Rpga tai passiivinen hemagglutinaatioreaktio millainen verikoe tämä on. Diagnosticum erythrocyte Salmonella V-antigeeninen neste Muiden tartuntatautien diagnoosi

Hyvin tehty verikoe auttaa havaitsemaan erilaisten monimutkaisten sairauksien patogeenit elimistössä niiden kehityksen alkuvaiheessa ja joskus jopa ennen taudin kliinisten oireiden ilmaantumista. Hyvin usein lääkärit määräävät potilaille analyysin agglutinaatioreaktiosta. Seuraavaksi käsittelemme sitä tosiasiaa, että tämä on RPHA-veritesti, milloin sitä käytetään ja mistä se voi kertoa?

Toimintaperiaate

Epäsuora hemagglutinaatioreaktio (kutsutaan myös passiiviseksi hemagglutinaatioreaktioksi, joka tunnetaan myös nimellä RPHA, RNHA) tapahtuu, kun antigeeniä adsorboivat punasolut altistetaan tätä antigeeniä vastaavalle immuuniseerumille.

Tutkimukset ovat osoittaneet, että tämä menetelmä on spesifisyyden ja herkkyyden suhteen huomattavasti parempi kuin muut serologiset testit. Siksi sitä käytetään usein bakteerien tai riketsioiden aiheuttamien sairauksien havaitsemiseen. Bakteeriuutteet, erilaisten mikrobien puhdistetut antigeenit, bakteerirokotteiden komponentit voivat toimia antigeeneinä tällaisessa analyysissä.

Kun patogeeninen bakteeri pääsee ihmiskehoon, siinä alkaa muodostua spesifisiä ja epäspesifisiä vasta-aineita, jotka muodostavat tietyn immuunivasteen. Kun kyseessä on kuppa, jonka uskotaan aiheuttavan treponema pallidum, ihmisen veressä muodostuu gram-negatiivinen spirokeetta, ei-treponemaalisia tai treponemaalisia vasta-aineita. Laboratoriodiagnostiset tutkimukset perustuvat niiden havaitsemiseen, jonka pitäisi vahvistaa tai kumota viruksen aiheuttajan esiintyminen kehossa.

RPHA:lla erytrosyytit, joiden pintaan adsorboivat vaalean treponeman antigeenejä, jos kupatartunnan saaneen henkilön materiaalista lisätään seerumia treponeman vasta-aineilla, tarttuvat yhteen, eli niiden agglutinaatio tapahtuu.

Tutkimuksen luotettavuus

On tärkeää muistaa, että pallidum-spirokeetan vasta-aineita alkaa ilmaantua tartunnan saaneiden ihmisten kehoon 2-4 viikkoa tartunnan jälkeen, ja joissakin tapauksissa tätä ajanjaksoa voidaan pidentää jopa 6 viikkoon.

Tästä syystä RPHA-analyysin herkkyys taudin primaarivaiheessa on noin 86 %, mikä on merkittävästi huonompi kuin kahden seuraavan vaiheen potilaiden diagnoosin tarkkuus. Analyysin herkkyys tällaisille potilaille sekä piilevän kupan kantajille on 99-100%.

Passiivisen hemagglutinaation reaktiolla on kuitenkin erittäin korkea spesifisyys, joka saavuttaa tason 96-100%.

Tämä mahdollistaa tämän tutkimuksen käyttämisen diagnoosin vahvistamiseen, jos alustavan ei-treponemaalisen tutkimuksen positiivinen reaktio, esimerkiksi virtsarakon syövän mikrosaostumisreaktio.

Koska treponemaalisten testien, mukaan lukien TPHA:n, herkkyys ylittää merkittävästi ei-treponemaalisten menetelmien herkkyyden, tällaisia ​​testejä on määrätty yhä useammin kupan seulontatutkimuksissa. Kuitenkin, kun positiivinen seulontareaktio saadaan, tarvitaan toinen spesifinen (treponemaalinen) analyysi diagnoosin selventämiseksi, mutta ei TPHA:ta.

Analyysin purkaminen

Kun seerumia, jossa on kupatartunnan saaneen henkilön materiaalista peräisin olevia treponeman vasta-aineita, lisätään reagenssiin, jolla tutkimus suoritetaan, tapahtuu punasolujen agglutinaatiota, jonka seurauksena ne saostuvat.

Kiinnittyneiden punasolujen määrään vaikuttaa seerumin vasta-aineiden määrä. Siksi passiivinen hemagglutinaatio ei vain osoita vasta-aineiden läsnäoloa, vaan myös mahdollistaa niiden määrän asettamisen. Tutkimuksen tulosta edustaa vasta-ainetiitterin taso.

Positiivinen reaktio osoittaa taudinaiheuttajan läsnäolon potilaan kehossa. Diagnostisen prosessin aikana voi kuitenkin esiintyä vääriä positiivisia reaktioita, joiden lukumäärä ei tilastollisesti ylitä tasoa 0,05-2,5 % tutkimusten kokonaismäärästä.

TPHA:n positiivinen reaktio ihmisillä, joilla ei ole kuppatartuntaa, voi ilmetä, jos:

• systeemiset sidekudossairaudet,
• potilaan veressä vasta-aineita vaalean treponeman kaltaisille taudinaiheuttajille,
• fysiologiset sairaudet, kuten sydäninfarkti,
• hepatiitti B tai C
• onkologiset sairaudet,
• lavantauti, leptospiroosi, tuberkuloosi,
• HIV-infektio
• borrelioosi punkkien levittämä etiologia,
• laajat vammat tai murtumat,
• raskaus,
• huumeinjektioiden tapauksessa.

