bakterioloogiline labor. Bakterioloogilise labori töökorraldus Millised osakonnad on bakterioloogilises laboris

Kõik mikroorganismide mikrobioloogilised, biokeemilised ja molekulaarbioloogilised uuringud viiakse läbi spetsiaalsetes laborites, mille struktuur ja varustus sõltuvad uurimisobjektidest (bakterid, viirused, seened, algloomad), aga ka nende sihtsuunast (teaduslikud uuringud, haiguste diagnoosimine). Inimeste ja loomade haiguste immuunvastuse ja serodiagnostika uuring viiakse läbi immunoloogilistes ja seroloogilistes (seerum - vereseerum) laborites.

Bakterioloogilised, viroloogilised, mükoloogilised ja seroloogilised (immunoloogilised) laborid on osa sanitaar- ja epidemioloogiajaamadest (SES), diagnostikakeskustest ja suurtest haiglatest. SES laborites tehakse patsientidelt ja nendega kokkupuutuvatelt isikutelt saadud materjalide bakterioloogilisi, viroloogilisi ja seroloogilisi analüüse, uuritakse bakterikandjaid ning viiakse läbi vee, õhu, pinnase, toidu jm sanitaar- ja mikrobioloogilisi uuringuid.

Haiglate ja diagnostikakeskuste bakterioloogilistes ja seroloogilistes laborites tehakse uuringuid soole-, mäda-, hingamisteede ja muude nakkushaiguste diagnoosimiseks, steriliseerimise ja desinfitseerimise mikrobioloogilist kontrolli.

Eriti ohtlike infektsioonide (katk, tulareemia, siberi katk jne) diagnoosimine toimub erirežiimiga laborites, mille korraldus ja toimimine on rangelt reguleeritud.

Viroloogilised laborid diagnoosivad viiruste põhjustatud haigusi (gripp, hepatiit, poliomüeliit jne), mõned bakterid - klamüüdia(ornitoos jne) ja riketsiae(tüüfus, Q-palavik jne). Viroloogiliste laborite korraldamisel ja varustamisel arvestavad nad viiruste, rakukultuuride ja kanaembrüotega töötamise spetsiifikat, mis nõuavad kõige rangemat aseptikat.

Mükoloogilised laborid teostavad patogeensete seente, mükooside tekitajate põhjustatud haiguste diagnostikat.

Laborid asuvad tavaliselt mitmes ruumis, mille pindala määratakse töö mahu ja eesmärgi järgi.

Igas laboris on:

a) kastid üksikute patogeenirühmadega töötamiseks;

b) seroloogiliste uuringute ruumid;

c) ruumid nõude pesemiseks ja steriliseerimiseks, toiduvalmistamiseks
leniya toitainekeskkond;

d) vivaarium kastidega tervetele ja katseloomadele
nyh;

e) testide vastuvõtmise ja väljastamise register.

Koos nende ruumidega on viroloogilistes laborites karbid uuritava materjali spetsiaalseks töötlemiseks ja tööks rakukultuuridega.

Mikrobioloogiliste laborite seadmed

Laborid on varustatud mitmete kohustuslike instrumentide ja aparaatidega.

1. Instrumendid mikroskoopiaks: bioloogiline immersioonmikroskoop koos lisaseadmetega (illuminaator, faasikontrastseade, tumevälja kondensaator jne), luminestsentsmikroskoop.

2. Termostaadid ja külmikud.

3. Toitekeskkonna, lahuste jms valmistamise seadmed: aparatuur destilleeritud vee saamiseks (destilleerija), tehnilised ja analüütilised kaalud, pH-meetrid, filtreerimisseadmed, veevannid, tsentrifuugid.

4. Tööriistade komplekt mikroobidega manipuleerimiseks: bakterioloogilised aasad, spaatlid, nõelad, pintsetid jne.

5. Laboratoorsed klaasnõud: katseklaasid, kolvid, Petri tassid, madratsid, viaalid, ampullid, Pasteuri ja gradueeritud pipetid jne, seadmed puuvillase marli torude valmistamiseks.

Suurtes diagnostikakompleksides on automaatsed analüsaatorid ja arvutipõhine süsteem saadud teabe hindamiseks.

Laboris on mikroskoopiliste preparaatide peitsimise koht, kus on spetsiaalsete värvainete lahused, alkohol, happed, filterpaber jne. Iga töökoht on varustatud gaasipõleti või piirituslambiga ja anumaga desinfitseeriva lahusega. Igapäevaseks tööks peavad laboris olema vajalikud toitekeskkonnad, keemilised reaktiivid, diagnostilised preparaadid ja muud materjalid.

Suured laborid on termostaatilised ruumid mikroorganismide massiliseks kasvatamiseks, seroloogiliste reaktsioonide seadistamiseks. Kasvatamiseks, kultuuride säilitamiseks, laboratoorsete klaasnõude steriliseerimiseks ja muudel eesmärkidel kasutatakse järgmisi seadmeid.

