 מ"ל מגיב משקעים, מנערים במשך 30-60 דקות, מתיישבים, מסוננים. 1-4 מ"ל מהתסנין המתקבל מועברים לבקבוק עם קיבולת של 50 מ"ל, מותאם לסימון עם מים (פתרון 2). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 2 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה.

ההמצאה מומחשת על ידי הדוגמאות הבאות.

דוגמה 1. לניתוח נלקח חומרי גלם צמחיים - קליפת עץ אלון.

כ-2.0 (ששוקלים במדויק) קליפת עץ אלון גולמית כתושה, מנופה דרך מסננת בקוטר חור של 3 מ"מ, מונחים בבקבוק של 500 מ"ל, יוצקים עם 250 מ"ל מים מחוממים לרתיחה ומרתיחים במשך 30 דקות תחת ריפלוקס עם ערבוב מדי פעם. . מצננים לטמפרטורת החדר, מדללים במים ל-250 מ"ל, מסננים דרך צמר גפן כדי שחלקיקי חומר הגלם לא ייכנסו לתמצית המימית. 50 המ"ל הראשונים של התסנין נזרקים.

2 מ"ל של תמצית מימית מקליפת עץ האלון מונחים בבקבוקון נפח של 50 מ"ל, מותאם עם מים עד לסימון (פתרון 1). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 1 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה. D 1 לקליפת עץ אלון הוא 0.595.

30 מ"ל של תמצית מימית מונחים במיכל מדידה עם קיבולת של 50 מ"ל, מוסיפים 2 מ"ל מגיב משקעים, מנערים במשך 30 דקות, מתיישבים, מסוננים. 2 מ"ל מהתסנין שהתקבל מועברים לבקבוק עם קיבולת של 50 מ"ל, מותאם לסימון עם מים (פתרון 2). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 2 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה. D 2 לקליפת עץ אלון הוא 0.276.

דוגמה 2. לניתוח נלקח החומר הצמחי של קנה השורש הסרפנטיני.

כ-2.0 (שנשקלים במדויק) מחומר הגלם הכתוש של קנה השורש הסרפנטין, מנופה דרך מסננת בקוטר חור של 3 מ"מ, שמים בבקבוקון בקיבולת 500 מ"ל, יוצקים 250 מ"ל מים מחוממים לרתיחה ומרתיחים. למשך 30 דקות תחת ריפלוקס עם ערבוב מדי פעם. מצננים לטמפרטורת החדר, מדללים במים ל-250 מ"ל, מסננים דרך צמר גפן כדי שחלקיקי חומר הגלם לא ייכנסו לתמצית המימית. 50 המ"ל הראשונים של התסנין נזרקים.

1 מ"ל של תמצית מימית מקנה השורש של הסליל מונח בבקבוקון נפח עם קיבולת של 50 מ"ל, מותאם עם מים עד לסימון (פתרון 1). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 1 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה.

30 מ"ל של תמצית מימית מונחים במיכל נפחי של 50 מ"ל, מוסיפים 7 מ"ל מגיב משקעים, מנערים במשך 60 דקות, מתיישבים, מסוננים. 1 מ"ל מהתסנין המתקבל מועבר לבקבוקון עם קיבולת של 50 מ"ל, מותאם לסימון עם מים (פתרון 2). מדוד את הצפיפות האופטית של תמיסה 2 באורך גל של 277 ננומטר. מים משמשים כהשוואה.

השיטה המוצעת משפרת את הדיוק בקביעת תכולת הטאנינים בחומרי גלם צמחיים וקביעה סלקטיבית את הטאנינים המשקעים והלא-משוקעים בחומרי גלם צמחיים.

שיטה לקביעת טאנינים בחומרי גלם צמחיים במונחים של חומצה גאלית, המורכבת מהפקת דגימת חומרי גלם עם מים במהלך הרתחה, קירור, סינון, מדידת צפיפות אופטית של דגימת aliquot באורך גל של 277 ננומטר וחישוב תכולת סכום כל הטאנינים לפי הנוסחה:

כאשר x a - התוכן של סכום הטאנינים במונחים של חומצה גאלית,%;




50 - נפח בקבוק, מ"ל;
508 - אינדקס ספיגה ספציפי של חומצה גאלית (צפיפות אופטית של 1% תמיסה של חומצה גאלית 1 מ"ג/מ"ל);
W - תכולת לחות של חומר גלם, %,
תמיסה 1% של קולגן בחומצה אצטית 1% מתווספת למנה של התסנין, מנערת, מסוננת, הצפיפות האופטית של התסנין נמדדת באורך גל של 277 ננומטר, ותכולת הטאנינים המשקעים מחושבת באמצעות הנוסחה :

כאשר X הוא תכולת הטאנינים המשקעים במונחים של חומצה גאלית,%;
D 1 - צפיפות אופטית של תמיסה 1;
D 2 - צפיפות אופטית של תמיסה 2;
m nav - מסה של מדגם של חומרי גלם, g;
V a - נפח דגימת כמות, מ"ל;
250 - נפח החילוץ הכולל, מ"ל;
50 - נפח בקבוק, מ"ל;
508 - אינדקס ספיגה ספציפי של חומצה גאלית (צפיפות אופטית של תמיסה 1% של חומצה גאלית 1 מ"ג/מ"ל);
W - תכולת לחות חומר גלם, %.

פטנטים דומים:

ההמצאה מתייחסת לרפואה, דהיינו לפסיכונוירולוגיה, ומתארת ​​שיטה לניבוי התאוששות של תפקודים נוירולוגיים בחולים בתקופה החריפה של שבץ איסכמי על ידי ביצוע מחקרים קליניים וביוכימיים של הריכוז הכולל של אלבומין (TAC) בסרום הדם ב-g /l, כאשר בנוסף לפי 5-7 ביום המחלה, נקבע הריכוז האפקטיבי של אלבומין (ECA), מחושב הרזרבה הקושרת לאלבומין (ARA), ואם מדד זה קטן מאחד, תוצאה שלילית של שחזור התפקודים הנוירולוגיים בחולים בתקופה החריפה של שבץ איסכמי צפוי.

ההמצאה מתייחסת לרפואה, למחקר ביולוגי באונקולוגיה, ובאמצעותה ניתן לקבוע התפתחות של תהליך ממאיר בגידולי מוח לאחר טיפול כירורגי.

ההמצאה מתייחסת לתחום הרפואה, במיוחד לאונקולוגיה, ומתארת ​​שיטה להערכת היעילות של כימותרפיה ניאו-אדג'ובנטית לסרטן שלפוחית ​​השתן על ידי בדיקת מטופל, בה נרשמת העוצמה המקסימלית של אוטופלואורסצנציה של רקמת הגידול באזור הירוק של הספקטרום. בשלב האבחון הראשוני וחודש לאחר טיפול כימותרפי טרום ניתוחי ועם עלייה בערכי המטופל של העוצמה המקסימלית של אוטופלואורסצנטי של רקמת הגידול ב-15% מההתחלה ויותר, יעילות הטיפול מוערכת כחלקית. רגרסיה של תהליך הגידול, בהיעדר שינויים בעוצמת האוטופלואורסצנטי של רקמת הגידול מהראשוניים, נקבעת התייצבות התהליך, עם ירידה בעוצמת האוטופלוארסצנטי של רקמת הגידול ב-15% ועוד מההערה הראשונית על התקדמות תהליך הגידול.