Useimmissa tapauksissa vääriin positiivisiin reaktioihin liittyy matala titteri. Korkeat tiitterit ovat tyypillisiä taudin toissijaiselle vaiheelle ja aiemmin piilevälle kuppalle. Ne voivat kuitenkin ilmaantua myös väärällä positiivisella reaktiolla potilailla, joilla on pahanlaatuisia kasvaimia.

Ihmisillä, joilla on ollut kuppa vähintään kerran, RPHA:n reaktio pysyy positiivisena heidän elämänsä loppuun asti.

Harvinaisia ​​poikkeuksia ovat tilanteet, joissa sairaus havaittiin varhaisessa kehitysvaiheessa, minkä jälkeen suoritettiin intensiivistä ja tehokasta hoitoa. Siksi TPHA-analyysiä ei voida käyttää toipumisen dynamiikan arvioimiseen tai taudin varhaisten tai myöhäisten vaiheiden vertailevaan diagnoosiin.

Positiivisen reaktion saatuaan on tarpeen tutkia sairaan perheenjäseniä ja ihmisiä, jotka ovat olleet hänen kanssaan seksuaalisessa yhteydessä.

Negatiivinen reaktio voidaan saada seuraavissa tapauksissa:

• henkilöllä ei ole kuppaa,
• väärin otettu verta tutkimusta varten,
• Tartunnasta on kulunut 2-4 viikkoa, eikä vasta-aineiden tuotanto ole vielä alkanut.

Joka tapauksessa tutkimuksen tulos on arvioitava yhdessä lisälaboratorio- ja anamnestisten indikaattoreiden kanssa.

Kenelle analyysi näytetään?

Lääkäri voi ohjata verenluovutusta RPHA-potilaille seuraavissa tapauksissa:

• kupan kliinisten ilmentymien läsnä ollessa: haavaiset ihottumat, suurentuneet imusolmukkeet, diffuusi hiustenlähtö ja muut,
• jos epäilet mahdollista tartuntaa jo sairaiden ihmisten kanssa,
• luovuttajat, jotka ovat valmiita luovuttamaan verta,
• henkilöt, jotka käyvät vuosittain ennaltaehkäiseviä tutkimuksia tai laativat terveyskirjoja,
• potilaat, joiden seulontatesti on positiivinen,
• ennen sairaalaan ottamista,
• leikkausta edeltävän tutkimuksen aikana
• salmonelloosin, kurkkumätän ja punataudin patogeenien havaitsemiseen RPHA:n suorittamismenetelmällä sopivan diagnostiikan kanssa.

Tutkimusmenettely

Potilaan toimittama laskimoverinäyte lähetetään tutkittavaksi. Virheellisen johtopäätöksen välttämiseksi potilaan tulee olla vastuussa analyysiin valmistautumisesta. Jotta testitulokset olisivat luotettavia, on noudatettava seuraavia suosituksia:

• Analyysi tulee ottaa vain tyhjään vatsaan.
• Analyysipäivänä voit juoda kivennäisvettä ilman kaasua pieninä määrinä.
• Älä tupakoi vähintään 30 minuuttia ennen testiä, mutta on parempi pidentää tätä aikaa useisiin tunteihin.
• Alkoholijuomien nauttiminen on suoraan kielletty.
• Potilaiden, jotka joutuvat käyttämään säännöllisesti lääkkeitä, tulee ehdottomasti ilmoittaa tästä lähettävälle lääkärille.
• Jos tunnet olosi huonoksi tai huonovointiseksi, sinun tulee ilmoittaa verinäytteen ottaneelle sairaanhoitajalle tai sen poliklinikan lääkärille, jossa sinun on otettava testi.

Ole vastuussa paitsi kysymyksestä kokeen suorittamisesta, myös kokeeseen valmistautumisesta.

Muiden tartuntatautien diagnosointi

Ei pidä ajatella, että tällainen tutkimus, kuten RPGA, voidaan suorittaa vain syfiliksen aiheuttajan tunnistamiseksi kehossa.

Analyysi salmonella diagnostiikalla antaa sinun tunnistaa ruoansulatuskanavan infektion - salmonellan. Neljännestä päivästä tartunnan jälkeen elimistö tuottaa vasta-aineita salmonella-antigeeneille, jotka voidaan havaita RPGA-menetelmällä. Negatiivinen tulos osoittaa infektion puuttumisen, ja positiivinen tiitteri, joka kasvaa 1:200:sta 1:800:aan akuutissa vaiheessa, osoittaa sen läsnäolon.

RPHA:n suorittamismenetelmä kurkkumätämarkkerilla mahdollistaa kurkkumätäen diagnosoinnin ja immuniteetin arvioinnin rokotuksen jälkeen. Immuunijärjestelmä alkaa tuottaa vasta-aineita heti seuraavana päivänä tartunnan jälkeen, ja ne pysyvät kehossa useita viikkoja. Tämän analyysin herkkyys ylittää bakteriologisen tutkimusmenetelmän. Titteri 1:80 vahvistaa difterian esiintymisen kehossa.

RPHA:n punatautimarkkeri havaitsee shigelloosin (basillaarisen punataudin) tarkimmin jopa verrattuna laboratoriodiagnostiseen menetelmään bakteeriviljelmän kautta. Jos potilas ei saa laadukasta hoitoa, sairaus siirtyy krooniseen prosessiin, jossa usein esiintyy pahenemisvaiheita. Analyysin avulla voidaan diagnosoida ripulin akuutti ja krooninen vaihe, tunnistaa punataudin aiheuttaja, erottaa bakteeriperäinen shigelloosi paksusuolen syövästä, endokriinisistä häiriöistä tai paksusuolen tulehduksesta. Negatiivinen reaktio osoittaa basillin puuttumisen ja vahvistaa sen läsnäolon tiitterillä 1:80 vauvoilla tai 1:320 aikuisilla.