1. Termostaat. Seade, milles hoitakse püsivat temperatuuri. Enamiku patogeensete mikroorganismide paljunemiseks on optimaalne temperatuur 37 "C. Termostaadid on õhk ja vesi.

2. Mikroanaerostaat. Seade mikroorganismide kasvatamiseks anaeroobsetes tingimustes.

3. C0 2 - inkubaator. Seade kindla gaasi koostisega püsiva temperatuuri ja atmosfääri loomiseks. Mõeldud atmosfääri gaasilisele koostisele nõudlike mikroorganismide kasvatamiseks.

4. Külmikud. Kasutatakse mikrobioloogilistes laborites mikroorganismide kultuuride, toitekeskkonna, vere, vaktsiinide, seerumite ja muude bioloogiliselt aktiivsete preparaatide säilitamiseks temperatuuril umbes 4 °C. Ravimite hoidmiseks temperatuuril alla 0 ° C kasutatakse madala temperatuuriga külmikuid, milles temperatuur hoitakse -20 ° C või -75 ° C.

5. Tsentrifuugid. Seda kasutatakse mikroorganismide, erütrotsüütide ja muude rakkude settimiseks, mittehomogeensete vedelike (emulsioonid, suspensioonid) eraldamiseks. Laborites kasutatakse erinevate töörežiimidega tsentrifuuge.

6. Kuivatus- ja steriliseerimiskapp(Pasterahi). Mõeldud klaasist laboriklaasnõude ja muude kuumakindlate materjalide kuiva õhuga steriliseerimiseks.

7. Auru sterilisaator (autoklaav). Mõeldud steriliseerimiseks ülekuumendatud auruga (rõhu all). Mikrobioloogilistes laborites kasutatakse erineva mudeliga autoklaave (vertikaalsed, horisontaalsed, statsionaarsed, teisaldatavad).

BAKTERIOLOOGILISED, VIROLOOGILISED, MÜKOLOOGILISED, IMMUNOLOOGILISED LABORID JA NENDE SEADMED. KAASAEGSTE MIKROKOOPIDE SEADME. MIKROSKOPIA MEETODID. MIKROORGANISMIDE MORFOLOOGIA UURIMISE MEETODID

Programm

1. Mikrobioloogiliste (bakterioloogiliste, viroloogiliste, mükoloogiliste) laborite töö- ja töökorraldus.

2. Mikrobioloogialabori põhiinstrumendid ja seadmed.

3. Mikroskoobid ja mikroskoopilised seadmed. Sukelmikroskoobiga töötamise reeglid (eesmärgid).

Demonstratsioon

1. Mikrobioloogialaborites kasutatavate peamiste instrumentide ja seadmete paigutus ja kasutusala: termostaat, tsentrifuugid, autoklaav, kuivatuskapp, tööriistad ja riistad.

2. Bioloogilise mikroskoobi seade. Erinevad mikroskoopia meetodid: tumeväli, faasikontrast, luminestsents, elektron.

3. Mikroobide (pärm ja bakterid) preparaadid erinevate mikroskoopia meetoditega.

Ülesanne õpilastele

1. Perekonna pärmitaoliste seente mikroskoopilised ja eskiispreparaadid Candida kasutades erinevat tüüpi mikroskoopiaid.

Juhised

Mikrobioloogialaborites töötamise reeglid.

Tööd meditsiiniasutuse mikrobioloogilises laboris tehakse nakkushaiguste patogeenidega - patogeensete mikroorganismidega.

Seetõttu peavad töötajad nakkuse eest kaitsmiseks rangelt järgima sisemisi eeskirju:

1. Kõik töötajad peavad töötama meditsiiniliste hommikumantlite, mütside ja eemaldatavate jalanõudega. Laborisse sissepääs ilma hommikumantlita on rangelt keelatud. Vajalikel juhtudel panevad töötajad näole marli maski. Töö eriti ohtlike mikroobidega on reguleeritud spetsiaalsete juhistega ja see toimub turvalistes laborites.

2. Laboris on keelatud suitsetada ja süüa toitu.

3. Töökoht tuleb hoida eeskujulikult korras. Töötajate isiklikke asju tuleks hoida selleks ettenähtud kohas.

4. Juhuslikul kokkupuutel laual, põrandal ja muudel pindadel oleva nakatunud materjaliga tuleb seda kohta hoolikalt desinfitseeriva lahusega töödelda.

5. Mikroobikultuuride säilitamine, jälgimine ja hävitamine peab toimuma vastavalt erijuhendile. Patogeensete mikroobide kultuurid registreeritakse spetsiaalses ajakirjas.

