Menetelmät hermokudoksen tutkimiseen. Johdanto

Histologinen valmistelu on pääasiallinen tutkimuksen kohde.

Sen tulee olla ohut (5-10 µm), läpinäkyvä, helposti läpäisevä valonsäde ja se voi olla ohut osa elimestä, kokonainen valmiste (esim. pia mater), elimen jälki (esim. , maksan tai pernan jälki), sively (esim. veri- tai luuydinnäyte), kudoskalvo (löysä sidekudos).

Histologian klassinen ja pääasiallinen tutkimuskohde on edelleen kiinteä ja värjätty kudoksen tai elimen osa.

Histologisen valmisteen valmistusprosessi sisältää seuraavat päävaiheet:

1) materiaalin ottaminen ja kiinnittäminen;

2) materiaalin tiivistäminen;

3) osien tekeminen;

4) osien värjäys;

5) osien päättäminen balsamiin tai muuhun läpinäkyvään väliaineeseen (polystyreeni, selloidiini).

Mikrovalmistekiinnitys

Kiinnitys koostuu siitä, että elimestä otettu pieni pala (3-5 mm) upotetaan kiinnitysaineeseen (formaliini, 70 0 alkoholi jne.). Kiinnitys estää hajoamisprosesseja ja myötävaikuttaa siten rakenteiden eheyden säilymiseen, proteiinien koaguloitumiseen ja elintärkeän toiminnan lakkaamiseen, ja rakenteet kuolevat, kiinnittyvät.

Mikrovalmistetiivistys

Tiivistystä varten kappaleita, käytetään erilaisia ​​aineita, useimmiten parafiinia, selloidiinia, orgaanisia hartseja. Tiivistysaineeseen kaadetut palat saavat plastisuuden, joka on tarpeen ohuiden osien valmistukseen niistä.

Leikkaaminen

Osion valmistelu paksuus 5-50 mikronia valmistetaan erityisillä laitteilla - mikrotomeilla .

Leikkauksen värjäys

Väritys viipaleita käytetään lisäämään yksittäisten histologisten rakenteiden kontrastia, kun niitä tarkastellaan mikroskoopilla. Histologisten leikkeiden värjäysmenetelmät ovat hyvin erilaisia. Kun osia käsitellään väriaineilla, tapahtuu monimutkaisia ​​kemiallisia ja fysikaalisia prosesseja.

Histologiset värjäykset jaetaan hapan, emäksinen ja neutraali.

Rakenteita, jotka värjäytyvät hyvin happamilla väriaineilla, kutsutaan oksifiilinen ja värjätty perusväreillä - basofiilinen. Sekä happamia että emäksisiä väriaineita hyväksyvät rakenteet ovat heterofiiliset tai neurofiiliset. Yleisimmin käytetyt väriaineet ovat hematoksyliini ja eosiini. Hematoksyliini värjää soluytimet violetiksi, eosiini on hapan väriaine, joka värjää sytoplasman vaaleanpunaisen keltaiseksi. Värilliset valmisteet dehydratoidaan edelleen vahvuudeltaan lisääntyvissä alkoholeissa ja kirkastetaan ksyleenissä.

Pitkäaikaisvarastointiin, histologinen leike päätellä dian ja kansilasin väliin balsamiin tai muihin aineisiin. Valmis histologinen valmiste voidaan varastoida useita vuosia ja käyttää mikroskoopilla tutkimiseen.

Menetelmät hermo- ja elastisten kudosten elementtien tunnistamiseksi.

Histologista tutkimusta varten oleva hermokudos kaadetaan parafiiniin, selloidiiniin ja gelatiiniin. Parafiiniin ja selloidiiniin kaatamisen tekniikalla ei ole tässä vaiheessa hermokudoksen käsittelyn erityispiirteitä

Histokemia.

Histokemia, histologian haara, joka tutkii eläin- ja kasvikudosten kemiallisia ominaisuuksia.

G.:n tehtävänä on selvittää kudossolujen (katso solu) ja interstitiaalisen väliaineen aineenvaihdunnan ominaisuuksia. Se tutkii solujen ominaisuuksien muutoksia kehityksen aikana, työn, aineenvaihdunnan ja kypsien solujen ja kudosten uusiutumisen välistä suhdetta. Histokemiallisten tekniikoiden perusperiaate on solujen tietyn kemiallisen komponentin sitominen väriaineella tai värin muodostuminen reaktion aikana. Useat menetelmät (sytofotometria, luminesenssi- ja interferenssimikroskopia) perustuvat aineiden fysikaalisiin ominaisuuksiin. Erilaisten histokemiallisten menetelmien avulla voidaan määrittää monien aineiden sijainti ja määrä kudoksissa, niiden aineenvaihdunta (kudosautoradiografia), yhteydet submikroskooppiseen rakenteeseen (elektroninen morfologia) sekä entsyymien aktiivisuus. Myös immunohistokemia on lupaava suunta. Tarkimmat histokemialliset menetelmät, joiden avulla voit tutkia solun rakennetta, kutsutaan sytokemiallisiksi (katso Sytokemia).

Ensimmäiset erityiset histokemialliset tutkimukset kuuluivat ranskalaiselle tiedemiehelle F. Raspailille (1825-34). G. alkoi kehittyä intensiivisesti 40-luvulta lähtien. 1900-luvulla, jolloin syntyi luotettavat menetelmät proteiinien, nukleiinihappojen, lipidien, polysakkaridien ja joidenkin solun epäorgaanisten komponenttien määrittämiseksi. Histokemiallisten menetelmien avulla pystyttiin esimerkiksi osoittamaan ensimmäistä kertaa RNA-määrän ja proteiinisynteesin muutosten sekä kromosomijoukon DNA-pitoisuuden pysyvyyden välinen suhde.

Tieteellisen tosiasian vahvistamista aivojen roolista henkisen toiminnan elimenä voidaan epäilemättä pitää ihmiskunnan tärkeimpänä tieteellisenä löytönä. Todisteet siitä, että henkinen toiminta on ilmentymä aivojen ja erityisesti aivokuoren toiminnallisesta toiminnasta, perustuu erilaisiin anatomisiin tietoihin, embryologiaan, fysiologiaan, patologiseen anatomiaan ja histologiaan sekä useiden vuosien kliinisiin havaintoihin.

Aivoista henkisen toiminnan elimenä on nyt tullut useiden tieteenalojen tieteellisten etujen keskipiste. Jos aikaisemmat teoriat hermoston toiminnasta perustuivat puhtaasti mekanistisiin käsitteisiin, niin nykyään aivoja pidetään integraalityypin monimutkaisimpana laitteena, joka varmistaa hermoston eri rakenteiden vuorovaikutuksen maksimaalisen sopeutumisen varmistamiseksi. ihminen kokonaisuutena muuttuviin ulkoisen ja sisäisen ympäristön olosuhteisiin.

Mielen toiminnan aineellisen substraatin tutkimisen ongelma, joka oli pitkään ollut monien tieteellisten ja yleisten filosofisten suuntausten eturintamassa, herättää edelleen suurta teoreettista ja käytännön mielenkiintoa. Uusien erittäin informatiivisten menetelmien syntyminen hermoston rakenteen ja toiminnan tutkimiseksi, mukaan lukien tutkimuksen molekyylitaso, sekä psykologisten ideoiden kehittäminen ihmisen henkisen toiminnan systeemisestä organisoinnista määritti strategisesti tämän suunnan edistymisen.

Uusien menetelmien käyttö eri hermostorakenteiden toiminnallisen tarkoituksen tutkimiseksi niiden leesioiden tarkimman paikallisen diagnoosin saamiseksi oli voimakas sysäys psykologisten prosessien morfologisia substraatteja koskevien perusajatusten tarkistamiseen ja ihmisen henkisen toiminnan piirteiden selittämiseen.

Nykyaikaiset menetelmät hermoston rakenteellisen ja toiminnallisen organisaation tutkimiseksi voidaan jakaa morfologisiin, kliinisiin ja kokeellisiin, vaikka tämä luokittelu on melko mielivaltainen.

I. Morfologiset menetelmät hermoston tutkimiseen Sisällytä seuraavat.

• 1. neurohistologiset menetelmät. Erikoistekniikoiden avulla valmistetaan kudosleikkeitä ja ne värjätään erilaisilla väreillä. Mikroskooppista valoa ja luminesenssitekniikkaa käytetään hermostorakenteiden tutkimiseen.
• 2. Elektronimikroskopia. Tätä varten tehdään ultraohuita leikkeitä, värjätään erityismenetelmin, ja hermosolujen komponentteja ja solunsisäisiä rakenteita tutkitaan suurilla suurennoksilla.
• 3. Konfokaalinen laserpyyhkäisymikroskopia. Tämä menetelmä perustuu fluoresenssin havaitsemiseen lasersäteen fokuksessa, mikä mahdollistaa joidenkin rakenteiden, mukaan lukien yksittäisten hermosolujen, kolmiulotteisen rekonstruoinnin.
• 4. Soluviljelmän tutkimus. Yhtä tai useampaa hermosolupopulaatiota viljellään keinotekoisessa väliaineessa. Aivojen eloonjääneitä kudoksia ja soluviljelmiä kasvatetaan erityisillä alustoilla muuttamalla tiettyjen aineiden suhdetta käyttämällä erilaisia ​​kudoshormoneja. Tämän tutkimuksen avulla voidaan tutkia yksittäisten hermosolujen ja niiden prosessien rakennetta ja toimintamekanismeja, niiden glia- ja verisuoniympäristön merkitystä jne.
• 5. Neurohistokemialliset menetelmät. Ne perustuvat erityisten merkkiaineiden, kuten piparjuuriperoksidaasin, lusiferinkeltaisen jne. käyttöön. Esimerkiksi keinotekoisen annon jälkeen piparjuuriperoksidaasi imeytyy aktiivisesti hermosolujen prosesseihin ja kuljetetaan solurunkoon. Tämän avulla voit muodostaa tutkittujen rakenteiden interneuronaalisia yhteyksiä.
• 6. Radioautografia. Radioaktiivista leimaa käyttämällä sen liike hermosolurakenteessa havaitaan in vivo. Leima voidaan liittää useisiin eri aineisiin (glukoosi, aminohapot, nukleotidit, oligopeptidit jne.). Neuronien kehot imevät radioaktiivista materiaalia ja kuljettavat sitä aksoneitaan pitkin. Tämä menetelmä ei määritä vain hermorakenteiden sijaintia, vaan myös niiden toimintaa.
• 7. Monoklonaalisten vasta-aineiden käyttö. Tämän menetelmän avulla voit tunnistaa tiukasti määritellyt neuroniryhmät niiden muodostaman välittäjän perusteella. Antigeeni-vasta-ainereaktion kehittymisen seurauksena on mahdollista kiinnittää hermokudoksen tila solukuoleman hetkellä ja siten muodostaa käsitys aivojen intravitaalisesta organisaatiosta.

II. Kliiniset menetelmät hermoston tutkimiseen Sisällytä seuraavat.

• 1. Aivojen laskennallinen ja magneettikuvaus. Näiden menetelmien avulla voidaan selvittää selkäytimen ja aivojen anatomisen organisaation piirteitä, arvioida niiden vaurioiden paikallisia alueita.
• 2. Positroniemissiotomografia. Menetelmä perustuu lyhytikäisen positroneita emittoivan isotoopin viemiseen aivoverenkiertoon. Tiedot radioaktiivisuuden jakautumisesta aivoissa käsitellään aivojen kolmiulotteisena rekonstruktiona, ja sen avulla voidaan arvioida aineenvaihdunnan intensiteettiä ja aivoalueiden toiminnallista aktiivisuutta verenvirtauksen jakautumisesta riippuen. ja mahdollistavat myös aktiivisten aivojen rakenteiden kartoittamisen in vivo.
• 3. Elektroenkefalografia (EEG). Menetelmä perustuu aivokuoren solujen kokonaisaktiivisuuden kirjaamiseen, joka suoritetaan käyttämällä päänahan pinnalle asetettuja elektrodeja.
• 4. Sähkökortikografia ja sähkösubkortikografia. Näillä menetelmillä tallennetaan aivokuoren ja aivokuoren rakenteiden sähköiset ilmiöt - mikroelektrodit viedään tietyille aivokuoren alueille ja aivokuoren ytimiin. Nämä menetelmät, toisin kuin EEG, antavat mahdollisuuden arvioida yksittäisten solujen toiminnallista tilaa eikä kokonaisen hermosoluryhmän aktiivisuusastetta, jotta voidaan selvittää tietyn hermosolun sijainti ja erikoistuminen. Niitä voidaan käyttää aivojen kirurgisten toimenpiteiden aikana.
• 5. Reoenkefalografia (REG). Tämä on menetelmä aivosuonien veren täyttöasteen tutkimiseksi, jonka avulla voidaan epäsuorasti arvioida sen eri osastojen toiminnallista toimintaa.