Tutkimuksen suorittaminen tuhkarokkomarkkerilla antaa sinun määrittää tuhkarokko-taudin. Tällainen tutkimus voi olla vaihtoehto usein suoritetulle HI-analyysille tuhkarokkodiagnoosissa.

Joten, RPHA-veritesti - mikä se on? Yhteenvetona voimme turvallisesti sanoa, että tämä on moderni, erittäin herkkä ja luotettava menetelmä erilaisten bakteriologisen etiologian sairauksien diagnosoimiseksi.

Yhteydessä

Reagenssisarja Diagnosticum Salmonella VI-antigenic on tarkoitettu spesifisten vasta-aineiden havaitsemiseen ihmisveren seerumissa Salmonella tyfoidin V-antigeenille passiivisen hemagglutinaation (RPHA) reaktiossa.

1. PAKKAAN OMINAISUUDET

2.1. Menetelmän periaate.

Diagnosticum Salmonella VI-antigeenin vaikuttava ainesosa on punasolujen pinnalle kiinnittynyt V-antigeeni. Vuorovaikutuksessa Vee-antigeenin vasta-aineita sisältävien seerumien kanssa havaitaan punasolujen agglutinaation ilmiö.

2.2. SERTIN KOOSTUMUS

Reagenssit	Määrä
Diagnosticum erythrocytic Salmonella V-antigeeninen neste- edustaa 1-prosenttista suspensiota formalinoiduista ja Vi-antigeenillä Salmonella tyfoidilla herkistetyistä lampaan punasoluista fosfaattipuskuriliuoksessa (pH 7,2) + 0,2; pitoisuus 0,06 mol/l). Homogeeninen ruskea suspensio ilman hiutaleita; laskeutuessaan muodostuu 2 kerrosta: tiheä ruskea erytrosyyttien sedimentti ja läpinäkyvä kellertävä supernatantti	1 pullo - 3 ml
Seerumin diagnostinen salmonella adsorboitu reseptori Vee kuiva — homogeeninen massa valkoisesta, jossa on ruskehtava sävy, beigeen	1 pullo - alkaen 0,1 ml
1 % formalisoitujen, herkittämättömien lampaiden punasolujen suspensio- homogeeninen ruskea suspensio ilman hiutaleita; laskeutuessaan muodostuu 2 kerrosta: tiheä ruskea erytrosyyttien sedimentti ja läpinäkyvä kellertävä supernatantti	1 injektiopullo -
Liuos seerumin laimentamiseen ja RPHA:n asettamiseen - 0,9 % natriumkloridiliuos on kirkas, väritön neste, pH 6,5 - 7,5	2 pulloa - 8 ml kukin
Pyöreäpohjainen levy kertakäyttöisiä immunologisia reaktioita varten — koostuu 8 rivistä, joista jokaisessa on 12 reikää läpinäkyvällä, värittömällä, pyöreällä pohjalla	1 kpl

1. ANALYYTTISET JA DIAGNOSTISET OMINAISUUDET.

3.1. Diagnosticum tulee agglutinoida RPHA:ssa diagnostisen Salmonellan adsorboituneen reseptori B:n seerumin kanssa vähintään laimennuksessa 1:160.

Terveiden ihmisten veriseerumin diagnostisten ominaisuuksien ehdollista tasoa tulisi pitää seerumin laimennoksena, joka on enintään 1:20.

3.2. Analyysiaika on 2 tuntia.

3.3. Sarja on suunniteltu 8 määritelmälle.

1. VAROTOIMENPITEET

Kun työskentelet sarjan kanssa, sinun tulee noudattaa suunnittelua, turvatoimia, teollisuuden sanitaatiota, epidemian vastaista järjestelmää ja henkilökohtaista hygieniaa koskevia sääntöjä työskennellessäsi ministeriön järjestelmän terveys- ja epidemiologisten laitosten laboratorioissa (osastoilla, osastoilla) Neuvostoliiton terveys (M., 1981).

Analysoituja seerumeita sekä niiden kanssa kosketuksissa olevia reagensseja tulee pitää potentiaalisesti tarttuvina, jotka kykenevät pitkäaikaisesti varastoimaan tai siirtämään HIV:n, hepatiittiviruksen tai minkä tahansa muun virusinfektion aiheuttajan – niitä tulee käsitellä varoen. :

• työskennellä kumihansikkaissa;
• pipetoinnissa on käytettävä automaattisia pipettejä;
• työn lopussa analysoitavat seerumit ja niiden kanssa kosketuksissa olevat reagenssit, instrumentit, tulee käsitellä desinfiointiliuoksella
• Pyyhi laitteet ennen ja jälkeen työskentelyn 70-prosenttisella etyylialkoholilla.

Analysoidut seerumit on inaktivoitava 56 0 C:ssa 30 minuutin ajan.

Diagnostinen salmonella adsorboitu reseptori Vee kuiva inaktivoitu seerumi sisältyy pakkaukseen.

Objektiiviset analyysitulokset taataan seuraavin ehdoin:

• kaikki sarjan reagenssit on säilytettävä lämpötilassa 2 - 8 0 С;
• älä käytä vanhentuneita reagensseja;
• älä käytä sarjan reagensseja, jos niitä ei ole merkitty vastaavasti pakkaukseensa;
• RPHA:lle, käytä vain tässä sarjassa olevia reagensseja.