6. Töö lõppedes tuleb käed põhjalikult pesta ja vajadusel desinfitseeriva lahusega töödelda.

Mikroskoobid ja mikroskoopia meetodid

Riis. 1.1. Mikroskoobid.

a — Biolami mikroskoobi üldvaade; b — MBR-1 mikroskoop: 1 — mikroskoobi alus; 2 - ainetabel; 3 - kruvid objektilaua liigutamiseks; 4 - preparaati vajutavad klemmid; 5 - kondensaator; 6 - kondensaatori kronstein; 7 - kruvi, mis tugevdab hülsi kondensaatorit; 8 - käepide kondensaatori liigutamiseks; 9 - kondensaatori iirise diafragma käepide; 10 - peegel; 11 - toruhoidja; 12 - makromeetriline kruvikäepide; 13 - mikromeetrilise kruvi käepide; 14 - sihtide revolver; 15 - läätsed; 16 - kaldtoru; 17 - kruvi toru kinnitamiseks; 18 - okulaar.

Mikrobioloogilisteks uuringuteks kasutatakse mitut tüüpi mikroskoope (bioloogiline, luminestsents-, elektrooniline) ja spetsiaalseid mikroskoopiameetodeid (faasikontrast, tumeväli).

Mikrobioloogilises praktikas kasutatakse kodumaiste kaubamärkide mikroskoope: MBR-1, MBI-2, MBI-3, MBI-6, "Bio-lam" R-1 jne (joonis 1.1). Need on mõeldud erinevate mikroobide kuju, struktuuri, suuruse ja muude omaduste uurimiseks, mille suurus ei ole väiksem kui 0,2-0,3 mikronit.

Sukeldusmikroskoopia

Kasutatakse meetodi eraldusvõime suurendamiseks valgusmikroskoopia. Valgusoptilise mikroskoopiasüsteemi lahutusvõime määratakse nähtava valguse lainepikkuse ja süsteemi numbrilise ava järgi. Numbriline ava näitab objektiivi siseneva valguse maksimaalse koonuse nurga suurust ja sõltub objekti ja objektiivi läätse vahelise keskkonna optilistest omadustest (murdumisvõimest). Objektiivi sukeldamine keskkonda (mineraalõli, vesi), mille murdumisnäitaja on klaasile lähedane, hoiab ära valguse hajumise objektilt.

Riis. 1.2. Kiirte kulg keelekümblussüsteemis, n on murdumisnäitaja.

Riis. 1.3. Kiirte tee tumevälja kondensaatorites, a on paraboloidkondensaator; b — kardioidkondensaator; 1 - objektiiv; 2 - keelekümblusõli; 3 - ravim; 4 - peegelpind; 5 - diafragma.

Seega saavutatakse arvulise ava ja vastavalt eraldusvõime suurenemine. Sukeldusmikroskoopia jaoks kasutatakse spetsiaalseid immersioonläätsi, mis on varustatud sildiga (MI - õliimmersioon, VI - veekümblus). Sukelmikroskoobi piireraldusvõime ei ületa 0,2 µm. Kiirte kulg keelekümblussüsteemis on näidatud joonisel fig. 1.2.

Mikroskoobi kogusuurendus määratakse objektiivi suurenduse ja okulaari suurenduse korrutisega. Näiteks 90-kordse sukeldusobjektiiviga ja 10-kordse okulaariga mikroskoobi suurendus on: 90 x 10 = 900.

Mikroskoopia läbiva valgusega (erevälja mikroskoopia) kasutatakse määrdunud objektide uurimiseks fikseeritud preparaatides.

Tumevälja mikroskoopia. Seda kasutatakse mikroobide intravitaalseks uurimiseks looduslikes värvimata preparaatides. Tumevälja mikroskoopia põhineb valguse difraktsiooni nähtusel vedelikus hõljuvate osakeste külgvalgustuse korral ( Tyndalli efekt). Efekt saavutatakse paraboloid- või kardioidkondensaatori abil, mis asendab bioloogilises mikroskoobis tavakondensaatorit (joonis 1.3). Selle valgustusmeetodiga satuvad objektiivi ainult objekti pinnalt peegelduvad kiired. Selle tulemusena on tumedal taustal (valgustamata vaateväli) nähtavad eredalt helendavad osakesed. Sellisel juhul on preparaat kujul, mis on näidatud joonisel fig. 1.4, b (vahetükil).

Faaskontrastmikroskoopia. Mõeldud kohalike ravimite uurimiseks. Faasikontrastseade võimaldab näha mikroskoobis läbipaistvaid objekte. Valgus läbib erinevaid bioloogilisi struktuure erineva kiirusega, mis sõltuvad objekti optilisest tihedusest. Selle tulemusena toimub valguslaine faasi muutus, mida silm ei taju. Faasiseade, mis sisaldab spetsiaalset kondensaatorit ja läätse, muudab valguslaine faasi muutused nähtavateks amplituudimuutusteks. Seega saavutatakse objektide optilise tiheduse erinevuse suurenemine. Nad omandavad suure kontrasti, mis võib olla positiivne või negatiivne. Positiivseks faasikontrastiks nimetatakse objekti tumedat kujutist heledas vaateväljas, negatiivseks - objekti heledat kujutist tumedal taustal (vt. joon. 1.4; lisal).

Faaskontrastmikroskoopia jaoks kasutatakse tavalist mikroskoopi ja täiendavat faasikontrastseadet KF-1 või KF-4 (joonis 1.5), samuti spetsiaalseid valgustajaid.