III. Kokeelliset menetelmät hermoston tutkimiseen Sisällytä seuraavat.

• 1. Menetelmä hermokudoksen tuhoamiseksi. Tällä menetelmällä selvitetään tutkittavien rakenteiden toimintoja. Se suoritetaan hermorakenteiden neurokirurgisten risteysten avulla vaaditulla tasolla tai tuhoamalla tarvittavat rakenteet elektrodien ja mikroelektrodien avulla, kun sähkövirta kulkee niiden läpi.
• 2. poistomenetelmä. Tietyt hermokudoksen alueet poistetaan eläimestä kirurgisesti, jolloin huomioidaan käynnissä olevat muutokset sen jälkeen, kun ne on poistettu skalpellilla tai kemiallisesti altistetaan aineille, jotka voivat aiheuttaa hermosolujen valikoivaa kuolemaa. Samaan menetelmäryhmään kuuluvat kliiniset havainnot erilaisista hermorakenteiden vammoista (sotilaalliset ja kotimaiset) vammojen seurauksena.
• 3. Neuraalitoiminnan menetelmä. Se perustuu tutkitun hermosolun sähköisen aktiivisuuden tallentamiseen solunsisäisellä elektrodilla.
• 4. ärsytysmenetelmä. Se perustuu hermoston eri rakenteiden stimulaatioon sähkövirralla tai kemikaaleilla, joiden yhteydessä ne erottavat:
  • a) reseptorien ärsytys ja niiden keskushermoston rakenteiden määrittäminen, joissa viritystä tapahtuu;
  • b) keskushermoston vyöhykkeiden ärsytys ja vasteen tarkkailu (Sechenovin koe).
  • c) stereotaksinen sähköstimulaatio - keskushermoston tiettyjen ytimien stimulointi mikroelektrodeilla ja käynnissä olevien muutosten rekisteröinti. Tämä menetelmä paljasti aivokuoren somatotonia ja kartoitti aivokuoren motorisen alueen.

On ymmärrettävä, että mikään näistä menetelmistä ei voi täysin selittää kaikkia hermoston eri rakenteiden rakenteen ja toiminnan ominaisuuksia. Ainoastaan ​​monien erilaisten tutkimusten tulosten integrointi, kun otetaan huomioon hermostorakenne integraalijärjestelmän tasolta molekyylibiokemiallisten ja biofysikaalisten tutkimusten aineistoon, pystyy ratkaisemaan tutkijan eteen nousevia kysymyksiä.

Henkisten prosessien erityisten analyysimuotojen käyttö erilaisten aivorakenteiden rikkomuksissa mahdollisti havaintojen, tunteiden, ajattelun, muistin, puheen jne. sisäisen psykofysiologisen olemuksen ymmärtämisen.

Funktionaalisen anatomian läheinen yhteys sellaisiin lääketieteellisen ja psykologisen tiedon osa-alueisiin kuin neurologia, puheterapia, erikoispsykologia jne. mahdollistaa kiireellisten teoreettisen, kliinisen lääketieteen ja psykologian ongelmien ratkaisemisen.

Lyhyt historiallinen retki. Ensimmäiset yritykset ratkaista ihmiskehon rakenteellisen organisaation ja henkisten prosessien kulun piirteiden ymmärtämisen väliset suhteet suoritettiin olemassa olevien filosofisten ja uskonnollisten näkemysten puitteissa ja kiteytyvät sellaisen elimen etsimiseen, joka voitaisiin katsoa psyyken "säiliön" rooliksi. Antiikin Kreikan tutkijat esittivät lukuisia virheellisiä hypoteeseja henkisten toimintojen lokalisoinnista. Varhaisimmat ideat kiteytyvät siihen tosiasiaan, että koko keho on vastuussa henkisten toimintojen toteuttamisesta. Myöhemmin he alkoivat uskoa, että kehon ja henkisen elämän päätekijä on verenkiertojärjestelmä. Antiikin Kreikan opetuksissa "pneuma" oli erityisen tärkeä erityisenä ohuimpana aineena, joka kiertää verisuonten läpi ja suorittaa psyyken pääsubstraatin tehtävää.

On huomattava, että henkisten toimintojen humoraalisen hypoteesin ohella (kreikasta. huumori - neste) oli muitakin. Siten viitteet siitä, että aivot ovat tunne- ja ajatuselin, kuuluvat antiikin kreikkalaiselle lääkärille Alkmaeon Crotonista(VI vuosisata eKr.), joka tuli samanlaiseen johtopäätökseen kirurgisten toimenpiteiden ja potilaiden käyttäytymisen havaintojen seurauksena. Erityisesti hän väitti, että tunne syntyy perifeeristen sensorilaitteiden erityisestä rakenteesta, jolla on suora yhteys aivoihin.

Tärkeimmät tiedemiehet, jotka yrittivät ymmärtää ihmisen henkisen toiminnan salaisuudet, tulisi nimetä.

Pythagoras(570-490 eKr.) - filosofi ja sielun kuolemattomuuden opin perustaja ja sen siirtäminen ruumiista ruumiiseen fyysisen elämän lopussa. Hän korreloi mielen toiminnan aivojen kanssa ja piti sydäntä sielun istuimena.

Hippokrates(noin 460 eKr. - noin 370 eKr.) uskoivat, että aivot ovat suuri sienimäinen rauhanen ja henkisiin toimintoihin osallistuva elin. Myöhemmin hän loi opin neljästä nesteestä (veri, lima, musta ja keltainen sappi), joiden yhdistelmä määrittää ihmisen terveyden ja henkisen ominaisuudet. Hän yhdisti tunteet ja intohimot sydämeen.

Aristoteles(384-322 eKr.) muotoili opin "terveestä järkevyydestä". Sen ydin oli, että kuvien havaitsemista varten on aistielimiä ja keskuselin - aivot, jotka suorittavat samanaikaisesti kosketuselimen roolia. Aristoteleen sielun elin oli sydän, ja aivoja pidettiin rauhasena, joka erittää limaa jäähdyttämään "sydämen lämpöä" ja verta.

Herophilus(335-280 eKr.) ja Erazistrat(304-250 eKr.), ruumiinavausten perusteella, he alkoivat erottaa hermoja, joita ei aiemmin ollut erottuva nivelsiteiden ja jänteiden välillä, ja havaittiin myös eroja sensoristen ja motoristen hermojen välillä. Lisäksi he kiinnittivät huomiota eroihin aivokuoren helpotuksessa ja uskoivat virheellisesti, että ihmiset eroavat henkisistä kyvyistään konvoluutioiden lukumäärän mukaan.

Claudius Galen(129-210 jKr.) uskoivat, että ajatusprosessit liittyvät aivojen kammioiden nesteeseen sekä sydämeen ja maksaan. Hän edusti hermostoa haarautuneen rungon muodossa, jonka jokainen haara elää itsenäistä elämää.

Andreas Vesalius(1514-1564) - anatomian uudistaja, tutki aivojen rakennetta riittävän yksityiskohtaisesti ja tuli siihen tulokseen, että henkisten prosessien aineellinen substraatti on aivojen aine, ei kammiojärjestelmä.

R. Descartes(1596-1650), joka harjoitti matemaattista ja fysiologista tutkimusta, kehitti refleksin käsitteen. Hänen ideoidensa mukaan organismin vuorovaikutusta ulkomaailman kanssa välittää hermosto, joka koostuu aivoista (keskuksena) ja niistä poikkeavista "hermoputkista". Hänen ideoidensa mukaan sielu sijoittui käpyrauhaseen, joka tarttui elävien henkien pienimmätkin liikkeet ja vaikutelmien vaikutuksesta ohjasi ne lihaksiin. Tästä johtuen ulkoisten ärsykkeiden toiminta tunnustettiin ensisijaiseksi motoristen toimintojen syyksi.

XVII-XVTTI-luvuilla. kokeellisia menetelmiä aivorakenteiden toiminnallisen tarkoituksen tutkimiseksi, jotka perustuvat sen yksittäisten osien poistamiseen, alettiin harjoittaa laajasti. He kehittivät merkittävästi ajatuksia henkisten prosessien ja niiden mahdollisen aineellisen kantajan välisestä yhteydestä. Kyllä, englantilainen anatomi T. Willis(1621-1675) toi ensimmäisenä esiin "harmaan aineen" (aivokuoren) roolin eläimen "hengen" kantajana. Aivojen "valkoinen aine" (valkoinen aine) hänen mielestään varmistaa "hengen" toimittamisen muihin kehon osiin ja tarjoaa niille tuntemuksia ja liikettä. Hän kuuluu yhteen ensimmäisistä mielipiteistä corpus callosumin yhdistävästä roolista kahden pallonpuoliskon työssä.

Tunnetuimpia ovat 1800-luvun alun suurimman anatomin tutkimukset. F. Gall(1758-1828). Hän kuvasi ensin harmaan ja valkoisen aineen eroja, ehdotti, että ihmisen henkiset ja psyykkiset kyvyt liittyvät erillisiin, rajoitettuihin aivojen alueisiin, jotka kasvaessaan muodostavat kallon ulkoisen kohokuvion, jonka avulla on mahdollista määrittää yksilölliset erot ihmisen kyvyissä. F. Gallin virheelliset frenologiset kartat, jotka edustivat järjetöntä yritystä projisoida aivokuoren eri toiminnallisia alueita kalloon, unohdettiin pian, mutta ne toimivat sysäyksenä yksittäisten käänteiden roolin tutkimisen jatkamiselle.

Proceedings M. Daxa(1771-1837) ja J. B. Buyo (1796-1881), lääketieteellisten havaintojen perusteella tehdyt olettamukset puheen menetyksestä paikallisten aivovaurioiden seurauksena. Kuitenkin vasta vuonna 1861 ranskalainen anatomi ja kirurgi P. Broca(1824-1880) puhui tästä aiheesta Pariisin antropologisen seuran kokouksessa. Hän esitteli aineistoa kahden puheen heikkenemisen sairastavan potilaan tutkimuksesta kiinnittäen huomiota siihen, että tämä liittyy vasemman pallonpuoliskon alareunan gyrus-vaurioihin. Siten P. Broca loi perustan aivokuoren toimintojen dynaamisen lokalisoinnin teorialle.

P. Brockin havainnot stimuloivat useita tutkimuksia, jotka liittyivät tiettyjen aivojen osien stimulointiin sähkövirralla. Vuonna 1874 saksalainen tiedemies C. Wernicke(1848-1905) kuvasivat kliinisiä tapauksia potilailla, joilla oli heikentynyt ymmärrys käänteisestä puheesta ja joilla oli leesio ylemmän temporaalisen gyrusen takaosissa.

E. Gitzig(1807-1875), joka ärsytti kallovaurioita sairastavien potilaiden aivoja heikolla sähkövirralla, havaitsi, että nämä vaikutukset aivojen takaosassa saivat silmät liikkumaan. Hän avasi aivopuoliskon visuaalisen aivokuoren.

1800-luvun loppu leimattiin lokalisointitutkijoiden suurimmilla menestyksillä, jotka uskoivat, että aivojen rajoitettu alue voisi olla minkä tahansa henkisen toiminnan "aivokeskus". Todettiin, että aivojen takaraivolohkojen vauriot aiheuttavat näköhäiriöitä ja parietaalialueen vauriot aiheuttavat kyvyn suorittaa tarkoituksenmukaista toimintaa oikein. Myöhemmin aivokuoressa tunnistettiin "kirjoituskeskus", "laskentakeskus" jne. Samaan aikaan tutkimukset näyttävät vasta-argumenttina, joka viittaa tiettyjen toimintojen epätäydelliseen menettämiseen paikallisissa aivovaurioissa, niiden yhteydestä tutkintoon. yleisestä aivoaineen katoamisesta.

Kyllä, englantilainen neurologi D. H. Jackson(1835–1911), joka perustuu dynaamiseen lähestymistapaan, perusti teorian keskushermoston toiminnan kolmitasoisesta organisoinnista. Hänen mukaansa toiminta on seurausta monimutkaisen "vertikaalisen" organisaation toiminnasta: alempaa tasoa edustavat aivorungon alueet, keskitasoa edustavat aivokuoren sensoriset ja motoriset alueet ja korkein on aivorungon alueet. edustavat sen etuosat. Hän ehdotti myös, että aivojen patologiset prosessit eivät ilmene vain joidenkin toimintojen menettämisenä, vaan myös muiden toimintojen kompensoivana aktivoitumisena. Siten häiriötä ei tulisi arvioida vain toimintojen menettämisen oireiden perusteella, vaan myös vapautumisen ja vastavuoroisen (antagonistisen) aktivoitumisen oireiden perusteella.

1800-luvun kuuluisa patologi. R. Virchow(1821 - 1902) perustivat patologian soluteorian, joka toimi kannustimena yksittäisten hermosolujen roolin tutkimiseen. Soluteorian valossa itävaltalainen tiedemies T. Meinert(1833-1892) kuvaili yksittäisiä aivokuoren soluja ja antoi niille mielenterveyden prosessien kantajan toiminnan. Kiovan anatomi V. A. Vedot(1834–1894) löysivät jättimäisiä pyramidisoluja aivokuoren etummaisesta keskikerroksesta ja yhdistävät ne motoristen toimintojen suorituskykyyn. Espanjalainen histologi ja neuroanatomi S. Ramon y Cajal(1852-1934) perustivat hermoston rakenteen hermoteorian ja osoittivat sen monimutkaisuuden ja järjestyksen korkean asteen.

Henkisten toimintojen lokalisoinnin arvioimiseen rajoitetuilla aivojen alueilla liittyi laajan materiaalin vastaanottaminen, jonka perusteella vuonna 1934 saksalainen psykiatri K. Kleist(1879-1960), joka tutki sotilaallisista aivovammoista johtuvia korkeampien henkisten toimintojen häiriöitä, laati aivojen lokalisointikartan. Siinä hän korreloi yksilön, mukaan lukien sosiaalisesti määrätyt, toiminnot tiettyjen aivokuoren alueiden toiminnan kanssa.