Hinta: pyynnöstä

Voit lisätä tuotteen ostoskoriin määrittämällä määrän

Valmistaja: Microgen NPO FSUE

Maa: Venäjä

Yksikkö mitta.: aseta

Pakkaustyyppi: pahvilaatikko

Toimittajakoodi:

Kuvaus

Diagnosticum erythrocyte salmonellosis Vi-antigenic on tarkoitettu passiivisen hemagglutinaation (RPHA) reaktion asettamiseen. Se on formalisoidun ja herkistetyn ihmisen erytrosyyttien O (I) veriryhmän 0,75 % suspensio Vi-antigeenilla fosfaattipuskuriliuoksessa (pH 7,2 ± 0,2); pitoisuus - 0,06 mol/l), säilytetty formaliinilla. Sisältää seerumin diagnostisen salmonellan adsorboituneen Vee-reseptorin, kuivan, liuos laimennoksille ja pyöreäpohjaisen levyn kertakäyttöisiä immunologisia reaktioita varten, 96-kuoppa. Toimintaperiaate perustuu erytrosyyttien agglutinaation ilmiöön, kun se on vuorovaikutuksessa seerumien kanssa, jotka sisältävät punasolujen pinnalle kiinnittyneen V-antigeenin vasta-aineita. Suunniteltu 8 määritelmälle




Toiminnallinen tarkoitus

Salmonellan lavantautien V-antigeenin spesifisten vasta-aineiden havaitseminen ihmisen veriseeruminäytteistä. Agglutinaatioreaktio laimennuksessa ei ole pienempi kuin 1/2 niiden tiitteristä, mutta vähintään 1:160. Terveiden ihmisten diagnostisen veriseerumin ehdollisena tasona tulisi pitää seerumilaimennuksia, jotka eivät ole korkeampia kuin 1:20. Diagnosticumia ei saa agglutinoida diagnostisilla salmonella-adsorboituneilla seerumeilla RA:lle: O-reseptori 9 - laimennuksella 1:40 tai enemmän, H-reseptori d - laimennuksella 1:10 tai enemmän.
Analysoiduista seerumeista valmistetaan kaksinkertaiset sarjalaimennokset 0,05 ml:aan kiinnitettyä 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta alkaen suhteesta 1:10 - 1:2560 ja 1 sarja kaksinkertaisia ​​sarjalaimennoksia diagnostisesta seerumista alkaen 1:10, pullon etiketissä ilmoitettuun kaksinkertaiseen tiitteriin. Ravista injektiopulloja ennen avaamista ja käytön aikana suspension homogenisoimiseksi. Kaiva liitteenä olevan tabletin kuoppiin, lisää 0,025 ml diagnostiikkaa. Aseta säätimet ja inkuboi termostaatissa. Analyysiaika on 2 tuntia.
Pakolliset kontrollit ovat: seerumin diagnostisen Salmonella-adsorboituneen reseptori B:n kuivan ja analysoitavan seerumin kontrollointi (laimennettu 1:10 0,05 ml:n tilavuuteen) ja tarkista, ettei diagnostiikassa ole spontaania agglutinaatiota.
Reaktion tulosten laskeminen suoritetaan neljän ristin järjestelmän mukaisesti:
4+ kaikki erytrosyytit agglutinoituvat ja peittävät tasaisesti kuopan pohjan "sateenvarjon" muodossa;
3+, lähes kaikki erytrosyytit ovat agglutinoituneita, niiden taustalla on huomaamaton rengas asettuneita agglutinoitumattomia punasoluja;
3+ tasaisen agglutinaatin kanssa reiän pohjassa on agglutinoitumattomien punasolujen sedimenttiä pienen "renkaan" tai "napin" muodossa;
1+ suurin osa erytrosyyteistä on agglutinoitumattomia ja asettunut pienen "renkaan" muodossa, jossa on sileät reunat tai "napit" kuopan pohjan keskellä.
(-) ei ole merkkejä agglutinaatiosta. Punasolut asettuivat pienen "renkaan" muodossa, jossa on sileät reunat tai napit kaivon keskellä tai putken pohjassa.
Vähintään 3+ reaktio katsotaan positiiviseksi.
RPHA:ssa saatuja tuloksia voidaan pitää luotettavina, jos diagnostisen salmonellan adsorboituneen B-reseptorin B:n seerumi kuivattuina 1:10 sai positiivisen tuloksen laimennuksessa, joka on vähintään 14 niiden tiittereistä ja 2 kaivossa analysoidulla seerumilla ja Diagnostisen salmonellan adsorboituneen reseptorin B seerumi kuivattiin laimennoksilla 1:10, ei saa olla hiutaleita ja sedimenttiä; kaivoissa, joissa on 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta ja diagnostiikkaa - reaktio on negatiivinen.
Analysoidun seerumin vasta-ainetiitterin katsotaan olevan seerumin viimeinen laimennos, joka silti antaa positiivisen punasoluagglutinaation.
Henkilöitä, joilla on vasta-aineita V-antigeenille laimennoksessa 1:40 tai enemmän, pidetään kroonista lavantautia epäilyttävinä. Kuitenkin, koska diagnoosia ei voida tehdä vain serologisen tutkimuksen perusteella, perusteellinen bakteriologinen tutkimus on tarpeen.

Tekniset tiedot

Aseta koostumus:
1. Diagnosicum erythrocyte salmonella V-antigeeninen, homogeeninen ruskean värinen suspensio ilman hiutaleita, laskeutumisen aikana muodostuu kaksi kerrosta - tiheä ruskea erytrosyyttien sedimentti ja läpinäkyvä kellertävä supernatantti; 6 ml - 1 injektiopullo;
2. Diagnostinen seerumi Salmonella adsorboitu reseptori Vee, kuiva homogeeninen massa valkoisesta ruskehtavan värisellä beigeen - lyofilisaatin muodossa 0,1 ml 1 pullosta;
3. 1 % formalisoitujen, herkittämättömien lampaiden punasolujen suspensio - homogeeninen ruskea suspensio ilman hiutaleita, laskeutuessaan muodostuu kaksi kerrosta - tiheä ruskea erytrosyyttien sedimentti ja läpinäkyvä kellertävä supernatantti; 1 ml - 1 injektiopullo;
4. Liuos seerumilaimennoksia ja RPHA:ta varten - 0,9 % natriumkloridiliuos - kirkas väritön neste - 8 ml 2 pulloa;
5. Kertakäyttöinen immunologisten reaktioiden tabletti koostuu 8 rivistä, joista jokaisessa on 12 kuoppaa läpinäkyvällä värittömällä pyöreällä pohjalla - 1 kpl.
Varastointiolosuhteet: kuivassa, pimeässä huoneessa +4...8°C lämpötilassa. Avattua injektiopulloa, jossa on diagnostiikka suljetussa muodossa, voidaan säilyttää 2–8 °C:n lämpötilassa kuukauden ajan.
Säilyvyys - 18 kuukautta valmistuspäivästä, joka on merkitty pakkaukseen.
Rekisteröity Roszdravnazorissa