Luminestsentsmikroskoopia (või fluorestsentsmikroskoopia). Põhineb fotoluminestsentsi fenomenil.

Luminestsents- ainete kuma, mis tekib väliskiirguse mõjul: valgus, ultraviolett, ioniseeriv jne. Fotoluminestsents - objekti luminestsents valguse mõjul. Kui valgustate luminestsentsobjekti sinise valgusega, kiirgab see punaseid, oranže, kollaseid või rohelisi kiiri. Tulemuseks on objekti värviline pilt.

Riis. 1.5. Faasi-kontrastseade, a - faasieesmärgid; b - abimikroskoop; c - faasi kondensaator.

Kiirgava valguse lainepikkus (luminestsentsi värvus) sõltub luminestsentsaine füüsikalis-keemilisest struktuurist.

Esmane bioloogiliste objektide luminestsents (oma, või bioluminestsents) on täheldatud ilma eelneva värvimiseta, mis on tingitud tema enda luminestsentsainete olemasolust, sekundaarne (indutseeritud) - tekib spetsiaalsete luminestsentsvärvidega preparaatide värvimise tulemusena - fluorokroomid(akridiinoranž, auromiin, korifosfiin jne). Luminestsentsmikroskoopial on tavapäraste meetoditega võrreldes mitmeid eeliseid: tänu suurele kontrastsusele on võimalik uurida elusaid mikroobe ja tuvastada neid uuritavas materjalis väikestes kontsentratsioonides.

Laboratoorses praktikas kasutatakse fluorestsentsmikroskoopiat laialdaselt paljude mikroobide tuvastamiseks ja uurimiseks.

Elektronmikroskoopia. Võimaldab vaadelda objekte, mille mõõtmed ületavad valgusmikroskoobi eraldusvõimet (0,2 mikronit). Elektronmikroskoopi kasutatakse viiruste, erinevate mikroorganismide peenstruktuuri, makromolekulaarsete struktuuride ja muude submikroskoopiliste objektide uurimiseks. Valguskiired asenduvad sellistes mikroskoopides elektronide vooluga, mille lainepikkus on teatud kiirendustel umbes 0,005 nm, s.o. peaaegu 100 000 korda väiksem kui nähtava valguse lainepikkus. Elektronmikroskoobi kõrge eraldusvõime, ulatudes 0,1-0,2 nm-ni, võimaldab teil saada kasulikku kogukasvu kuni 1 000 000.

Nad kasutavad koos "läbipaistva" tüüpi seadmetega skaneerivad elektronmikroskoobid, objekti pinnast reljeefse kujutise pakkumine. Nende seadmete lahutusvõime on palju väiksem kui "edastus" tüüpi elektronmikroskoopidel.

Mikroskoobiga töötamise reeglid

Mis tahes valgusmikroskoobiga töötamine hõlmab vaatevälja õige valgustuse seadistamist ning preparaadi ja selle mikroskoopiat erinevate eesmärkidega. Valgustus võib olla loomulik (päevavalgus) või kunstlik, mille jaoks kasutatakse spetsiaalseid valgusallikaid - erinevat marki valgusteid.

Sukelläätsega preparaatide mikroskoopial tuleb rangelt järgida teatud järjekorda:

1) asetage slaidil ettevalmistatud ja peitsitud määrdumisele tilk immersiooniõli ja asetage see liuguslauale, kinnitades selle klambritega;

2) keerata revolver sukelobjektiivi märgini 90x või 100x;

3) langetage mikroskoobi toru ettevaatlikult, kuni lääts on sukeldatud õlitilga sisse;

4) määrake makromeetrilise kruvi abil ligikaudne fookus;

5) teostada preparaadi lõplik teravustamine mikromeetri kruviga, keerates seda sees ainult üks pööre.Ärge laske objektiivil kokku puutuda
paratoomia, kuna see võib põhjustada katteklaasi või objektiivi esiläätse purunemist (immersioonobjektiivi vaba kaugus on 0,1–1 mm).

Mikroskoobi lõpus eemaldage sukelläätselt õli ja liigutage revolver väikesele 8x objektiivile.

Tumevälja ja faasikontrastmikroskoopia jaoks kasutatakse natiivseid preparaate ("purustatud" tilk vms, vt teema 2.1); mikroskoobiga 40x objektiiviga või spetsiaalse immersioonobjektiiviga, millel on iirisdiafragma, mis võimaldab reguleerida numbrilist ava vahemikus 1,25 kuni 0,85. Slaidide paksus ei tohi ületada 1-1,5 mm, katteklaasid - 0,15-0,2 mm.