Tieteelliset teokset tunnetaan hyvin K. Brodman(1868–1918) histologisiin tutkimuksiin perustuvalla aivokuoren sytoarkkitehtonisella kartalla. Hän tunnisti yli 50 aivojen aluetta erilaisilla solurakenteilla. Siten XIX vuosisadan lopussa. aivojen toimintaa koskevien tieteellisten näkemysten järjestelmä pelkistettiin ajatukseen siitä, että se on kokoelma "keskuksia", joihin on paikannettu erilaisia ​​itsenäisiä kykyjä.

Fysiologinen suunta korkeampien henkisten toimintojen lokalisoinnin tutkimuksessa alkoi syntyä 1800-luvun puolivälistä lähtien. ja kehittynein Venäjällä. Tiukan anatomisen lokalisoinnin teorian ensimmäinen kriitikko oli I. M. Sechenov(1829-1905). Hän esitti näkemyksensä kirjassa "Reflexes of the Brain".

P. F. Lesgaft(1837–1909) perusteli ensimmäisenä fyysisen kasvatuksen suunnatun vaikutuksen mahdollisuutta ihmiskehoon muuttaa tiettyjä ominaisuuksia sadassa rakenteessa. Kiitos A:n työstä. F. Lesgaft, joka perustui ajatukseen organismin ja ympäristön yhtenäisyydestä, muodosta ja toiminnasta, loi perustan anatomian toiminnalliselle suunnalle. P. F. Lesgaft ei ollut vain erinomainen lääkäri ja anatomi, vaan myös opettaja ja psykologi. Vuonna 1884 julkaistiin ensimmäinen painos hänen kirjastaan ​​School Types, joka oli tulos 20 vuotta kestäneestä lasten ja nuorten persoonallisuutta koskevasta tutkimuksesta. Hän erotti kuusi koululaisten päätyyppiä ja kuvasi heidän ominaispiirteitään. Ehdotetuissa "koulutyypeissä" Π. F. Lesgaft piti henkilökohtaisia ​​luonnehdintoja ympäristön ulkoisten sosiopsykologisten tekijöiden ja yksilöllisen taipumuksen yhdistelmänä. Useissa teoksissa kirjailija yritti ennustaa lasten käyttäytymistä eri ikäkausina. Tämän kirjan myötä Venäjällä alkoi sellaisen psykologian suunnan kehittäminen kuin pedagoginen psykologia.

V. M. Bekhterev(1857-1927) - erinomainen kotimainen neuropatologi ja psykiatri, joka antoi merkittävän panoksen aivojen ja selkäytimen toiminnallisen anatomian tutkimukseen. Hän laajensi merkittävästi oppia toimintojen lokalisoinnista aivokuoressa, syvensi refleksiteoriaa. Valmisteltaessa tieteellistä työtä "Aivojen ja selkäytimen johtamisreitit" (1894) hän löysi useita aivojen keskuksia, jotka myöhemmin saivat hänen nimensä.

Merkittävä panos annettiin hermotoiminnan kysymysten tutkimukseen I. P. Pavlov(1849-1936). Hän kehitti tutkimuksia toimintojen dynaamisesta lokalisoinnista, aivojen vaihtelevuudesta viritys- ja estoprosessien avaruudellisessa orientaatiossa. Hänen töissään muotoiltiin ja perusteltiin ajatuksia ensimmäisestä ja toisesta signaalijärjestelmästä, kehitettiin käsite analysaattoreiden kolmitasoisesta organisaatiosta.

XX vuosisadan ensimmäisellä puoliskolla. Englantilainen fysiologi C. Sherrington(1857–1952) perusteli oppia hermokontakteista - synapseista. Hän suoritti kokeita löytääkseen yhteyksiä heikon sähkövirran ärsyttämien motorisen aivokuoren vyöhykkeiden ja kehon vastakkaisen puolen tiukasti määriteltyjen lihasten reaktioiden välille. Myöhemmin kanadalainen neurokirurgi käytti samankaltaisten metodologisten periaatteiden kehittämistä W. Penfield(1891–1976), joka perusti teorian lokalisaatiosta (projektiosta) ihmiskehon eri osien aivokuoren sensorisilla ja motorisilla alueilla.

Ensimmäiset neuropsykologiset tutkimukset aloitettiin maassamme L.S. Vygotsky(1896–1934). Hän analysoi muutoksia, joita esiintyy korkeammissa henkisissä toiminnoissa aivojen paikallisilla vaurioilla, kuvasi toimintojen dynaamisen lokalisoinnin periaatteet, jotka erottavat ihmisen aivojen työn eläinten aivojen työstä.

Tämä neuromorfologian ja fysiologian osa muutettiin teoreettisten näkemysten yhtenäiseksi järjestelmäksi A. R. Luria(1902–1977) ja hänen oppilaansa. He ovat keränneet ja systematisoineet valtavan määrän faktamateriaalia otsalohkojen ja muiden aivorakenteiden roolista henkisten prosessien organisoinnissa, tiivistäneet lukuisia aikaisempia tutkimuksia ja jatkaneet yksittäisten mielentoimintojen - muistin, puheen, älyllisten prosessien - häiriöiden tutkimusta. , vapaaehtoisia liikkeitä ja toimia paikallisissa aivovaurioissa, analysoidaan niiden toipumisen ominaisuuksia.

Merkittävä vaikutus henkisten toimintojen ja aivojen välisen suhteen ymmärtämiseen oli N. A. Bernstein(1896–1966) ja P. K. Anokhina(1898–1974), joka perusti toiminnallisten järjestelmien teorian.

B. G. Ananiev(1907–1972) ja hänen opiskelijansa suorittivat sarjan töitä, jotka omistivat henkisen toiminnan kahdenvälisen aivojen säätelyn roolin tutkimisen. Nämä työt johtivat useiden tärkeiden säännösten muotoiluun aivopuoliskojen yhdistetyn työn roolista avaruudellisessa orientaatiossa ja sitten yleisissä prosesseissa, joilla ohjataan elävän organismin elintärkeää toimintaa ja käyttäytymistä. Hän loi myös käsitteen aistiteoriasta ja ihmisen analysaattorijärjestelmän toiminnallisen rakenteen synnystä.

Akateemikko Η. P. Bekhtereva(1924–2008) on vuosien varrella tutkittu aivokuoren muodostelmien roolia erilaisten henkisten prosessien toteuttamisessa.

Erinomaiset Leningradin tiedemiehet Η. N. Traugott, L. I. Wasserman ja Ja A. Meyerson 1900-luvun puolivälissä. perusteli teoriaa aivoista järjestelmänä, joka havaitsee, tallentaa ja käsittelee tietoa. He esittelivät uusia käsitteitä, joista tuli myöhemmin klassisia, "satunnaismuisti", "viestisuodatus", "kohinankestävyys", "tiedon tilastollinen koodaus", "päätöksenteko" jne.

XX lopulla - XXI vuosisadan alussa. tutkimuksia aivorakenteiden ja niiden suorittamien toimintojen välisestä suhteesta jatkettiin. Tämän ansiosta klassiset ajatukset henkisten toimintojen lokalisoinnista aivokuoressa tarkistettiin.

Monipuoliset tutkimukset ovat osoittaneet, että toisin kuin somaattisten tai vegetatiivisten refleksien aiheuttamat ja tietyn hermosoluryhmän selkeästi hallitsemat perustoiminnalliset prosessit, korkeammat henkiset toiminnot eivät voi sijaita tiukasti määritellyillä aivokuoren alueilla. Ne muodostavat monimutkaisia ​​järjestelmiä yhdessä työskentelevistä vyöhykkeistä, joista jokainen edistää monimutkaisten henkisten prosessien toteuttamista. Lisäksi ne voivat sijaita aivojen eri osissa, mikä tarjoaa tietyn hierarkkisen järjestelmän. Tämä lähestymistapa muuttaa myös psykologin käytännön työtä.

Sen ymmärtäminen, että henkinen toiminta on monimutkainen toiminnallinen järjestelmä, joka perustuu hermostorakenteiden erityiseen yhteyteen, mahdollistaa sen, että voimme lähestyä hermoston eri rakenteissa, erityisesti aivoissa, esiintyvien mielentoiminnan häiriöiden lokalisoitumista koskevien kysymysten ratkaisua. uusi tapa. Tämä avaa laajat horisontit sairauksien polymorfisen lokalisoinnin ymmärtämiselle ja niiden asianmukaiselle korjaamiselle.

Artikkelin sisältö

HISTOLOGIA, tiede, joka tutkii eläinkudoksia. Kudos on joukko soluja, jotka ovat samanlaisia ​​muodoltaan, kooltaan ja toiminnaltaan sekä aineenvaihduntatuotteiltaan. Kaikissa kasveissa ja eläimissä, primitiivisimpiä lukuun ottamatta, keho koostuu kudoksista, ja korkeammissa kasveissa ja hyvin organisoituneissa eläimissä kudokset erottuvat rakenteensa ja tuotteidensa monimutkaisuudesta; eri kudokset muodostavat erillisiä elimiä kehossa yhdistyessään keskenään.

Histologia on eläinkudosten tutkimus; kasvikudosten tutkimista kutsutaan yleensä kasvin anatomiaksi. Histologiaa kutsutaan joskus mikroskooppiseksi anatomiaksi, koska se tutkii kehon rakennetta (morfologiaa) mikroskooppisella tasolla (hitologisen tutkimuksen kohteena ovat erittäin ohuet kudosleikkeet ja yksittäiset solut). Vaikka tämä tiede on ensisijaisesti kuvaileva, sen tehtävänä on myös tulkita niitä muutoksia, jotka tapahtuvat kudoksissa normaaleissa ja patologisissa olosuhteissa. Siksi histologin on oltava hyvin perehtynyt siihen, kuinka kudokset muodostuvat alkion kehitysprosessissa, mikä on niiden kyky kasvaa sikiön jälkeisellä kaudella ja miten ne muuttuvat erilaisissa luonnollisissa ja kokeellisissa olosuhteissa, mukaan lukien ikääntymisensä ja niiden solujen kuolema.

Histologian historia erillisenä biologian haarana liittyy läheisesti mikroskoopin luomiseen ja sen parantamiseen. M. Malpighia (1628-1694) kutsutaan "mikroskooppisen anatomian" ja siksi histologian isäksi. Histologiaa rikastuivat havainnot ja tutkimusmenetelmät, joita tekivät tai luovat monet tutkijat, joiden pääintressit olivat eläintieteen tai lääketieteen alalla. Tämän todistaa histologinen terminologia, joka ikuistaa heidän nimensä niiden rakenteiden nimiin, joita he ensin kuvasivat, tai heidän luomiinsa menetelmiin: Langerhansin saarekkeet, Lieberkühn-rauhaset, Kupffer-solut, Malpighian-kerros, Maximov-väri, Giemsa-väri jne.

Tällä hetkellä menetelmät valmisteiden valmistamiseksi ja niiden mikroskooppinen tutkiminen ovat yleistyneet, mikä mahdollistaa yksittäisten solujen tutkimisen. Näitä menetelmiä ovat jäädytetty leikkaustekniikka, faasikontrastimikroskopia, histokemiallinen analyysi, kudosviljely, elektronimikroskopia; jälkimmäinen mahdollistaa solurakenteiden (solukalvot, mitokondriot jne.) yksityiskohtaisen tutkimuksen. Pyyhkäisyelektronimikroskoopilla pystyttiin paljastamaan mielenkiintoinen kolmiulotteinen solujen ja kudosten vapaiden pintojen konfiguraatio, jota ei voida nähdä tavanomaisella mikroskoopilla.

Kudosten alkuperä.

Alkion kehittyminen hedelmöitetyistä munasoluista tapahtuu korkeammissa eläimissä useiden solujen jakautumisen seurauksena (murskaus); tässä tapauksessa muodostuneet solut jakautuvat vähitellen paikoilleen tulevan alkion eri osiin. Aluksi alkiosolut ovat samankaltaisia ​​​​toistensa kanssa, mutta niiden lukumäärän kasvaessa ne alkavat muuttua, hankkien tyypillisiä piirteitä ja kykyä suorittaa tiettyjä erityistoimintoja. Tämä prosessi, jota kutsutaan erilaistumiseksi, johtaa lopulta erilaisten kudosten muodostumiseen. Minkä tahansa eläimen kaikki kudokset tulevat kolmesta alkuperäisestä alkiokerroksesta: 1) ulkokerroksesta tai ektodermista; 2) sisin kerros eli endodermi; ja 3) keskikerros eli mesodermi. Joten esimerkiksi lihakset ja veri ovat mesodermin johdannaisia, suoliston limakalvo kehittyy endodermista ja ektodermi muodostaa sisäkudoksia ja hermostoa
järjestelmä.

pääasialliset kankaat.