Diagnoosin aktiivinen alku on punasolujen pinnalle kiinnittynyt V-antigeeni. Vuorovaikutuksessa Vee-antigeenin vasta-aineita sisältävien seerumien kanssa havaitaan punasolujen agglutinaation ilmiö.

Julkaisumuoto

Valmistettu sarjassa 1 pullo diagnostiikalla - 3 ml diagnostista salmonellaseerumia adsorboitunut reseptori Vee Dry lyofilisaatin muodossa 0,1 ml:sta 1 pullo; 0,9-prosenttinen natriumkloridiliuos - 2 pulloa 8 ml; tabletti kertakäyttöisiin immunologisiin reaktioihin - 1 kpl.

Yhdiste

Reagenssien määrä:

Diagnosticum erythrocyte salmonella V-antigenic, joka on 0,75 % suspensio veriryhmän formalisoiduista ja V-antigeenillä herkistetyistä ihmisen punasoluista O (I) fosfaattipuskuriliuoksessa (pH-7,2 ± 0,2; pitoisuus - 0,06 mol/l) . Säilöntäaine - formaliini. Homogeeninen ruskea suspensio ilman hiutaleita; laskeutuessaan muodostuu 2 kerrosta: tiheä ruskea erytrosyyttien sedimentti ja läpinäkyvä kellertävä supernatantti 1 pullo - 3 ml.

Seerumin diagnostinen salmonella-adsorboitu reseptori Vee dry - homogeeninen massa valkoisesta ruskehtavan sävyn ja beigen välillä. 1 pullo - alkaen 0,1 ml.

Ylläpitoliuos - 0,9 % natriumkloridiliuos - kirkas, väritön neste, pH 6,5 - 7,5. 2 pulloa - 8 ml.

Kertakäyttöinen pyöreäpohjainen levy immunologisiin reaktioihin - koostuu 8 rivistä, joista jokaisessa on 12 kuoppaa, joissa on läpinäkyvä, väritön, pyöreä pohja. 1 KPL.

Diagnosticum tulee agglutinoida RPHA:ssa diagnostisen salmonellan adsorboituneen reseptorin B kuivan seerumin kanssa laimennuksella, joka on vähintään 1/2 niiden tiitteristä, mutta vähintään 1/160. Diagnosticumia ei saa agglutinoida diagnostisilla salmonella-adsorboituneilla seerumeilla RA:lle: O-reseptori 9 - laimennuksella 1:40 tai enemmän, H-reseptori d - laimennuksella 1:10 tai enemmän.


Käyttöaiheet

Suunniteltu havaitsemaan ihmisen veren seerumissa spesifisiä vasta-aineita Salmonella tyfoidin V-antigeenille passiivisen hemagglutinaation (RPHA) reaktiossa.

Annostusohjelma ja käyttötapa

Ihmisen veriseeruminäytteitä käytetään analysoituina näytteinä.
Analysoitua näytettä säilytetään olosuhteissa, jotka estävät bakteerien kasvun, 2–8 °C:n lämpötilassa enintään 72 tuntia. Pakastaminen on sallittua, pakastetut analysoidut näytteet tulee sulattaa huoneenlämmössä ennen testausta.
Sellaisten näytteiden analysointi, joissa on vakava hemolyysi, bakteerikasvu, sekä sellaisia ​​näytteitä, joita on säilytetty pitkään ilman jäädytystä tai uudelleen pakastettua, ei ole sallittua.

ANALYYSI
Liuosten valmistus RPHA:lle.
Kuivaa avoimet injektiopullot diagnostisen salmonellan adsorboituneen reseptori V:n seerumilla ja lisää 1 ml mukana olevaa 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta, jolloin saadaan 1:10 laimennus, joka on työlaimennus.
Avattua injektiopulloa, jossa on diagnostista Salmonella adsorboitua reseptoria V kuivaa seerumia laimennettuna 1:10 suljetussa muodossa, voidaan säilyttää 2–8 °C:n lämpötilassa kuukauden ajan.
Diagnosticum on käyttövalmis. Ennen kuin avaat diagnostista ainetta sisältävän injektiopullon, ravista kevyesti, kunnes saadaan homogeeninen suspensio. On suositeltavaa toistaa ravistelu käytön aikana.
Avattua injektiopulloa, jossa on diagnostiikka suljetussa muodossa, voidaan säilyttää 2–8 °C:n lämpötilassa kuukauden ajan.
0,9 % natriumkloridiliuos. Valmis käytettäväksi.