Mikrobioloogiliseks
uuringud haiglates ja kliinikutes või
eksisteerivad neist sõltumatult
bakterioloogilised laborid.
Nad saavad uurimistööks erinevaid
haigetelt inimestelt saadud materjal
(röga, uriin, mäda, väljaheited, veri, seljaaju
vedelik jne).
Lisaks on olemas ka sanitaar- ja bakterioloogilised laborid, milles
vesi on allutatud bakterioloogilisele kontrollile,
õhk ja toit.
2

Bakterioloogiliste laborite uurimisobjektid on:

Uuritavad objektid
Bakterioloogilised laborid on:
1. Eritumine kehast: uriin, väljaheide, röga, mäda ja
ka veri, patoloogiline ja surnukehamaterjal.
2. Keskkonnaobjektid: vesi, õhk, pinnas, väljauhtumised
laokaupadest, söödast, tehnoloogilisest toorainest
mis on saadud põllumajandusloomade tapmisel.
3. Toiduained, liha ja lihatoodete näidised,
piim ja piimatooted, mida tuleb anda
toiduks sobivuse hindamine.
3

mõeldud

bakterioloogiline labor
mõeldud
– sisaldavate materjalide uurimiseks
bakteriaalsete infektsioonide patogeenid,
– määrata sanitaar- ja mikrobioloogilisi näitajaid,
– oleku ja pinge kontroll
spetsiifiline immuunsus ja teised
mikrobioloogilised uuringud.
4

bakterioloogiline labor

Mikrobioloogilise töö spetsiifika nõuab, et laborile eraldatud ruum oleks isoleeritud:
- elutubadest,
- toiduplokid ja
– muud põhitegevusega mitteseotud tööstuspinnad.
Bakterioloogiline labor peaks asuma
teistest laboritest eraldatud ruumid
vajalik tehnika ja mööbel.
Laboris peab olema:
- eraldi sissepääs,
- riidekapp ja
- dušš.
5

bakterioloogiline labor

Bakterioloogiline labor sisaldab:
- ruum materjalide vastuvõtmiseks ja registreerimiseks;
– bakterioloogilised laboriruumid
uurimis- ja olmeruumid;
- autoklaav või steriliseerimine ("puhas",
"määrdunud") jäätmete desinfitseerimiseks
materjalist ja saastunud nõud;
– pesemine, varustatud nõude pesemiseks;
– bakterioloogiline köök – toiduvalmistamiseks,
söötme mahavalgumine, steriliseerimine ja säilitamine;
– vivaarium katseloomade pidamiseks;
- materjal varureaktiivide hoidmiseks,
riistad, seadmed ja kodutehnika.
6

bakterioloogiline labor

Loetletud abiruumid kui
kaasatakse iseseisvad struktuuriüksused
koosseisus suurte bakterioloogiliste
laborid.
väikestes laborites
bakterioloogiline köök ja
steriliseerimisruum on ühendatud üheks
tuba;
- spetsiaalne panipaik
katseloomi pole.
7

bakterioloogiline labor

Mikrobioloogilised ruumid
laborid vastavalt ohuastmele
töötajad jagunevad 2 tsooni:
I. "Nakkusohtlik" tsoon - ruum või rühm
laboriruumid, kus
manipuleerimine patogeensete bioloogiliste
agentide ja nende hoidla personal on riietatud
sobivat tüüpi kaitseriietust.
II. "Puhas" tsoon - ruumid, kus nad ei teosta
töö bioloogilise materjaliga, personal on riietatud
isiklikus riietuses.
8

Laboriruumid

Laboriruumide all, kus nad toodavad
kõik bakterioloogilised uuringud
valgusküllased ja avaramad toad.
Seinad nendes ruumides kuni 170 cm kõrguseni põrandast
värvitakse heledates toonides õlivärviga või
katta plaatidega.
Põrand on kaetud reliini või linoleumiga.
Selline viimistlus võimaldab teil kasutada puhastamisel
ruumid desinfitseerivate lahustega.
Igas toas peaks olema kraanikauss koos torustikuga ja anum desinfektsioonivahendiga.
lahendus.
9

10. Bakterioloogiline labor

Nõutavad ruumid hõlmavad järgmist:
Sooleinfektsioonide laborid
Piiskinfektsiooni laborid
Sanitaar- ja bakterioloogiline labor
Seroloogiline labor
Abiruumid:
sredovarnya,
pesemine
Steriliseerimine
register
Laoruumid
Vannituba töötajatele
Vivarium
Iga labor peab olema varustatud mikroskoobiga,
autoklaavid, termostaadid, kuivatamine ja steriliseerimine
kapid, vere hüübimisaparaadid, tsentrifuugid,
laborikaalud, pH-meeter, pesuvann
10

11. Bakterioloogiline labor

Ühes toas on klaasitud boks varustatud isoleeritud ruumiga eesruumiga (eelboks)
töö tegemine aseptilistes tingimustes.
Kasti panid nad töökoha kohale põllukultuuride laua, tabureti
paigaldage bakteritsiidsed lambid.
Eesruumis on kapp steriilsete hoiustamiseks
materjalist.
"Nakkusliku" tsooni ruumide aknad ja uksed peaksid olema
pitseeritud.
Olemasolev väljatõmbeventilatsioon "nakkuspiirkonnast" peaks
olema isoleeritud teistest ventilatsioonisüsteemidest ja
varustatud peente õhufiltritega.
11