Histologit erottavat tavallisesti neljä pääkudosta ihmisissä ja korkeammissa eläimissä: epiteelin, lihaksiston, sidekudoksen (mukaan lukien veri) ja hermoston. Joissakin kudoksissa soluilla on suunnilleen sama muoto ja koko ja ne ovat niin tiukasti vierekkäin, että niiden välillä ei ole lainkaan tai ei juuri lainkaan solujen välistä tilaa; tällaiset kudokset peittävät kehon ulkopinnan ja vuoraavat sen sisäisiä onteloita. Muissa kudoksissa (luu, rusto) solut eivät ole niin tiiviisti pakattuja, ja niitä ympäröi niiden tuottama solujen välinen aine (matriisi). Aivot ja selkäydin muodostavista hermokudoksen soluista (neuronien) lähtevät pitkät prosessit, jotka päättyvät hyvin kauas solurungosta esimerkiksi kosketuskohtiin lihassolujen kanssa. Siten jokainen kudos voidaan erottaa muista solujen sijainnin luonteen perusteella. Joillakin kudoksilla on synsytaalinen rakenne, jossa yhden solun sytoplasmiset prosessit siirtyvät naapurisolujen vastaaviin prosesseihin; tällainen rakenne havaitaan itumesenkyymissa, löysässä sidekudoksessa, verkkokudoksessa, ja sitä voi esiintyä myös joissakin sairauksissa.

Monet elimet koostuvat useista kudostyypeistä, jotka voidaan tunnistaa niiden ominaisesta mikroskooppisesta rakenteesta. Alla on kuvaus kaikkien selkärankaisten tärkeimmistä kudostyypeistä. Selkärangattomilla, sieniä ja selkärankaisia ​​lukuun ottamatta, on myös erikoiskudoksia, jotka ovat samanlaisia ​​kuin selkärankaisten epiteeli-, lihas-, side- ja hermokudokset.

epiteelikudos.

Epiteeli voi koostua hyvin litteistä (hilseilevistä), kuutiomaisista tai lieriömäisistä soluista. Joskus se on monikerroksinen, ts. koostuu useista solukerroksista; tällainen epiteeli muodostaa esimerkiksi ihmisen ihon ulkokerroksen. Muissa kehon osissa, esimerkiksi maha-suolikanavassa, epiteeli on yksikerroksinen, ts. kaikki sen solut ovat yhteydessä alla olevaan tyvikalvoon. Joissakin tapauksissa yksikerroksinen epiteeli voi näyttää monikerroksiselta: jos sen solujen pitkät akselit eivät ole yhdensuuntaisia ​​toistensa kanssa, näyttää siltä, ​​​​että solut ovat eri tasoilla, vaikka itse asiassa ne sijaitsevat samalla pinnalla. pohjakalvo. Tällaista epiteeliä kutsutaan monikerroksiseksi. Epiteelisolujen vapaa reuna on peitetty väreillä, ts. protoplasman ohuita karvamaisia ​​kasvaimia (kuten sädeepiteelilinjat, esimerkiksi henkitorvi) tai päättyy "harjareunukseen" (ohutsuolen vuoraava epiteeli); tämä reuna koostuu ultramikroskooppisista sormimaisista kasvaimista (ns. mikrovillit) solun pinnalla. Suojatoimintojen lisäksi epiteeli toimii elävänä kalvona, jonka läpi solut imevät kaasut ja liuenneet aineet ja vapautuvat ulospäin. Lisäksi epiteeli muodostaa erikoistuneita rakenteita, kuten rauhasia, jotka tuottavat keholle välttämättömiä aineita. Joskus erityssolut ovat hajallaan muiden epiteelisolujen joukossa; esimerkkinä ovat limaa tuottavat pikarisolut kalojen ihon pintakerroksessa tai nisäkkäiden suolen limakalvossa.

Lihas.

Lihaskudos eroaa muusta kyvystään supistua. Tämä ominaisuus johtuu lihassolujen sisäisestä organisaatiosta, joka sisältää suuren määrän submikroskooppisia supistumisrakenteita. Lihaksia on kolmenlaisia: luuranko, jota kutsutaan myös poikkijuovaiseksi tai vapaaehtoiseksi; tasainen tai tahaton; sydänlihas, joka on poikkijuovainen mutta tahaton. Sileä lihaskudos koostuu karan muotoisista yksitumaisista soluista. Poikkijuovaiset lihakset muodostuvat moniytimistä pitkänomaisista supistumisyksiköistä, joilla on tyypillinen poikittaisjuovaisuus, ts. vuorottelevat vaaleat ja tummat raidat kohtisuorassa pitkää akselia vastaan. Sydänlihas koostuu yksitumaisista soluista, jotka on yhdistetty päästä päähän, ja siinä on poikittainen juova; kun taas naapurisolujen supistumisrakenteet on yhdistetty lukuisilla anastomoosilla muodostaen jatkuvan verkon.

Sidekudos.

Sidekudoksia on erilaisia. Selkärankaisten tärkeimmät tukirakenteet koostuvat kahdentyyppisestä sidekudoksesta - luusta ja rustosta. Rustosolut (kondrosyytit) erittävät ympärilleen tiheää elastista pohja-ainetta (matriisia). Luusoluja (osteoklasteja) ympäröi jauhettu aine, joka sisältää suolakertymiä, pääasiassa kalsiumfosfaattia. Näiden kudosten konsistenssi määräytyy yleensä perusaineen luonteen mukaan. Kehon ikääntyessä mineraaliesiintymien pitoisuus luun pohja-aineessa kasvaa ja siitä tulee hauraampaa. Pienillä lapsilla luun pääaine, samoin kuin rusto, on runsaasti orgaanisia aineita; tästä johtuen heillä ei yleensä ole varsinaisia ​​luunmurtumia, vaan ns. murtumat ("vihreän oksan" tyyppiset murtumat). Jänteet koostuvat kuituisesta sidekudoksesta; sen kuidut muodostuvat kollageenista, fibrosyyttien (jännesolujen) erittämästä proteiinista. Rasvakudos sijaitsee kehon eri osissa; Tämä on erikoinen sidekudostyyppi, joka koostuu soluista, joiden keskellä on suuri rasvapallo.

Veri.

Veri on hyvin erityinen sidekudostyyppi; Jotkut histologit jopa erottavat sen itsenäisenä tyyppinä. Selkärankaisten veri koostuu nestemäisestä plasmasta ja muodostuneista elementeistä: punasoluista tai hemoglobiinia sisältävistä punasoluista; erilaisia ​​valkosoluja tai leukosyyttejä (neutrofiilit, eosinofiilit, basofiilit, lymfosyytit ja monosyytit) ja verihiutaleita tai verihiutaleita. Nisäkkäillä verenkiertoon tulevat kypsät punasolut eivät sisällä ytimiä; kaikissa muissa selkärankaisissa (kalat, sammakkoeläimet, matelijat ja linnut) kypsät, toimivat punasolut sisältävät ytimen. Leukosyytit jaetaan kahteen ryhmään - rakeisiin (granulosyytit) ja ei-rakeisiin (agranulosyytit) - riippuen rakeiden läsnäolosta tai puuttumisesta niiden sytoplasmassa; lisäksi ne on helppo erottaa värjäämällä erityisellä väriaineseoksella: eosinofiilirakeet saavat kirkkaan vaaleanpunaisen värin tällä värjäyksellä, monosyyttien ja lymfosyyttien sytoplasma - sinertävä sävy, basofiilirakeita - violetti sävy, neutrofiilirakeita - a heikosti violetti sävy. Verenkierrossa soluja ympäröi läpinäkyvä neste (plasma), johon on liuennut erilaisia ​​aineita. Veri kuljettaa happea kudoksiin, poistaa niistä hiilidioksidia ja aineenvaihduntatuotteita sekä kuljettaa ravinteita ja eritystuotteita, kuten hormoneja, kehon osasta toiseen.

hermokudosta.

Hermokudos koostuu pitkälle erikoistuneista soluista, joita kutsutaan neuroneiksi ja jotka ovat keskittyneet pääasiassa aivojen ja selkäytimen harmaaseen aineeseen. Pitkä neuronin (aksonin) prosessi ulottuu pitkiä matkoja paikasta, jossa ytimen sisältävän hermosolun runko sijaitsee. Monien hermosolujen aksonit muodostavat nippuja, joita kutsumme hermoiksi. Dendriitit lähtevät myös hermosoluista - lyhyempiä prosesseja, yleensä lukuisia ja haarautuneita. Monia aksoneja peittää erityinen myeliinivaippa, joka koostuu rasvamaista materiaalia sisältävistä Schwann-soluista. Viereiset Schwann-solut erotetaan pienillä rakoilla, joita kutsutaan Ranvierin solmuiksi; ne muodostavat tyypillisiä painaumia aksonissa. Hermokudosta ympäröi erityinen tukikudos, joka tunnetaan nimellä neuroglia.

Kudosten korvaaminen ja uudistaminen.

Koko organismin elinkaaren ajan yksittäiset solut kuluvat tai tuhoutuvat jatkuvasti, mikä on yksi normaalien fysiologisten prosessien näkökohdista. Lisäksi joskus, esimerkiksi jonkinlaisen vamman seurauksena, menetetään yksi tai toinen kehon osa, joka koostuu eri kudoksista. Tällaisissa tapauksissa on erittäin tärkeää, että keho toistaa kadonneen osan. Regenerointi on kuitenkin mahdollista vain tietyissä rajoissa. Jotkut suhteellisen yksinkertaisesti järjestäytyneet eläimet, kuten tasomadot (tasamadot), lierot, äyriäiset (ravut, hummerit), meritähdet ja holoturiat, voivat palauttaa ruumiinosat, jotka ovat kokonaan kadonneet mistä tahansa syystä, mukaan lukien spontaanin poisheiton seurauksena (autotomia). Regeneraation tapahtumiseksi ei riitä pelkkä uusien solujen muodostaminen (proliferaatio) säilyneisiin kudoksiin; äskettäin muodostuneiden solujen on kyettävä erilaistumaan, jotta voidaan varmistaa kaikentyyppisten solujen korvaaminen, jotka olivat osa kadonneita rakenteita. Muilla eläimillä, erityisesti selkärankaisilla, uusiutuminen on mahdollista vain joissakin tapauksissa. Tritonit (häntäsammakkoeläimet) pystyvät uudistamaan häntänsä ja raajansa. Nisäkkäiltä puuttuu tämä kyky; kuitenkin myös niissä, maksan osittaisen kokeellisen poistamisen jälkeen, tietyissä olosuhteissa voidaan havaita melko merkittävän maksakudoksen alueen palautumista.

Regeneraation ja erilaistumisen mekanismien syvemmä ymmärtäminen avaa epäilemättä monia uusia mahdollisuuksia käyttää näitä prosesseja terapeuttisiin tarkoituksiin. Perustutkimuksella on jo ollut suuri panos ihon ja sarveiskalvon siirtotekniikoiden kehittämiseen. Useimmat erilaistuneet kudokset säilyttävät soluja, jotka kykenevät lisääntymään ja erilaistumaan, mutta on kudoksia (erityisesti ihmisen keskushermosto), jotka eivät täysin muodostuessaan kykene uusiutumaan. Noin vuoden iässä ihmisen keskushermosto sisältää sille määrätyn määrän hermosoluja, ja vaikka hermosäikeet, ts. Hermosolujen sytoplasmiset prosessit pystyvät uusiutumaan, tapauksia, joissa aivo- tai selkäydinsolut palautuvat vamman tai rappeuttavan taudin seurauksena, ei tunneta.

Klassisia esimerkkejä normaalien solujen ja kudosten korvaamisesta ihmiskehossa ovat veren ja ihon yläkerroksen uusiutuminen. Ihon ulkokerros - orvaskesi - lepää tiheällä sidekudoskerroksella, ns. dermis, joka on varustettu pienillä verisuonilla, jotka toimittavat siihen ravinteita. Epidermis koostuu kerrostunut levyepiteelistä. Sen ylempien kerrosten solut muuttuvat vähitellen ja muuttuvat ohuiksi läpinäkyviksi suomiksi - prosessia kutsutaan keratinisaatioksi; lopulta nämä suomut irtoavat. Tällainen hilseily on erityisen havaittavissa ihon vakavan auringonpolttaman jälkeen. Sammakkoeläimillä ja matelijoilla marraskeden irtoamista (sulamista) tapahtuu säännöllisesti. Pinnallisten ihosolujen päivittäinen menetys kompensoidaan uusilla soluilla, jotka tulevat aktiivisesti kasvavasta orvaskeden alemmasta kerroksesta. Orvaskessä on neljä kerrosta: ulompi sarveiskerros, sen alla on kiiltävä kerros (jossa keratinisoituminen alkaa ja sen solut muuttuvat läpinäkyviksi), sen alla on rakeinen kerros (sen soluihin kerääntyy pigmenttirakeita, mikä aiheuttaa ihon tummumista). iho, erityisesti auringon säteilyn vaikutuksesta). säteet) ja lopuksi syvin - alkeellinen eli tyvikerros (sissä tapahtuu mitoottisia jakautumisia koko organismin elinkaaren ajan, jolloin kuorivien tilalle saadaan uusia soluja) .