RPGA:n suorittaminen.
Kun kontrolloidaan mitä tahansa määrää analysoituja seerumeita, on pakollista asettaa 1. agglutinaatiorivi diagnostisen Salmonellan adsorboituneen reseptorin B kuiva-seerumilla.
RPHA:n valmistukseen käytetään kertakäyttöistä tablettia immunologisiin reaktioihin. Analysoiduista seerumeista valmistetaan kaksinkertaiset sarjalaimennokset 0,05 ml:aan mukana toimitettua 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta alkaen suhteesta 1:10 - 1:2560 ja 1 sarja kaksinkertaisia ​​sarjalaimennoksia diagnostisen Salmonellan adsorboituneen reseptorin Wi seerumista. kuiva, alkaen laimennuksesta 1:10, enintään kaksinkertainen tiitteri, joka on ilmoitettu tämän seerumin pullojen etiketissä.
0,025 ml diagnostiikkaa lisätään kuhunkin kuoppaan seerumilaimennoksilla.

Pakolliset tarkastukset ovat:
1. Diagnostisen salmonella-adsorboituneen reseptorin seerumikontrolli
Kuivattu ja analysoitu seerumi, joka laimennoksessa 1:10 0,05 ml:n tilavuudessa
kahdessa kontrollikaivossa.
2. Tarkistetaan, ettei diagnostiikassa ole spontaania agglutinaation esiintymistä, jolloin 0,025 ml diagnostiikkaa lisätään kahteen kuoppaan, jotka sisältävät 0,05 ml 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta.
Tablettia ravistellaan ja asetetaan 1,5-2,0 tunniksi termostaattiin lämpötilaan (37+1) °C.

TULOSTEN TILINPÄÄTÖS
Reaktio otetaan huomioon neljän ristin järjestelmän mukaisesti:
4+ - kaikki punasolut agglutinoituvat ja peittävät tasaisesti reiän pohjan;
3+ - melkein kaikki punasolut agglutinoituvat. Niiden taustalla on huomaamaton rengas asettuneita agglutinoitumattomia erytrosyyttejä;
3+ - tasaisen agglutinaatin kanssa reiän pohjassa on agglutinoitumattomien erytrosyyttien sedimentti pienen "renkaan" tai "painikkeen" muodossa;
1+ - suurin osa punasoluista ei agglutinoidu ja asettuu pienen "renkaan" muodossa, jossa on sileät reunat tai "napit" reiän pohjan keskellä.
(-) - ei ole merkkejä agglutinaatiosta. Punasolut asettuivat pienen "renkaan" muodossa, jossa on sileät reunat tai napit kaivon keskellä tai putken pohjassa.
Vähintään 3+ reaktio katsotaan positiiviseksi.
RPHA:ssa saatuja tuloksia voidaan pitää luotettavina, jos diagnostisen salmonellan adsorboituneen B-reseptorin B:n seerumi kuivattuina 1:10 sai positiivisen tuloksen laimennuksessa, joka on vähintään 14 niiden tiittereistä ja 2 kaivossa analysoidulla seerumilla ja Diagnostisen salmonellan adsorboituneen reseptorin B seerumi kuivattiin laimennoksilla 1:10, ei saa olla hiutaleita ja sedimenttiä; kaivoissa, joissa on 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta ja diagnostiikkaa - reaktio on negatiivinen.
Analysoidun seerumin vasta-ainetiitterin katsotaan olevan seerumin viimeinen laimennos, joka silti antaa positiivisen punasoluagglutinaation.
Tulosten tulkinta.
Henkilöitä, joilla on vasta-aineita V-antigeenille laimennoksessa 1:40 tai enemmän, pidetään kroonista lavantautia epäilyttävinä. Kuitenkin, koska diagnoosia ei voida tehdä vain serologisen tutkimuksen perusteella, perusteellinen bakteriologinen tutkimus on tarpeen.

Käyttöön liittyvät varotoimet

Seerumin diagnostinen Salmonella-adsorboitu reseptori Vee, joka sisältyy pakkaukseen, on kuivainaktivoitu.
Analysoitavat seerumit on inaktivoitava 56 °C:ssa 30 minuutin ajan.
Analysoitavat seerumit sekä niiden kanssa kosketuksissa olevat reagenssit, laitteet ja instrumentit voivat olla mahdollisesti tarttuvaa materiaalia, ja niitä tulee käsitellä varoen:
- työskennellä kumihansikkaissa;
- pipetoinnissa on käytettävä automaattisia laitteita;
- työn päätyttyä analysoitavat seerumit ja niiden kanssa kosketuksissa olevat reagenssit, instrumentit, tulee käsitellä desinfiointiliuoksella;
- Pyyhi laitteet ennen ja jälkeen työskentelyn 96-prosenttisella etyylialkoholilla.

Objektiiviset analyysitulokset taataan seuraavin ehdoin:
- kaikki sarjan reagenssit on säilytettävä 2–8 °C:n lämpötilassa;
- älä käytä vanhentuneita reagensseja;
- älä käytä sarjan reagensseja, jos niiden pakkauksessa ei ole vastaavaa merkintää;
- RPHA:lle käytä vain tässä sarjassa olevia reagensseja.

Rekisteröintitodistus nro RZN 2016/3905, 04.04.2016

Tarkoitus

Reagenssipakkaus "Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigenic for RPHA" (SED-Vi) on suunniteltu havaitsemaan vasta-aineita lavantautia aiheuttavan aineen Vi-antigeenille ihmisen veriseerumissa passiivisen hemagglutinaatiotestin (RPHA) avulla.

Aseta ominaisuus

Toimintaperiaate

Lavantautien aiheuttajalle vasta-aineiden läsnä ollessa havaitaan Vi-antigeenillä herkistetyjen kanan punasolujen hemagglutinaatiota, mikä johtaa laskeutuneiden erytrosyyttien "sateenvarjon" muodostumiseen levyn U-muotoisten kuoppien pohjalle. . Lavantautien aiheuttajan vasta-aineiden puuttuessa laskeutuneet punasolut muodostavat "pisteen".