12. Mikrobioloogiliste uuringute ruumid

Mikrobioloogilised ruumid
uurimisseadmed:
termostaadid,
külmikud,
tsentrifuugid,
kaalud,
veevannid,
elektromagnetilised segajad.
Laudadele asetage vajalik
varustus.
Nakatunud materjaliga töötamine
viiakse läbi eelkastiga kastis.
12

13. Bakterioloogiline labor

Karbis võetakse saadud näidised lahti, ettevalmistatakse ja fikseeritakse
määrib-jäljed, viivad läbi mikroorganismide põllukultuure
toitainekeskkond.
Seetõttu on kastis lauad, millele nad asetavad
tööks vajalikud tööriistad: riiulid katseklaaside jaoks,
toitekeskkonnaga katseklaasid ja Petri tassid, steriilsed
kasutatud pipetid, mördid, konteinerid desinfektsioonivahenditega
nõud jne.
Jalgrataste eelkarbis peab olema steriilne
hommikumantlid, mütsid, maskid, samuti riietusruumis peaksid olema
sisejalatsid.
Eesruumi saab paigutada termostaadid, külmikud,
tsentrifuugid ja muud seadmed.
Kastides ja eelkastides igapäevaselt läbi viia märg
puhastamine, desinfitseerimine ja kiiritamine
bakteritsiidsed lambid 30-40 minutit enne käivitamist
tööl ja pärast tööd.
13

14. Autoklaav

Autoklaavis peab teil olema kaks
autoklaav:
üks autoklaav puhaste materjalide jaoks (ees
nõude steriliseerimine, toitainekeskkond,
tööriistad);
teine ​​autoklaav nakatunud materjalide jaoks
(nakatunud neutraliseerimiseks
tööriistad ja materjalid).
14

15. Pesemine

Pesemine on mõeldud pesemiseks ja
nõude töötlemine.
Pesemisruumis peab olema kraanikauss koos
külm ja soe vesi ja pliit.
Pesumasin peab olema varustatud
puhastusvahendid ja -seadmed
nõud
Pesemisruumis asuvad kuivatuskapid.
15

16. Vivaarium

Vivaarium on ruum, mida kasutatakse
laboriloomade pidamiseks.
Vivaariumis peab olema:
karantiiniosakond,
ruumid katse- ja tervetele loomadele,
puuride pesemise ja desinfitseerimise võimalused, inventar ja
kombinesoonid,
toiduvalmistamise köök,
sahver,
sööt,
põletusahi.
Kõik vivaariumi ruumid peaksid olema
üksteisest isoleeritud.
16

17.

bakterioloogilises laboris
ruumid on paigutatud nii, et
"määrdunud" ja "puhtad" ojad ei ole
ristis ja ei puutunud
17

18. Bakterioloogialaboris töötamise reeglid

Labori töötajad peavad järgima järgmist
määrused:
1. Töötada on lubatud eririietuses - hommikumantlis ja müts. poksis
tööta steriilses kitlis, maskis, mütsis, vajadusel pane selga
kummikindad ja kaitseprillid.
Vahetage kindlasti jalanõud!
2. Keelatud on väljuda laborist kitlites või seljas
üleriided hommikumantlil.
3. Laboris on keelatud suitsetada ja süüa toitu.
4. Kogu laborisse analüüsimiseks sisenev materjal peab olema
kohelda nakatununa.
Seetõttu tuleb materjali lahtipakkimisel olla ettevaatlik.
Konteinerid tuleb väljastpoolt desinfitseeriva lahusega pühkida ja asetada
kandikutele või küvettidesse.
18

19. (jätkub)

5. Nakatunud materjaliga kokkupuutel hommikumantlil, kätel, laual, kingadel on vajalik
viia läbi desinfitseerimine ja teavitada sellest laborijuhatajat.
6. Nakatunud materjal tuleb hävitada autoklaavimise teel. tööriistad ja
ka töölaua pind pärast tööd desinfitseeritakse.
7. Keelatud on laborist välja viia seadmeid, inventari, materjale ilma
eelnev desinfitseerimine.
8. Pipetid, slaidid, katteklaasid ja muud kasutatud riistad,
desinfitseeritakse desinfitseerimisvahendisse kastes.
9. Töö lõppedes tehakse töökoht korda ja desinfitseeritakse põhjalikult.
Sisse hoitakse edasiseks tööks vajalikke mikroorganismide kultuure
külmkapp.
10. Ainult isikud, keda on hoiatatud potentsiaali eest
ohud ja kes on täitnud erinõuded (näiteks immuniseerimine, kaitseriietus
jne.)
19

20. Bakterioloogialabor säilitab järgmist dokumentatsiooni:

1. Kultuuride muuseumitüvede inventariraamat.
2. Materjali liikumise ajakiri laboris.
3. Steriliseerimise ja hävitamise register
nakatunud materjal.
4. Nakatunud katseloomade register.
5. Teadusajakiri (ekspertiis).