Myös ihmisten ja muiden selkärankaisten verisoluja päivitetään jatkuvasti. Jokaiselle solutyypille on ominaista enemmän tai vähemmän määrätty elinikä, jonka jälkeen muut solut - fagosyytit ("solusyöjät"), jotka on erityisesti mukautettu tähän tarkoitukseen, ne tuhoutuvat ja poistavat ne verestä. Uusia verisoluja (tuhottujen sijaan) muodostuu hematopoieettisiin elimiin (ihmisillä ja nisäkkäillä - luuytimessä). Jos verenhukka (verenvuoto) tai verisolujen tuhoutuminen kemikaalien (hemolyyttisten aineiden) vaikutuksesta aiheuttaa suurta vahinkoa verisolupopulaatioille, hematopoieettiset elimet alkavat tuottaa lisää soluja. Kun suuri määrä punasoluja, jotka toimittavat kudoksia happea, menetetään, kehon soluja uhkaa happinälkä, mikä on erityisen vaarallista hermokudokselle. Leukosyyttien puutteessa elimistö menettää kykynsä vastustaa infektioita sekä poistaa rappeutuneita soluja verestä, mikä itsessään johtaa lisäkomplikaatioihin. Normaaleissa olosuhteissa verenhukka on riittävä ärsyke hematopoieettisten elinten regeneratiivisten toimintojen mobilisoimiseksi.

Kudosten vasteet epänormaaleihin tiloihin.

Kun kudokset ovat vaurioituneet, niiden tyypillisen rakenteen menetys on mahdollista reaktiona tapahtuneeseen rikkomukseen.

Mekaaninen vaurio.

Mekaanisen vaurion (viillon tai murtuman) yhteydessä kudosreaktion tarkoituksena on täyttää syntyvä aukko ja yhdistää haavan reunat uudelleen. Heikosti erilaistuneet kudoselementit, erityisesti fibroblastit, ryntäävät repeämäkohtaan. Joskus haava on niin suuri, että kirurgin on lisättävä siihen kudoksen palasia stimuloidakseen paranemisprosessin alkuvaiheita; tätä varten käytetään amputaation aikana saatuja ja "luupankkiin" tallennettuja luunpalasia tai jopa kokonaisia ​​osia. Tapauksissa, joissa suurta haavaa (esimerkiksi palovammoja) ympäröivä iho ei pysty parantamaan, turvaudutaan muista kehon osista otettujen terveiden iholäppien siirtoihin. Tällaiset siirteet eivät joissain tapauksissa juurdu, koska siirretty kudos ei aina onnistu muodostamaan yhteyttä niihin kehon osiin, joihin se siirretään, ja se kuolee tai vastaanottaja hylkää sen.

vieraita esineitä.

Paine.

Kovettumista esiintyy, kun ihoon kohdistuu jatkuvaa mekaanista vauriota siihen kohdistuvan paineen seurauksena. Ne näkyvät tunnettuina varpaina ja ihon paksuuntumina jalkapohjissa, kämmenissä ja muilla kehon alueilla, joilla on jatkuvaa painetta. Näiden paksuuntumien poistaminen leikkaamalla ei auta. Niin kauan kuin paine jatkuu, kovettumien muodostuminen ei pysähdy, ja leikkaamalla ne paljastamme vain alla olevat herkät kerrokset, mikä voi johtaa haavojen muodostumiseen ja infektioiden kehittymiseen.

Menetelmät kudosten tutkimiseen.

Mikroskooppiseen tutkimukseen tarkoitettujen kudosvalmisteiden valmistukseen on kehitetty monia erikoismenetelmiä. On myös erityinen menetelmä nimeltä kudosviljely, jonka avulla voit tarkkailla ja tutkia eläviä kudoksia.

kudosviljelmä.

Eristetyt kudos- tai elimet sijoitetaan ravintoluoksiin olosuhteissa, jotka sulkevat pois mahdollisuuden mikrobien tartunnasta. Tässä epätavallisessa ympäristössä kudokset jatkavat kasvuaan ja niillä on monia normaaleissa olosuhteissa niille tyypillisiä ominaisuuksia (kuten ravinteiden, hapen, tietyn tilan tarve jne.), ts. kun ne ovat elävässä organismissa. Viljellyt kudokset voivat säilyttää monet rakenteellisista ja toiminnallisista ominaisuuksistaan: sydänlihaksen palaset jatkavat rytmistä supistumista, alkion iho jatkaa kasvuaan ja erilaistumistaan ​​tavanomaiseen suuntaan. Joskus viljely paljastaa kuitenkin sellaisia ​​kudoksen ominaisuuksia, jotka eivät ilmene siinä normaaleissa olosuhteissa ja voivat jäädä tuntemattomiksi. Joten tutkimalla epänormaalien kasvainten (kasvainten) solujen rakennetta ei ole aina mahdollista todeta niiden kuuluvuutta tiettyyn kudokseen tai niiden alkion alkuperää. Kuitenkin, kun niitä kasvatetaan keinotekoisessa ravintoalustassa, ne saavat ominaisuuksia, jotka ovat ominaisia ​​tietyn kudoksen tai elimen soluille. Tämä voi olla erittäin hyödyllistä paitsi kasvaimen oikean tunnistamisessa, myös sen elimen tunnistamisessa, josta se alun perin sai alkunsa. Jotkut solut, kuten fibroblastit (sidekudossolut), ovat erittäin helppoja viljellä, mikä tekee niistä arvokkaita koekohteita erityisesti tapauksissa, joissa tarvitaan homogeenista materiaalia uusien lääkkeiden testaamiseen.

Kudosviljelmän kasvattaminen vaatii tiettyjä taitoja ja laitteita, mutta se on tärkein menetelmä elävien kudosten tutkimisessa. Lisäksi se mahdollistaa lisätietojen saamisen perinteisillä histologisilla menetelmillä tutkittujen kudosten tilasta.

Mikroskooppiset tutkimukset ja histologiset menetelmät.

Pinnallisinkin tutkimus mahdollistaa kudoksen erottamisen toisesta. Lihakset, luut, rustot ja hermokudokset sekä veri voidaan tunnistaa paljaalla silmällä. Yksityiskohtaista tutkimusta varten on kuitenkin tarpeen tutkia kudoksia mikroskoopilla suurella suurennuksella, jonka avulla voit nähdä yksittäisiä soluja ja niiden jakautumisen luonteen. Märkävalmisteita voidaan tutkia mikroskoopilla. Esimerkki tällaisesta valmisteesta on verikoe; sen valmistusta varten lasilevylle levitetään pisara verta ja levitetään sen päälle ohuen kalvon muodossa. Nämä menetelmät eivät kuitenkaan yleensä anna täydellistä kuvaa solujen jakautumisesta eikä alueista, joilla kudokset ovat yhteydessä.

Kehosta poistetut elävät kudokset muuttuvat nopeasti; sillä välin pieninkin muutos kudoksessa johtaa kuvan vääristymiseen histologisessa valmisteessa. Siksi on erittäin tärkeää varmistaa sen turvallisuus välittömästi sen jälkeen, kun kudos on poistettu kehosta. Tämä saavutetaan kiinnitysaineilla - erilaisilla kemiallisilla koostumuksilla olevilla nesteillä, jotka tappavat solut erittäin nopeasti vääristämättä niiden rakenteen yksityiskohtia ja varmistavat, että kudos säilyy tässä - kiinteässä - tilassa. Jokaisen lukuisten kiinnitysaineiden koostumus kehitettiin toistuvan kokeilun tuloksena, ja haluttu eri komponenttien suhde niissä määritettiin samalla toistuvan yrityksen ja erehdyksen menetelmällä.

Kiinnityksen jälkeen kudos yleensä kuivuu. Koska nopea siirtyminen korkean pitoisuuden alkoholiin johtaisi solujen rypistymiseen ja muodonmuutokseen, kuivuminen tapahtuu asteittain: kudos johdetaan sarjan suonten läpi, jotka sisältävät alkoholia peräkkäin kasvavina pitoisuuksina, jopa 100 %. Kudos siirretään sitten tavallisesti nesteeseen, joka sekoittuu hyvin nestemäisen parafiinin kanssa; useimmiten tähän käytetään ksyleeniä tai tolueenia. Lyhyen ksyleenille altistuksen jälkeen kudos pystyy imemään parafiinia. Kyllästäminen suoritetaan termostaatissa, jotta parafiini pysyy nesteenä. Kaikki tämä ns. johdotus tehdään manuaalisesti tai näyte asetetaan erityiseen laitteeseen, joka suorittaa kaikki toiminnot automaattisesti. Nopeampaa johdotusta käytetään myös liuottimilla (esim. tetrahydrofuraanilla), jotka voidaan sekoittaa sekä veteen että parafiiniin.

Kun pehmopaperin pala on täysin kyllästetty parafiinilla, se asetetaan pieneen paperi- tai metallimuottiin ja siihen lisätään nestemäistä parafiinia kaatamalla se koko näytteen päälle. Kun parafiini kovettuu, saadaan kiinteä lohko, jonka sisällä on kudosta. Nyt kangas voidaan leikata. Yleensä tähän käytetään erityistä laitetta - mikrotomia. Leikkauksen aikana otetut kudosnäytteet voidaan leikata pakastamisen jälkeen, ts. ilman kuivumista ja parafiinilla täyttöä.

Edellä kuvattua menettelyä on muutettava hieman, jos kudos, kuten luu, sisältää kovia sulkeumia. Luun mineraalikomponentit on ensin poistettava; tätä varten kudosta kiinnityksen jälkeen käsitellään heikoilla hapoilla - tätä prosessia kutsutaan kalkinpoistoksi. Kalkinpoistoon jäänyt luukappale muuttaa koko kudoksen muotoaan ja vahingoittaa mikrotomin veitsen leikkuureunaa. Sahaamalla luu pieniksi paloiksi ja hiomalla ne jollain hioma-aineella on kuitenkin mahdollista saada leikkeitä - erittäin ohuita luuosia, jotka soveltuvat mikroskoopilla tutkittavaksi.

Mikrotomi koostuu useista osista; tärkeimmät ovat veitsi ja pidike. Parafiinilohko on kiinnitetty pidikkeeseen, joka liikkuu veitsen reunaan nähden vaakatasossa, kun taas veitsi itse pysyy paikallaan. Yhden leikkauksen jälkeen pidikettä viedään mikrometriruuveilla tietyn matkan, joka vastaa haluttua leikkauspaksuutta. Leikkaukset voivat olla niin ohuita kuin 20 µm (0,02 mm) tai 1–2 µm (0,001–0,002 mm); se riippuu tietyn kudoksen solujen koosta ja vaihtelee yleensä 7-10 mikronia. Parafiinilohkojen leikkeet, joissa on kudosta, asetetaan lasilevylle. Sen jälkeen parafiini poistetaan asettamalla levyt, joissa on leikkeitä ksyleeniin. Jos rasvakomponentit on säilytettävä osissa, parafiinin sijasta kudoksen täyttämiseen käytetään karbovaxia, synteettistä polymeeriä, joka liukenee veteen.

Kaikkien näiden toimenpiteiden jälkeen valmiste on valmis värjäykseen - erittäin tärkeä vaihe histologisten valmisteiden valmistuksessa. Kudostyypistä ja tutkimuksen luonteesta riippuen käytetään erilaisia ​​värjäysmenetelmiä. Nämä menetelmät, samoin kuin menetelmät kankaan kaatamiseen, kehitettiin monien vuosien kokeilun aikana; Uusia menetelmiä kuitenkin luodaan jatkuvasti, mikä liittyy sekä uusien tutkimusalueiden kehittämiseen että uusien kemikaalien ja väriaineiden tuloon. Väriaineet ovat tärkeä työkalu histologisissa tutkimuksissa, koska ne imeytyvät eri tavalla eri kudoksiin tai niiden yksittäisiin komponentteihin (soluytimiin, sytoplasmaan, kalvorakenteisiin). Värjäys perustuu väriaineiden muodostavien monimutkaisten aineiden ja solujen ja kudosten tiettyjen komponenttien väliseen kemialliseen affiniteettiin. Väriaineita käytetään vesi- tai alkoholiliuosten muodossa niiden liukoisuudesta ja valitusta menetelmästä riippuen. Värjäyksen jälkeen valmisteet pestään vedessä tai alkoholissa ylimääräisen väriaineen poistamiseksi; sen jälkeen vain ne rakenteet, jotka imevät tätä väriainetta, pysyvät värillisinä.

Jotta valmistetta säilyisi riittävän pitkään, värillinen osa peitetään jollain liimalla levitetyllä peitelasilla, joka kovettuu vähitellen. Tätä varten käytetään kanadalaista balsamia (luonnonhartsia) ja erilaisia ​​synteettisiä väliaineita. Tällä tavalla valmistetut valmisteet säilyvät vuosia. Kudosten tutkimiseen elektronimikroskoopilla käytetään muita kiinnitysmenetelmiä (yleensä osmihappoa ja glutaraldehydiä) ja muita upotusaineita (yleensä epoksihartseja), jotka mahdollistavat solujen ja niiden komponenttien ultrarakenteen paljastamisen. Erityinen ultramikrotomi lasi- tai timanttiveitsellä mahdollistaa alle 1 mikronin paksuisten osien saamisen, ja pysyvät valmisteet ei asenneta lasilevyille, vaan kupariverkkoihin. Äskettäin on kehitetty tekniikoita, jotka mahdollistavat useiden tavanomaisten histologisten värjäysmenetelmien soveltamisen sen jälkeen, kun kudos on kiinnitetty ja upotettu elektronimikroskopiaa varten.