Aseta koostumus

Reagenssin nimi	Kuvaus	Määrä setissä
Diagnosticum erythrocyte Salmonella Vi-antigeeni, kuiva 6 % (SED)	Formalisoidut kanan punasolut, jotka on herkistetty S. typhi Vi -antigeenillä. Kuiva hygroskooppinen ruskea massa. Liukenemisen jälkeen - punaruskean värinen suspensio.	1 injektiopullo, alkaen 0,6 ml
Seerumin diagnostinen salmonella adsorboitu, Vi-reseptori, kuiva (laimennettu 1:20, (K+))	Salmonella-adsorboitu kanin seerumi, Vi-reseptori, laimennettu 1:20. Kuiva hygroskooppinen huokoinen massa, valkoinen. Liukenemisen jälkeen se on kirkas kellertävä tai väritön neste.	1 injektiopullo, alkaen 0,3 ml
Näytteen laimennusaine (RID)	Kirkas sinivioletti neste.	1 injektiopullo, 10 ml
Fosfaattipuskuriliuos (PBS)	Läpinäkyvä väritön neste.	1 injektiopullo, 10 ml
Kertakäyttöinen polymeerilevy immunologisiin reaktioihin	Kertakäyttöinen polymeerilevy immunologisiin reaktioihin läpinäkyvästä värittömästä polystyreenistä.	1 KPL.

Diagnostiset ominaisuudet

Diagnosticum tulee agglutinoida RPHA:ssa diagnostisen salmonellan adsorboidun seerumin Vi-reseptorin kanssa, kuivana (laimennuksella 1:20) seerumin etiketissä ilmoitettuun tiitteriin. Terveiden ihmisten veriseerumin diagnostisten ominaisuuksien ehdollista tasoa tulisi pitää seerumin laimennoksena, joka on enintään 1:20. Analyysiaika on 3040 minuuttia. Sarja on suunniteltu 42 veriseerumin tutkimiseen seulontavaihtoehdossa tai 10 veriseerumin tutkimiseen titrausvaihtoehdossa.

Varotoimenpiteet

Sarja on tarkoitettu vain in vitro diagnostiseen käyttöön. Sarjan osiin sisältyvät aineet ovat inaktivoituja ja turvallisia. Kun työskentelet sarjan kanssa, on noudatettava SP 1.3.2322-08 ja SanPiN 2.1.7.2790-10.

Lisävarusteet ja materiaalit

Laitteet, materiaalit, ratkaisut:

• 1-kanavaiset pipettiannostelijat vaihtelevalla annostilavuudella 5-40 µl; 40 - 200 ui; 200 - 1000 ui ja 1 000 - 5 000 ui;
• 8- tai 12-kanavaiset pipettiannostelijat, joiden annostelutilavuus vaihtelee 5-40 µl ja 40-200 µl;
• tislattu vesi (GOST 6709-72).

Analysoidut näytteet

Tutkittuja veriseeruminäytteitä säilytetään 2-8 °C:n lämpötilassa enintään 3 päivää verinäytteenottohetkestä. Heraa saa säilyttää jäädytetyssä tilassa enintään miinus 18 ° C:n lämpötilassa enintään 1 vuoden ajan. Ennen käyttöä näytteet sulatetaan 16-25 °C:n lämpötilassa ja sekoitetaan ravistamalla. Uudelleenpakastaminen ei ole sallittua. Näytteitä, joissa on bakteerikasvua ja hemolyysiä, ei tule käyttää. Ennen reaktion käynnistämistä testiseerumit kuumennetaan 56 °C:ssa 30 minuuttia.

Analyysin suorittaminen

Diagnostisen kontrolliseerumin (K+) valmistus

Valmista työliuos diagnostisesta salmonella-adsorboituneesta seerumista, Vi-reseptorista, kuivaa (laimennettu 1:20) 0,3 ml:sta (K+). Tätä varten injektiopullon sisältöön lisätään 0,3 ml fosfaattipuskuriliuosta (PBS), jossa on K+. Jäljelle jäänyt seerumimäärä voidaan jakaa eriin ja säilyttää pakastettuna enintään -18 °C:n lämpötilassa enintään 6 kuukautta.

Punasolusalmonellan (SED) diagnostiikan valmistus

Salmonella erythrocyte diagnosticum -suspension työskentelylaimennoksen valmistamiseksi 0,6 ml tislattua vettä lisätään kuivaa 6 % SED:tä sisältävän injektiopullon sisältöön ja jätetään hydratoitumaan 2 tunniksi 16-25 °C:n lämpötilaan. Sitten liuokseen lisätään 2,4 ml fosfaattipuskuriliuosta (PBS). Työliuosta säilytetään 2–8 °C:n lämpötilassa enintään 1 kuukauden ajan. Pakastaminen ei ole sallittua.

RPHA:n lausunto veriseerumien seulonnan aikana

Seulontaseerumit laimennetaan levyn kuoppiin seuraavasti:

• alustavat laimennokset 1:20 valmistetaan tabletin ensimmäisiin kuoppiin lisäämällä niihin ensin 190 μl RIP-liuosta, sitten 10 μl tutkittua seerumia. Jokainen seerumi lisätään erillisellä kärjellä ja pipetoidaan huolellisesti (tässä tapauksessa kuopissa olevan liuoksen värin tulisi muuttua sinivioletusta vihreäksi seerumien lisäämisen jälkeen);
• seulontalaimennokset 1:40 valmistetaan toisiin kuoppiin, ensin laitetaan niihin 25 µl PBS-liuosta ja sitten 25 µl esilaimennettua seerumia ja pipetoidaan varovasti.