Bakterioloogiline labor on teaduslik ja praktiline asutus, mis teostab immunoloogilisi ja muid mikrobioloogilisi uuringuid. Seal on meditsiini-, veterinaar- ja tööstuslikud bakterioloogilised laborid.

Diagnooside selgitamiseks ning sanitaar-epidemioloogiliseks kontrolliks korraldatakse uuringute läbiviimiseks sanitaar- ja epidemioloogiajaamades jm meditsiinibakterioloogilisi laboreid. Bakterioloogialaboris on: keskmine tehas, kraanikauss, ettevalmistusruum, steriliseerimisruum jne. Bakterioloogialaborite seade ja seadmed peavad olema kohandatud steriilsetes tingimustes uuringute tegemiseks, tagades personalile võimaliku nakatumise. Bakterioloogilise labori ruum peaks olema valgusküllane ja avar. On vaja välistada mustandite võimalus. Spetsiaalne koht on reserveeritud värvimispreparaatide jaoks.

Bakterioloogi töökoha kohustuslikuks varustuseks on põleti, kasutatud pipettide jaoks karboolhappe lahusega purk, suletav anum, katseklaaside ja bakterisilmus, emailitud küvetid, pintsetid, käärid, skalpell, slaidid ja katteklaasid . Bakterioloogilises laboris peaksid olema metallalused Petri tasside jaoks, tsingitud ämbrid või mahutid kasutatud tasside äraviskamiseks. Lisaks tavalistele laboriklaasidele on bakterioloogilised laborid varustatud spetsiaalsete klaasnõudega: tihedal söötmel kasvatamiseks, bakterimadratsid jne. Eriti ohtliku materjali pipettidesse imemiseks on vaja ka kummipirne. Bakterioloogilised tuleb puhtalt pesta, steriliseerida kuumtöötlemisega ja sulgeda steriilsete vatikorkidega. Ärge kasutage nõudel kemikaale, kuna nende jäägid võivad mõjutada mikroobide arengut. Bakterioloogilise labori jaoks on kõige olulisemad seadmed mikroorganismide külvamiseks (bakteriaasad, Pasteuri pipetid, klaasist ja plaatinast spaatlid). Aseptilistes tingimustes põllukultuuride kasvatamiseks on bakterioloogilised laborid varustatud spetsiaalsete ultraviolettlampidega klaasitud kastidega (vt.).

Bakterioloogialabor vajab: külmkappi seerumite ja muude bioloogiliste substraatide hoidmiseks; illuminaatoriga mikroskoop; tsentrifuug; või termostaadiruum bakterite kasvatamiseks; seadmed erinevate segude loksutamiseks; , kuiva õhu sterilisaator (Pasteur ahi) steriliseerimiseks, nõud ja elektrilised sterilisaatorid. Abiruumid laboriloomadega töötamiseks, nõude pesemiseks ja kuivatamiseks, toitainete väljastamiseks jne peavad olema sobivalt varustatud.

Bakterioloogilises laboris töötades, eriti patogeensete mikroorganismidega, tuleb järgida järgmisi reegleid.
1. Kõik bakterioloogilises laboris viibivad isikud peavad kandma kombinesooni.

2. Ruumis on söömine ja suitsetamine keelatud.

3. Iga töötaja peaks kasutama ainult oma töökohta.

4. Kõik toimingud tuleb läbi viia steriilsuse reeglite järgi: kõik põllukultuurid viiakse läbi põleti leegi läheduses, nakatunud vedelike ülekandmine toimub desinfitseerimislahusega kandiku kohal jne.

5. Kõik inventar, mis on kokku puutunud nakkusohtliku materjaliga, kuuluvad steriliseerimisele või hävitamisele.

6. Kõik kultuurid, aga ka nakatunud loomad, registreeritakse ja registreeritakse spetsiaalse vormi abil päevikusse.

Bakterioloogiline labor on teaduslik ja praktiline asutus, mis teostab mikrobioloogilisi uuringuid. Haiglate kliinilised ja diagnostilised bakterioloogilised laborid viivad sõltuvalt viimase profiilist läbi diagnoosi kindlakstegemiseks või selgitamiseks vajalikud uuringud. Sanitaar- ja epidemioloogiajaamade bakterioloogilised laborid viivad läbi elanikkonna ennetavaid uuringuid ning toiduainete sanitaar- ja bakterioloogilisi uuringuid. Kontrollifunktsioone täitvad bakterioloogilised laborid on kõrgelt spetsialiseerunud näiteks bakteripreparaate tootvate ettevõtete juures. Lisaks meditsiinilaboritele on olemas veterinaarbakterioloogiliste laborite võrgustik, mis teostavad loomade diagnostilisi ja ennetavaid uuringuid, ning spetsialiseeritud bakterioloogialaborid, mis teenindavad toiduainetööstuse, põllumajanduse jm vajadusi. Vastavate uurimisinstituutide bakterioloogilised laborid teostavad erinevaid töid. uurimisülesanded.