Tässä kuvattu työvaltainen prosessi vaatii ammattitaitoista henkilökuntaa, mutta mikroskooppisten näytteiden massatuotannossa käytetään kuljetintekniikkaa, jossa monet kuivaus-, upotus- ja jopa värjäysvaiheista suoritetaan automaattisten kudosohjaimien avulla. Tapauksissa, joissa tarvitaan kiireellistä diagnoosia, erityisesti leikkauksen aikana, biopsiakudos kiinnitetään ja jäädytetään nopeasti. Tällaisten kankaiden osat valmistetaan muutamassa minuutissa, niitä ei kaadeta ja värjätään välittömästi. Kokenut patologi voi välittömästi tehdä diagnoosin solujen yleisen jakautumismallin perusteella. Tällaiset osiot eivät kuitenkaan sovellu yksityiskohtaiseen tutkimukseen.

Histokemia.

Joidenkin värjäysmenetelmien avulla voit tunnistaa tiettyjä kemikaaleja soluissa. Rasvojen, glykogeenin, nukleiinihappojen, nukleoproteiinien, tiettyjen entsyymien ja muiden solun kemiallisten komponenttien differentiaalinen värjäys on mahdollista. Väriaineiden tiedetään värjäävän voimakkaasti kudoksia, joilla on korkea metabolinen aktiivisuus. Histokemian osuus kudosten kemiallisen koostumuksen tutkimuksessa kasvaa jatkuvasti. On valittu väriaineita, fluorokromeja ja entsyymejä, jotka voidaan kiinnittää spesifisiin immunoglobuliineihin (vasta-aineisiin) ja tunnistaa solurakenteita tarkkailemalla tämän kompleksin sitoutumista solussa. Tämä tutkimusalue on immunohistokemian aihe. Immunologisten merkkiaineiden käyttö valo- ja elektronimikroskopiassa edistää solubiologian tietämyksemme nopeaa laajentamista sekä lääketieteellisten diagnoosien tarkkuutta.

"Optinen värjäys".

Perinteiset histologiset värjäysmenetelmät sisältävät kiinnityksen, joka tappaa kudosta. Optiset värjäysmenetelmät perustuvat siihen, että soluilla ja kudoksilla, jotka eroavat paksuudesta ja kemiallisesta koostumuksesta, on myös erilaisia ​​optisia ominaisuuksia. Tämän seurauksena polarisoitua valoa, dispersiota, interferenssiä tai vaihekontrastia käyttämällä on mahdollista saada kuvia, joissa yksittäiset rakenteelliset yksityiskohdat näkyvät selvästi kirkkaus- ja (tai) värieroista johtuen, kun taas tällaiset yksityiskohdat ovat tuskin erotettavissa perinteisessä valossa. valomikroskooppi. Nämä menetelmät mahdollistavat sekä elävien että kiinnittyneiden kudosten tutkimisen ja eliminoivat artefaktien ilmaantumista, mikä on mahdollista tavanomaisia ​​histologisia menetelmiä käytettäessä.

Ennen kuin hermokudos alistetaan histologiseen analyysiin, on välttämätöntä valmistaa valmiste, ts. ota materiaali oikein ja korjaa se. Yleensä tutkitaan kuolleiden organismien hermokudos. Ja yleisin tapa opiskella on menetelmä esivärjäyksellä. Värin määrää joidenkin metallien ominaisuus muodostaa yhdisteitä hermosolujen elimiin tai prosesseihin, jotka pelkistimen vaikutuksesta antavat mustan tai muun värin.

Nisslin substanssi paljastuu värillä metyleenisinistä. Käytä fluoresoivaa mikroskopiaa liuoksen alustavan lisäämisen kanssa tripaflaviini, joka luo punaisen hehkun ei-lihamaisista kuiduista ja vihertävän fluoresenssin mehevistä kuiduista.

Hermokudoksen kiinnittämiseen ennen värjäystä käytetään 10-20-prosenttista liuosta. formaliini, suuret palat (aivot) asetetaan 24 tunniksi 5 % formaliiniin fysiologinen suolaliuos(NaCl), siirrettiin sitten 10-prosenttiseen formaliiniliuokseen. Sen jälkeen tarvittavat palat leikataan pois ja säilytetään joko tuoreessa formaliiniliuoksessa tai muissa kiinnitysaineissa (alkoholi, surzha jne.).

Jotkut menetelmät sisältävät alkukiinnityksen formaliinin seoksessa ammoniumbromidi tai alkoholin ja ammoniakin seoksessa. Käytetään myös kloroformia, kaliumdikromaattia, typpihappoa.

Tämän jälkeen aivojen palat kaadetaan parafiinilohkoihin, joiden avulla valmistetaan jopa 120 mikronin paksuisia mikroleikkeitä. Valmiit osat liimataan lasilevylle ja siirrytään värjäämiseen. Metallisuolojen kerrostuminen solukalvoille tekee niistä näkyväksi. Käytetään myös pakastelohkojen kuivausmenetelmää. Valmisteet voidaan värjätä hematoksyliini, eosiini, pikrofuksiini, kromihappo, tioniini, toluidiinin sininen, kresyylivioletti, gallosyaniini, hopea, johtaa, kulta-, molybdeeni, osmihappo.vai niin.

5. Nykyaikaiset menetelmät keskushermoston anatomian tutkimiseen.

Jokaisella tieteellä on omat tutkimusmenetelmänsä, omat tapansa tuntea tutkimuskohde, ymmärtää tieteellistä totuutta. Anatomiassa käytetyt menetelmät mahdollistavat sekä ihmisen ulkoisen että sisäisen rakenteen tutkimisen.

Somatoskopia- kehon tarkastus - antaa tietoa kehon ja sen osien muodosta, niiden pinnasta, kohokuviosta. Vartalon kohokuvio muodostuu erimuotoisista kohouksista ja syvennyksistä - kuoppia, reikiä, uurteita, halkeamia, poimuja, iholinjoja. Kohonneet ja painaumat riippuvat osittain itse ihon ominaisuuksista, mutta pääasiassa välittömästi ihon alla tai syvemmällä sijaitsevista anatomisista muodostelmista.

Somatometria- rungon ja sen osien mittaus - täydentää tarkastustietoja. Kehon päämitat - sen kokonaispituus (korkeus), rintakehän ympärysmitta, hartioiden leveys, raajan pituus - käytetään arvioimaan henkilön ruumiinrakennetta, arvioimaan hänen fyysistä kehitystään. Yksittäisten kehon osien mittaamista käytetään monilla lääketieteen aloilla. Esimerkiksi selkärangan mittauksella kuvataan kehon asentoa, lantion koon määrittäminen on välttämätöntä synnytystoiminnassa.

Palpaatio- kehon tutkiminen käsillä ja sormilla - voit löytää luun tunnistuspisteitä, määrittää valtimoiden pulsaation, sisäelinten sijainnin ja tilan, imusolmukkeiden.

Ruumiinavaus ja dissektio- vanhimmat, mutta eivät arvoaan menettäneet menetelmät. Anatomian kehittyminen tieteenä liittyy ensisijaisesti näihin kahteen menetelmään. Ruumiinavaukset tieteellisiin tarkoituksiin suoritettiin ensin muinaisissa orjavaltioissa. Suuri renessanssin tiedemies Andrei Vesalius kehitti ja viimeisteli valmistusmenetelmän. Vesaliuksesta lähtien valmistusmenetelmästä tulee tärkein anatomiassa, sen avulla saatiin suurin osa ihmiskehon rakenteesta.

Maserointi- myös yksi vanhimmista anatomian menetelmistä. Se on pehmytkudosten liotusprosessi, jota seuraa niiden pehmeneminen ja rappeutuminen, ja sitä käytetään erityisesti luiden eristämiseen.

injektiomenetelmä- on käytetty 1600-1700-luvuilta lähtien. Laajassa merkityksessä tämä tarkoittaa ihmiskehossa olevien onteloiden, halkeamien, rakojen, putkimaisten rakenteiden täyttämistä värillisellä tai värittömällä tiivistemassalla. Tämä tehdään usein, jotta saadaan vaikutelma tutkittavasta ontelosta tai suonesta sekä helpotetaan tämän suonen erottamista ympäröivistä kudoksista. Tällä hetkellä injektiomenetelmää käytetään pääasiassa veri- ja imusuonten tutkimiseen. Tällä menetelmällä oli asteittainen rooli anatomisen tiedon kehittämisessä, erityisesti sen avulla pystyttiin selvittämään veren ja imusuonten kulku ja jakautuminen elinten sisällä, määrittämään suonten pituus ja niiden kulkuominaisuudet.

Korroosiomenetelmä- Yleisesti ottaen se johtuu siitä, että vaikeasti irrotettavat kudokset poistetaan syövyttämällä niitä hapoilla tai mädyttämällä asteittain lämpimässä vedessä. Aikaisemmin elimen verisuonet tai ontelo on täytetty massalla, joka ei romahda hapon vaikutuksesta. Siksi tämä menetelmä liittyy läheisesti injektiomenetelmään. Korroosiomenetelmällä saadaan tarkempaa tietoa verisuonten etenemisestä ja sijainnista kuin yksinkertainen valmistusmenetelmä. Menetelmän haittana on, että kudosten poiston jälkeen luonnolliset topografiset suhteet elimen yksittäisten osien välillä menetetään.

värjäysmenetelmä- Tarkoituksena on kontrastivärinen erottelu kehon eri elementeissä. Maaleina käytetään eläin- (karmiini) tai kasviperäisiä (hematoksyliini) aineita, keinotekoisia aniliini- tai kivihiilitervamaaleja (metyleenisininen, magenta) tai metallisuoloja.

1800-luvulla sitä ehdotettiin kehon topografisten suhteiden tutkimiseksi jäätyneiden ruumiiden sahausmenetelmä (pirogov-leikkaukset). Tämän menetelmän etuna on, että tietyssä kehon osassa erilaisten muodostumien välinen todellinen suhde säilyy. Hän teki mahdolliseksi selventää anatomisia tietoja lähes kaikista ihmiskehon alueista ja myötävaikutti siten kirurgian kehitykseen. Tätä menetelmää käyttämällä suuri venäläinen kirurgi ja topografinen anatomi N.I. Pirogov kokosi atlasin ihmiskehon leikkauksista eri suuntiin ja loi perustan kirurgiselle anatomialle. Pirogovo-leikkeistä saatuja tietoja voidaan täydentää tiedolla kudosten suhteesta, jos leike tehdään useita mikrometrejä paksu ja käsitellään histologisilla väreillä. Tällaista menetelmää kutsutaan histotopografia. Histologisten leikkeiden ja histotopogrammien sarjan perusteella on mahdollista palauttaa tutkittava muodostus kuvassa tai tilavuudessa. Tällainen toiminta on graafinen tai muovinen jälleenrakennus.

1800-luvun lopulla kehittyi saksalainen anatomi W. Shpaltegolts valaistumisen menetelmä anatomiset valmisteet. Kudosvalaistumisella tarkoitetaan sellaista elinten tai niiden osien hoitoa, jossa tutkittava kohde tulee selvästi näkyväksi valaistuneiden kudosten taustalla. Enlightenment-menetelmää käytetään useimmiten hermoston ja verisuonijärjestelmän tutkimiseen.

1800-luvun aikana parannuksia mikroskooppiset menetelmät, ja histologia erotettu anatomiasta itsenäisenä tieteellisenä ja koulutuksellisena tieteenalana.

1900-luvun alussa kehittyi Kharkovin anatomi V.P. Vorobjov makromikroskooppinen tutkimusmenetelmä, jonka ydin on värjäytyneiden esineiden (pienten verisuonten, hermojen) ohuessa valmistelussa ja niiden myöhemmässä tutkimuksessa kiikarin suurennuslasin alla. Tämä menetelmä on avannut uuden raja-alueen anatomisten rakenteiden tutkimukselle. Tällä menetelmällä on useita lajikkeita: valmistus putoavan pisaran alla, vesikerroksen alla. Sitä voidaan täydentää sidekudoksen löysäämisellä hapoilla, tutkittujen rakenteiden (hermot, rauhaset) valikoivalla värjäyksellä, putkimaisten järjestelmien (suonten, kanavien) injektiolla värjäytyneillä massoilla.

Viime ja nykyisen vuosisadan vaihteessa anatomia tuli röntgen menetelmä. Röntgensäteet löydettiin vuonna 1895. Ja jo vuonna 1896 kotimaiset anatomit P.F. Lesgaft ja V.N. Tonkov käyttivät niitä tutkimaan luurankoa. Röntgenmenetelmän etuna anatomiassa aiemmin käytettyihin menetelmiin verrattuna on, että sen avulla voidaan tutkia elävän ihmisen rakennetta, nähdä toimivia elimiä ja tutkia niiden ikääntymiseen liittyviä dynamiikan muutoksia. Röntgenanatomiasta on tullut erityinen anatomian osa, jota tarvitaan klinikalle. Tällä hetkellä fluoroskopian ja radiografian lisäksi käytetään erityisiä röntgenmenetelmiä. stereoradiografia antaa kolmiulotteisia kuvia kehon osista ja elimistä. Röntgenkuvaus voit tutkia elinten liikkeitä, sydämen supistuksia, varjoaineen kulkeutumista verisuonten läpi. Tomografia- kerros kerrokselta röntgentutkimus - antaa selkeän kuvan ilman ylimääräisiä kerroksia poistettavassa kerroksessa sijaitsevista anatomisista muodostelmista. tietokonetomografia voit saada kuvia pään, vartalon, raajojen poikittaisista osista, joissa elimet ja kudokset eroavat tiheydestä. Elektroradiografia antaa sinun saada röntgenkuvan pehmytkudoksesta (iho, ihonalainen kudos, nivelsiteet, rusto, parenkymaalisten elinten sidekudosrunko), joita ei havaita tavanomaisissa röntgensäteissä, koska ne eivät melkein viivytä röntgensäteitä. Röntgendensitometria voit määrittää luissa olevien mineraalisuolojen määrän in vivo.