Jokaisella RPHA:n asetuksella on tarpeen suorittaa K+-tiitterin kontrollimääritys. Tätä varten 50 μl PBS-liuosta lisätään 8 pitkän rivin kuoppaan. Sitten 50 µl K+-työliuosta (1:20) lisätään ensimmäiseen kuoppaan, pipetoidaan varovasti ja siirretään seuraaviin kuoppiin, 50 µl kussakin, saamalla kaksinkertaiset laimennokset välillä 1:40 - 1:5120. Toiseen 4 kaivoon lisätään 50 μl PBS-liuosta SED:n kontrolloimiseksi spontaanin hemagglutinaation puuttumisen varalta.

Lisää 25 μl SED:tä kaikkiin tabletin kuoppiin, joissa on tutkittujen seerumien seulontalaimennokset (lukuun ottamatta ensimmäistä, joka sisältää RIP:tä) ja kontrollit. Sekoita SED-suspensio pullossa tai kylvyssä ennen käyttöä! Tablettia ravistetaan perusteellisesti ja jätetään 16–25 °C:n lämpötilaan 30–40 minuutiksi, kunnes kontrollin punasolut ovat laskeutuneet täydellisesti.

RPHA:n lausunto tutkittujen veriseerumien titrauksen aikana

Tutkittujen seerumien ja K+-työliuoksen titraus suoritetaan tabletin lyhyillä riveillä. Toista lyhyttä riviä käytetään kontrolloimaan EDS:n spontaanin hemagglutinaation puuttumista.

Testiseerumin titraamiseen tarkoitettujen lyhyiden rivien ensimmäisiin kuoppiin lisätään 180 μl RIP-liuosta. Kaikki muut kuopat täytetään 50 ul:lla PBS-liuosta.

20 μl testiseerumia lisätään kuoppiin RIP-liuoksen kanssa (saadaan 1:10 laimennus). Jokainen seerumi lisätään kärjellään ja pipetoidaan varovasti (kuopissa olevan liuoksen värin tulee muuttua sinivioletusta vihreäksi). Sitten 50 μl siirretään ensimmäisistä kuopista rivien seuraaviin kuoppiin, jolloin saadaan kaksinkertaiset laimennokset 1:20 - 1:1280. Titrauksen lopussa viimeisistä kuopista poistetaan 50 μl liuoksia.

Jokaisella RPHA:n asetuksella on tarpeen suorittaa K+-tiitterin kontrollimääritys. Tätä varten 50 μl PBS-liuosta lisätään 8 pitkän rivin kuoppaan. Sitten 50 µl K+-työliuosta (1:20) lisätään ensimmäiseen kuoppaan, pipetoidaan varovasti ja siirretään seuraaviin kuoppiin, 50 µl kussakin, saamalla kaksinkertaiset laimennokset välillä 1:40 - 1:5120.

Diagnostiikan kontrolloimiseksi spontaanin hemagglutinaation puuttumisen suhteen lisätään 50 μl PBS-liuosta kaikkiin lyhyen rivin kuoppiin.

Lisää kaikkiin kuoppiin (lukuun ottamatta kunkin rivin ensimmäisiä kuoppia RIP:tä sisältäville tutkituille seerumeille) 25 µl SED:tä. Sekoita SED-suspensio pullossa tai kylvyssä ennen käyttöä! Tablettia ravistetaan perusteellisesti ja jätetään 16 - 25 °C:n lämpötilaan 30 - 40 minuutiksi, kunnes erytrosyyttien sedimentaatio on täydellinen kontrollissa.

Tulosten laskenta ja tulkinta

Veriseerumien seulonnan tulosten huomioiminen

Tulosten kirjanpito suoritetaan neljän ristin ehdollisella asteikolla. Seerumin tiitteri on sen laimennus, joka antaa hemagglutinaation vähintään 3 (+++) risteyksellä.

• ++++ (4+) - agglutinoidut erytrosyytit muodostavat käänteisen "sateenvarjon" reiän pohjalle, sen reunat putoavat;
• +++ (3+) - agglutinoidut erytrosyytit muodostavat käänteisen "sateenvarjon" reiän pohjalle, sen reunat ovat tasaiset;
• ++ (2+) - agglutinoituneiden erytrosyyttien ohella reiän pohjassa on sedimentti pienen agglutinoitumattomien punasolujen "renkaan" muodossa;
• + (1+) - useimmat punasolut eivät agglutinoidu ja asettuvat pienen "renkaan" muodossa;
• (-) - agglutinoitumattomat erytrosyytit muodostavat "pisteen" kuopan pohjalle.

Positiivisena tuloksena pidetään Vi-antigeenilla ladattujen punasolujen hemagglutinaatiota vähintään kolmella ristillä (+++).

Diagnostiikan laadunvalvonta on kontrollirivin 4 kaivoa, joihin lisättiin vain PBS-liuos ja SED. Näissä kaivoissa ei pitäisi olla spontaania hemagglutinaatiota - reaktio on negatiivinen (-). Muussa tapauksessa tutkimus on toistettava. Jos hemagglutinaatio ilmenee uudelleenvaiheen aikana, lääkettä ei käytetä.

Negatiivisen tuloksen saaneiden seerumien ei katsota sisältävän Vi-antigeenin vasta-aineita diagnostisessa tiitterissä 1:40 tai alle.

Seerumit, jotka antavat positiivisen tuloksen laimennuksella 1:40, tulee tutkia uudelleen variantissa seerumititrauksella sen tiitterin määrittämiseksi.

Tulosten huomioon ottaminen veriseerumit titrattaessa

Seerumin tiitteri on sen laimennus, joka antaa hemagglutinaation vähintään 3 (+++) risteyksellä.

Diagnostiikan laadunvalvonta on SED:n ohjausrivin kaivoja. Näissä kaivoissa ei pitäisi olla spontaania hemagglutinaatiota - reaktio on negatiivinen (-). Muussa tapauksessa tutkimus on toistettava. Jos hemagglutinaatio ilmenee uudelleenvaiheen aikana, lääkettä ei käytetä.