Anatomian tutkimus elävästä ihmisestä on endoskopiamenetelmiä- havainnot elinten sisäpinnan erityisillä optisilla välineillä: kurkunpää - laryngoskopia, keuhkoputket - bronkoskopia, mahalaukku - gastroskopia ja muut.

Ultraäänikaikulokaatio(sonografia), joka perustuu elinten ja kudosten akustisten ominaisuuksien eroihin, mahdollistaa kuvien saamisen joistakin vaikeasti röntgenkuvaavista elimistä, kuten maksasta, pernasta.

Useiden anatomisten ongelmien ratkaisemiseksi, histologinen ja histokemialliset menetelmät kun tutkimuskohde voidaan havaita valomikroskoopin mahdollistavilla suurennuksilla.

Otettu aktiivisesti anatomiaan elektronimikroskopia, jonka avulla voit nähdä niin ohuita rakenteita, että ne eivät näy valomikroskoopissa. lupaava pyyhkäisyelektronimikroskooppimenetelmä, joka antaa ikään kuin kolmiulotteisen kuvan tutkittavasta kohteesta sekä pienillä että suurilla suurennoksilla.

Nykyaikainen anatomia, kuten lääketiede yleensä, kehittyy tieteen ja tekniikan kehityksen mukaisesti. Tämä ilmenee anatomian suhteiden vahvistumisena muiden tieteenalojen kanssa, kokeen kasvavana roolina tieteellisessä tutkimuksessa, uusien teknisten menetelmien soveltamisessa. Anatomia käyttää fysiikan, kemian, kybernetiikan, tietojenkäsittelytieteen, matematiikan ja mekaniikan saavutuksia. Anatomia asettaa saavutuksensa lääketieteen palvelukseen.

6. Muut morfologiset tieteet liittyvät läheisesti anatomiaan:

sytologia;

Histologia on kudostiede;

Embryologia, joka tutkii sukusolujen muodostumisprosesseja, hedelmöittymistä, organismien alkion kehitystä .

1. Anatomia (kreikka" anatemno”- Dissect) on vanhin ihmiskehon rakennetta käsittelevistä tieteistä. Tämän tieteen osa - keskushermoston anatomia - tutkii hermoston morfologiaa elintasolla.

2. Keskushermoston histologia (kreikka" histos"- kudos) tutkii hermoston rakennetta kudos- ja solutasolla.

3. Sytologia (kreikka" cytos"- solu) tutkii hermosolujen ja gliasolujen rakennetta solu- ja subsellulaarisella tasolla.

4. Biokemia ja molekyylibiologia tutkia hermoston hermosolujen ja apusolujen rakennetta subsellulaarisella ja molekyylitasolla.

5. Seuraava tieteenalaryhmä tutkii hermoston toimintoja kokeiden ja siinä tapahtuvien prosessien mallintamisen avulla:

6. Keskushermoston fysiologia tutkii hermosolujen yleisiä toimintamalleja, keskushermoston yksittäisiä rakenteita ja koko hermostoa kokonaisuutena.

7. Analysaattoreiden fysiologia (aistijärjestelmät) tutkii tietoa havaitsevien ja käsittelevien rakenteiden toimintaa.

Sovellettavista tieteistä keskushermoston anatomian tuntemus on välttämätön ennen kaikkea lääke (7). Sairaita ihmisiä tarkkailevat lääkärit tutkivat keskushermoston toimintoja ja niiden suhdetta aivojen eri osiin ja rakenteisiin. Erityisen suuren panoksen ovat antaneet sellaisten lääketieteen erikoisalojen lääkärit, kuten neuropatologia ja neurokirurgia, otolaryngologia ja psykiatria.

Kaikki edellä mainitut tieteet tutkivat keskushermoston toimintaa objektiivisin tutkimusmenetelmin. Toisin kuin he, psykologia (8) ja neuropsykologia (9) korostaa subjektiivisia, epäsuoria menetelmiä ihmisen psyyken ja sen taustalla olevien keskushermoston prosessien tutkimiseksi. Nykyaikainen psykologia, varsinkin kliininen psykologia, ei kuitenkaan ole enää ajateltavissa ilman eksaktien tieteiden hankkimaa tietoa, jonka avulla ei voida olettaa spekulatiivisesti, vaan tietää tarkasti mielenterveyshäiriöiden mekanismit ja mahdolliset kompensointitavat. Tämä johtuu siitä, että huolimatta siitä, että ihmisellä on monimutkainen psyyke, puhe, tietoisuus, äly ja hänen olemassaolonsa sosiaalinen luonne (mitä kutsutaan ihmisen henkiseksi ja sosiaaliseksi olemukseksi), hän pysyy biologisena subjektina. , ja biologiset lait määräävät tai ainakin vaikuttavat kaikkiin ihmisen korkeampiin toimintoihin.

Keskushermoston tutkimus alkaa perinteisesti anatomiasta, koska ilman hermoston peruselementtien ja niiden välisten suhteiden tuntemista on mahdotonta tutkia keskushermoston toimintoja. Tutkiessaan käyttäytymisen ja keskushermoston rakenteiden ja toimintojen välistä suhdetta tutkijat luottavat modernin neurologian pääpostulaatti (neurobiologia), joka väittää sen kaikki ihmisen henkisen toiminnan monimuotoisuus ja ainutlaatuisuus, terveiden ja sairaiden aivojen toiminnot voidaan selittää aivojen tärkeimpien anatomisten rakenteiden rakenteellisista ominaisuuksista ja ominaisuuksista

7. Keskushermoston anatomian merkitys psykologialle.

ihmistiede on tiede, joka tutkii ihmiskehon rakennetta ja tämän rakenteen kehitysmalleja. Moderni anatomia, joka on osa morfologiaa, ei vain tutki rakennetta, vaan yrittää myös selittää tiettyjen rakenteiden muodostumisperiaatteita ja -malleja. Keskushermoston (CNS) anatomia on osa ihmisen anatomiaa. Keskushermoston anatomian tuntemus on välttämätöntä, jotta voidaan ymmärtää psykologisten prosessien suhde tiettyihin morfologisiin rakenteisiin sekä normaaleissa että patologisissa olosuhteissa.

8. Ontogenetiikka on organismin yksilöllistä kehitystä, jonka aikana sen morfofysiologiset, fysiologiset, biokemialliset ja sytogeneettiset ominaisuudet muuttuvat. Ontogeneesi sisältää kaksi prosessiryhmää: morfogeneesi ja lisääntyminen (lisääntyminen): morfogeneesin seurauksena muodostuu lisääntymiskypsä yksilö. Ontogenialle on ominaista stabiilius - homeoreesi. Homeoreesi on stabiloitunut tapahtumavirta, joka on prosessi, jossa toteutetaan geneettinen ohjelma kehon rakenteeseen, kehitykseen ja toimintaan.

Ontogenetiikka on jaettu kahteen ajanjaksoon: synnytystä edeltävä (kohdunsisäinen) ja postnataalinen (syntymän jälkeen). Ensimmäinen jatkuu hedelmöityksestä ja tsygootin muodostumisesta syntymään asti; toinen on syntymästä kuolemaan. ontogeneesiä kehittävä organismi

Prenataalinen ajanjakso puolestaan ​​​​jaetaan kolmeen ajanjaksoon: alkujakso, alkio ja sikiö. Alkuvaihe (pre-implantaatio) ihmisillä kattaa ensimmäisen kehitysviikon (hedelmöityshetkestä istutukseen kohdun limakalvolle). Alkion (esisikiön, alkion) ajanjakso - toisen viikon alusta kahdeksannen viikon loppuun (istutuksesta elimen munimisen loppuun). Sikiön (sikiön) ajanjakso alkaa yhdeksännestä viikosta ja kestää syntymään asti. Tällä hetkellä kehon kasvu lisääntyy.

Synnytyksen jälkeinen ontogeneesijakso on jaettu yhteentoista ajanjaksoon: 1. - 10. päivä - vastasyntyneet; 10. päivä - 1 vuosi - vauvaikä; 1--3 vuotta - varhaislapsuus; 4-7 vuotta - ensimmäinen lapsuus; 8-12 vuotta vanha - toinen lapsuus; 13--16 vuotta - murrosikä; 17--21 vuotta vanha - nuorekas ikä; 22-35 vuotta - ensimmäinen kypsä ikä; 36--60 vuotta - toinen kypsä ikä; 61 - 74 vuotta - ikä; 75-vuotiaasta alkaen - vanhuus, 90 vuoden jälkeen - satavuotiaat. Ontogenia päättyy luonnolliseen kuolemaan.

Ontogeneesin synnytystä edeltävä vaihe alkaa miehen ja naisen sukusolujen fuusiolla ja tsygootin muodostumisella. Tsygootti jakautuu peräkkäin muodostaen pallomaisen blastulan. Blastula-vaiheessa tapahtuu edelleen pirstoutumista ja primaarisen ontelon, blastokoelin, muodostumista.

Aivojen embryogeneesi alkaa kahden primäärisen aivorakkulan kehittymisellä aivoputken etuosassa (rostral), jotka johtuvat hermoputken (archencephalon ja deuterencephalon) seinämien epätasaisesta kasvusta. Deuterencephalon, kuten aivoputken takaosa (myöhemmin selkäydin), sijaitsee notochordin yläpuolella. Archencephalon on asetettu hänen eteensä. Sitten neljännen viikon alussa alkion deuterencephalon jakautuu keskimmäisiksi (mesencephalon) ja romboiduiksi (rhombencephalon) kupliksi. Ja archencephalon muuttuu tässä (kolmen virtsarakon) vaiheessa etuaivorakoksi (prosencephalon). Etuaivojen alaosassa työntyvät esiin hajulohkot (joista kehittyvät nenäontelon hajuepiteeli, hajutulpat ja -kanavat). Kaksi oftalmista rakkulaa työntyy esiin aivorakkulan anteriorisen rakkulan dorsolateraalisista seinistä. Tulevaisuudessa niistä kehittyy verkkokalvo, näköhermot ja kanavat.

Kuudentena alkionkehityksen viikolla anterioriset ja rombiset kuplat jakautuvat kumpikin kahteen osaan ja viiden kuplan vaihe alkaa.

Anteriorinen kupla - telencephalon - on jaettu pitkittäisraolla kahdeksi puolipalloksi. Ontelo myös jakautuu muodostaen sivukammiot. Ydin kasvaa epätasaisesti ja puolipallojen pinnalle muodostuu lukuisia poimuja - mutkioita, jotka erotetaan toisistaan ​​enemmän tai vähemmän syvien urien ja rakojen avulla.Jokainen puolipallo on jaettu neljään lohkoon, tämän mukaisesti sivukammioiden ontelot. on myös jaettu 4 osaan: mahalaukun keskiosa ja kolme sarvea. Alkion aivoja ympäröivästä mesenkyymistä kehittyvät aivojen kalvot. Harmaa aine sijaitsee myös reunalla, muodostaen aivokuoren

puolipalloilla ja puolipallojen tyvessä muodostaen aivokuoren ytimiä.

Anteriorisen virtsarakon takaosa pysyy jakamattomana ja sitä kutsutaan nyt välilihakseksi. Toiminnallisesti ja morfologisesti se liittyy näköelimeen. Siinä vaiheessa, kun rajat telencephalonin kanssa ilmenevät huonosti, sivuseinien tyviosasta muodostuu parillisia kasvaimia - silmäkuplia, jotka on liitetty alkuperäpaikkaansa silmävarsien avulla, jotka muuttuvat myöhemmin näköhermoiksi. . Suurimman paksuuden saavuttavat välikalvon sivuseinämät, jotka muuttuvat visuaalisiksi tuberkuloiksi tai talamuksiksi. Tämän mukaisesti kolmannen kammion ontelo muuttuu kapeaksi sagittaaliseksi halkeamaksi. Ventraaliselle alueelle (hypotalamus) muodostuu pariton ulkonema - suppilo, jonka alapäästä tulee aivolisäkkeen taka-aivolohko - neurohypofyysi.

Kolmas aivorakkula muuttuu keskiaivoksi, joka kehittyy yksinkertaisimmin ja jää jälkeen kasvusta. Sen seinät paksuuntuvat tasaisesti, ja onkalo muuttuu kapeaksi kanavaksi - Sylvius-akveduktiksi, joka yhdistää III ja IV kammiot. quadrigemina kehittyy selän seinämästä, ja keskiaivojen jalat kehittyvät vatsan seinämästä.

Romboidiset aivot on jaettu taka- ja lisäaivoihin. Pikkuaivot muodostuvat takaosasta - ensin pikkuaivojen vermisistä ja sitten puolipalloista sekä siltasta. Apuaivot muuttuvat pitkittäisydin. Rombisten aivojen seinät paksuuntuvat - sekä sivuilta että pohjalta, vain katto jää ohuimman levyn muodossa. Ontelo muuttuu IV kammioksi, joka on yhteydessä Sylviuksen akveduktiin ja selkäytimen keskuskanavaan.

Aivorakkuloiden epätasaisen kehityksen seurauksena aivoputki alkaa taipua (keskiaivojen tasolla - parietaalinen taipuma, takaaivojen alueella - silta ja apuaivojen siirtymäkohdassa dorsaaliin - niskakyhmyyn). Parietaali- ja takaraivo taipuma on käännetty ulospäin ja silta - sisäänpäin.

Primaarisesta aivorakosta muodostuvat aivojen rakenteet: keski-, taka- ja apuaivot muodostavat aivorungon (trüncus cerebri). Se on selkäytimen rostraalinen jatko, ja sillä on sen kanssa yhteisiä rakenteellisia piirteitä. Selkäytimen ja aivorungon sivuseiniä pitkin kulkeva parillinen rajaura (sulcus limitons) jakaa aivoputken päälevyihin (ventral) ja pterygoidiin (dorsaalisiin) levyihin. Päälevystä muodostuu moottorirakenteita (selkäytimen etusarvet, aivohermojen motoriset ytimet). Aistinrakenteet (selkäytimen takasarvet, aivorungon sensoriset ytimet) kehittyvät pterygoid-levystä reunasuluksen yläpuolelle, ja autonomisen hermoston keskukset kehittyvät itse rajasulkussa.

Archencephalon-johdannaiset (telencephalon ja diencyphalon) luovat subkortikaalisia rakenteita ja aivokuorta. Täällä ei ole päälevyä (se päättyy keskiaivoon), joten siellä ei ole motorisia ja autonomisia ytimiä. Koko etuaivot kehittyvät pterygoidilevystä, joten se sisältää vain aistirakenteita.

Ihmisen hermoston synnytyksen jälkeinen ontogeneettisyys alkaa lapsen syntymästä. Vastasyntyneen aivot painavat 300-400 g. Pian syntymän jälkeen uusien hermosolujen muodostuminen neuroblasteista pysähtyy, itse hermosolut eivät jakautu. Kahdeksantena syntymän jälkeisenä kuukautena aivojen paino kuitenkin kaksinkertaistuu ja 4-5 vuoden iässä kolminkertaistuu. Aivojen massa kasvaa pääasiassa prosessien määrän lisääntymisen ja niiden myelinisoitumisen vuoksi. Miesten aivot saavuttavat maksimipainonsa 20-29-vuotiaana ja naisten 15-19-vuotiaana. 50 vuoden kuluttua aivot litistyvät, niiden paino laskee ja vanhemmalla iällä se voi laskea 100 g.

9. hermostoputki- rudimentti 0% A6% D0% 9D% D0% A1 "CNS in 0% A5% D0% BE% D1% 80% D0% B4% D0% BE% D0% B2% D1% 8B% D0% B5" sointuja, muodostuu prosessissa 0% 9D% D0% B5% D0% B9% D1% 80% D1% 83% D0% BB% D1% 8F% D1% 86% D0% B8% D1% 8F "hermolevystä tuleva hermo .

Poikkileikkauksessa, pian muodostumisen jälkeen, siinä voidaan erottaa kolme kerrosta sisältä ulospäin:

Ependymaalinen - pseudokerroksinen kerros, joka sisältää alkeellisia soluja.

Vaippavyöhyke tai vaippakerros sisältää vaeltavia D0% B8% D1% 8F "proliferoituvia soluja, jotka tulevat esiin ependymaalisesta kerroksesta.

Ulompi reunavyöhyke on kerros, jossa hermosäikeet muodostuvat.

Hermoputken keskellä on ensisijainen kammio.

Hermoputken kehittyminen tapahtuu seuraavan mekanismin mukaisesti: jakautuvat solut 0% AD% D0% BF% D0% B5% D0% BD% D0% B4% D0% B8% D0% BC% D0% B0 "ependyma enter vaippavyöhyke, jossa ne kehittyvät joko neuroblastien polkua pitkin - ne ovat kiinnittyneitä ja ampuvat ulos prosesseja, jotka ulottuvat ulompaan marginaalivyöhykkeeseen tai glioblastireittiä pitkin - ne eivät kiinnity ja muuttuvat gliasolut.

Menetelmät hermostuneiden, rasvaisten elementtien tunnistamiseksi. elastiset rakenteet. Histokemia.

Hermokudoksen värjäytyminen Hermokudoksen morfologisissa tutkimuksissa valo-optisella tasolla käytetään lukuisia värjäysmenetelmiä, joista monet ovat muunneltuja. Useimmiten nämä ovat selektiivisiä (elektiivisiä) menetelmiä, joita käytetään tunnistamaan yksi tai kaksi elementtiä. Tiettyyn tarkoitukseen käytetään yhdistettyjä menetelmiä.

KIINNITYS Kun tutkitaan hermokudosta yksinkertaisista kiinnitysaineista, käytetään useimmiten 10-20% formaldehydiliuosta ja 96% ja 100% alkoholia kiinnitysseoksista - sublimaattia ja pyridiiniä. On myös erityisiä kiinnittimiä, joita käytetään vain hermokudoksen elementtien tutkimuksessa.

Ramon y Cajal -kiinnitysseos (glian havaitsemiseen):

neutraali formaliini 15 ml ammoniumbromidia 20 g

tislattua vettä 85 ml

Seosta käytetään glian hopeoimiseen Ramon y Cajal - Hortegan mukaan. Ohuiden (enintään 1,5 cm) materiaalipalojen kiinnitysaika on 2-15 päivää. Pesu juoksevalla vedellä.

Ramon y Cajal -kiinnitysseos (neurofibrillien havaitsemiseen):

pyridiini 40 ml? 96 % alkoholia 30 ml

Kiinnityksen kesto 2 tuntia Pesu juoksevassa vedessä 1 tunti.

KUVAUS

Hermokudoksen käsittelyn ominaisuus on sen perusteellinen kuivuminen. 5-6 mm paksuisten kappaleiden kuivaamiseen käytetään seuraavaa kaaviota:

50 % alkoholia 2 tuntia

70 % alkoholia 6 tuntia

80 % alkoholia 6 tuntia

96 % alkoholia 6 tuntia

100 % alkoholia I 6 tuntia

100 % alkoholi II 6 tuntia

Kuivumisaika 32 h

JOITAKIN HERMOKUDOSTEN TÄYTTEEN OMINAISUUDET

Histologista tutkimusta varten oleva hermokudos kaadetaan parafiiniin, selloidiiniin ja gelatiiniin. Parafiiniin ja selloidiiniin kaatamisen tekniikalla ei ole tässä vaiheessa mitään erityispiirteitä hermokudoksen käsittelyssä.

Kaada gelatiiniin Snesarevin mukaan Menetelmä soveltuu embryologisiin tutkimuksiin. Sen etuna on, että se ei rypisty materiaalia. Sitä suositellaan sidekudoksen hienon solujen välisen rakenteen paljastamiseen sekä joihinkin sytologisiin tutkimuksiin.

Täyttöä varten ota väritön läpinäkyvä elintarvikegelatiini ja valmista siitä ensin 25-prosenttinen liuos. Leikkaa tätä varten tarvittava määrä gelatiinia hienoksi, kaada leveäsuiseen purkkiin ja laita termostaattiin 37 ° C:een, kunnes se liukenee. Sen jälkeen osa valmistetusta gelatiinista laimennetaan puoliksi lämpimällä 1-prosenttisella fenoliliuoksella (karbolihappo), jolloin saadaan 12,5-prosenttinen liuos. Gelatiiniliuokset valmistetaan parhaiten pieninä määrinä tarpeen mukaan. Kiinnityksen jälkeen huolellisesti pesty materiaali siirretään 12,5 % gelatiiniliuokseen, jossa sitä säilytetään kappaleiden koosta riippuen 1-2 tunnista 1-2 vuorokauteen ja siirretään sitten 25 % gelatiiniliuokseen. 37 °C:ssa saman ajan. Kaatamisen jälkeen seuraa nopea jäähdytys jääkaapissa ja tiivistys 5-10 % formaliinissa. Lohkot leikataan vain jäädytysmikrotomilla.

Histokemia, histologian haara, joka tutkii eläin- ja kasvikudosten kemiallisia ominaisuuksia. G.:n tehtävänä on selvittää kudossolujen (katso solu) ja interstitiaalisen väliaineen aineenvaihdunnan ominaisuuksia. Se tutkii solujen ominaisuuksien muutoksia kehityksen aikana, työn, aineenvaihdunnan ja kypsien solujen ja kudosten uusiutumisen välistä suhdetta. Histokemiallisten tekniikoiden perusperiaate on solujen tietyn kemiallisen komponentin sitominen väriaineella tai värin muodostuminen reaktion aikana. Useat menetelmät (sytofotometria, luminesenssi- ja interferenssimikroskopia) perustuvat aineiden fysikaalisiin ominaisuuksiin. Erilaisten histokemiallisten menetelmien avulla voidaan määrittää monien aineiden sijainti ja määrä kudoksissa, niiden aineenvaihdunta (kudosautoradiografia), yhteydet submikroskooppiseen rakenteeseen (elektroninen morfologia) sekä entsyymien aktiivisuus. Myös immunohistokemia on lupaava suunta. Tarkimmat histokemialliset menetelmät, joiden avulla voit tutkia solun rakennetta, kutsutaan sytokemiallisiksi (katso Sytokemia).

Ensimmäiset erityiset histokemialliset tutkimukset kuuluivat ranskalaiselle tiedemiehelle F. Raspailille (1825-34). G. alkoi kehittyä intensiivisesti 40-luvulta lähtien. 1900-luvulla, jolloin syntyi luotettavat menetelmät proteiinien, nukleiinihappojen, lipidien, polysakkaridien ja joidenkin solun epäorgaanisten komponenttien määrittämiseksi. Histokemiallisten menetelmien avulla pystyttiin esimerkiksi osoittamaan ensimmäistä kertaa RNA-määrän ja proteiinisynteesin muutosten sekä kromosomijoukon DNA-pitoisuuden pysyvyyden välinen suhde.

4. Mikroskoopin tyypit.

Valomikroskopiamenetelmät
Valomikroskopian menetelmät (valaistus ja havainto). Mikroskooppimenetelmät valitaan (ja tarjotaan rakentavasti) tutkittavien kohteiden luonteen ja ominaisuuksien mukaan, koska jälkimmäiset, kuten edellä todettiin, vaikuttavat kuvan kontrastiin.

Kirkaskenttämenetelmä ja sen lajikkeet
Läpäisevän valon kirkkaan kentän menetelmää käytetään tutkittaessa läpinäkyviä valmisteita, joissa on absorboivia (valoa absorboivia) hiukkasia ja niihin sisältyviä yksityiskohtia. Näitä voivat olla esimerkiksi ohuita värillisiä leikkeitä eläin- ja kasvikudoksesta, ohuita mineraaliosia jne.

Pimeä kenttämenetelmä ja sen lajikkeet
Käytetään erityistä lauhdutinta, joka korostaa värjäämättömän materiaalin kontrasteja. Tässä tapauksessa valaisimen säteet putoavat valmisteelle vinossa kulmassa, ja tutkimuskohde näyttää valaistulta pimeässä kentässä.

Vaihekontrastimenetelmä
Kun valo kulkee värillisten esineiden läpi, valoaallon amplitudi muuttuu, ja kun valo kulkee värittämättömien esineiden läpi, valoaallon vaihe muuttuu, jota käytetään suuren kontrastin saamiseksi.

Polarisoiva mikroskopia
Polarisoiva mikroskopia mahdollistaa kudoskomponenttien ultrarakenteen organisoitumisen tutkimisen anisotropian ja/tai kahtaistaittavuuden analyysin perusteella

Interferenssikontrastimenetelmä
Interferenssikontrastimenetelmä (häiriömikroskopia) koostuu siitä, että jokainen säde jakautuu kahteen mikroskooppiin. Yksi saaduista säteistä ohjataan havaitun hiukkasen läpi, toinen - sen ohi mikroskoopin samaa tai ylimääräistä optista haaraa pitkin. Mikroskoopin silmäosassa molemmat säteet yhdistyvät uudelleen ja häiritsevät toisiaan. Yksi kohteen läpi kulkevista säteistä viivästyy (saattaa reittieron toiseen säteeseen). Kompensaattori mittaa tämän viiveen arvon

Tutkimusmenetelmä luminesenssin valossa
Tutkimusmenetelmä luminesenssin valossa (luminesenssimikroskopia tai fluoresenssimikroskopia) muodostuu mikroobjektien vihreä-oranssin hehkun mikroskoopilla tarkkailusta, joka syntyy, kun niitä valaistaan ​​siniviolettilla valolla tai ultraviolettisäteillä, jotka eivät ole näkyvissä. silmä.

ultraviolettimikroskopia. Se perustuu ultraviolettisäteiden käyttöön, jonka aallonpituus on alle 380 nm, mikä mahdollistaa linssien resoluution kasvattamisen 0,2...0,3 µm:stä 0,11 µm:iin. Edellyttää erityisten ultraviolettimikroskooppien käyttöä, jotka käyttävät ultraviolettivalaisimia, kvartsioptiikkaa ja UV-näkyväksi muuntimia. Monet soluja muodostavat aineet (esimerkiksi nukleiinihapot) absorboivat selektiivisesti ultraviolettisäteilyä, jonka avulla määritetään näiden aineiden määrä solussa.