Suure bakterioloogilise labori struktuur hõlmab: laborit ennast, söötmetehast, pesemist, ettevalmistamist, steriliseerimist ja vivaariumi. Bakterioloogilise labori ruum peaks olema valgusküllane ja avar. Valamu kohale on kinnitatud pudel käte desinfitseerimiseks mõeldud lahusega. Töölauad on kaetud linoleumi või klaasiga. Gaasi- või alkoholipõleti, purk kasutatud pipettide jaoks 3% karboolhappe lahusega, anum vati jaoks, bakterisilmus, bakteristandardite komplekt, katseklaasiriiulid, küvetid, pintsetid, käärid, skalpell, slaidid ja katteklaasid asetatakse lauale. Bakterioloogiline labor peaks olema varustatud mahutitega nakatunud nõude äraviskamiseks. Tavaliselt on bakterioloogilises laboris preparaatide värvimiseks spetsiaalne laud.

Riis. 1. Petri tassid.

Riis. 2. Madrats bakterite kasvatamiseks.

Riis. 3. Pasteur pipetid.

Bakterioloogilises laboris on lisaks tavalistele keemilistele klaasnõudele vaja spetsiaalseid klaasnõusid: klaasist Petri tassid (joon. 1) bakterite kasvatamiseks tihedal söötmel; bakterimadratsid (joon. 2), et saada suures koguses mikroobset massi; Roux-torud koos kitsendusega bakterite kasvatamiseks kartulikarvadel; Wassermani katseklaasid pikkusega 90 mm ja siseläbimõõduga. 9 - 10 mm RSK seadistamiseks ja aglutinatsioonireaktsiooniks; sademete torud pikkusega 90 mm ja dia. 3-5 mm; bakterikatseklaasid bakterite kasvatamiseks vedelal ja tahkel toitainekeskkonnal; Pasteur pipetid (joonis 3); Mohri pipetid nakatunud vedela materjali külvamiseks; automaatpipetid või pirnidega pipetid, välja arvatud materjali suu kaudu imemine. Bakterioloogialaboris kasutatavad klaasnõud tuleb leotada 1-2% HCl lahuses ja steriliseerida kõrgel temperatuuril. Tahkele toitainekeskkonnale inokuleeritakse klaasist spaatlid (joonis 4) ja bakterisilmus (joonis 5). Kasvatage baktereid termostaatides või termostaatruumides.

Riis. 4. Klaasist spaatlid.

Riis. 5. Bakteri silmus.

Anaeroobsete bakterite uurimisega tegelev bakterioloogiline labor peab olema varustatud anaeroobika, vaakumpumpadega, mida kasutatakse ka filtreerimiseks ja ultrafiltreerimiseks. Steriilsuse säilitamiseks bakterikultuuridega töötamisel on bakterioloogilised laborid varustatud spetsiaalsete glasuuritud kastidega. Kõiki toitekeskkondi, bakterikultuure, seerumeid hoitakse külmkapis.

Igas bakterioloogilises laboris peaks olema tsentrifuug, loksuti (joonis 6) ja mikroskoop. Enamiku uuringute puhul kasutatakse MBI-1 mikroskoopi, millel on OI-7 illuminaator ja faasikontrastseade.

Riis. 6. Aparaat raputamiseks (shuttel-aparaat).

Bakterioloogiline labor peaks olema varustatud steriliseerimisseadmetega: autoklaav, Kochi aparaat, Pasteuri ahi, seerumi koagulatsiooniaparaat. Vedelate substraatide steriliseerimiseks kasutage bakterifiltreid (vt.). Bakterioloogilistes laborites peaksid olema seadmed söötme valamiseks (joonis 7), reaktiivide komplektid mõnede keemiliste analüüside tegemiseks, samuti Michaelise komparaator või potentsiomeeter söötme pH määramiseks.

Riis. 7. Seade kandja valamiseks.

Loomadega töötamine bakterioloogilises laboris toimub ainult vivaariumis (vt.).

Bakterioloogialaboris töötades tuleb järgida järgmisi reegleid: 1) laboris peavad kõik kandma kombinesooni; 2) igal töötajal peab olema töökoht; 3) bakterioloogialaboris on keelatud süüa ja suitsetada; 4) nakkusohtliku materjaliga töötamisel tuleb kasutada tööriistu; instrumendid, mis on kokku puutunud nakkusohtliku materjaliga, tuleb steriliseerida; 5) vedela materjali imemisel on soovitatav kasutada pirne; kõik pipetid peavad olema vatiga kinni keeratud; 6) nakatunud vedelike ülekandmine toimub desinfitseeriva lahusega anuma kohal; 7) põleti juures tehakse tööd nakatunud materjaliga, põletades katseklaasi servi, silmuseid, spaatleid jms; 8) nakatunud materjaliga nõudele peab olema kantud kultuuri nimetus, number ja kuupäev; 9) nakkusohtliku materjali sattumisel ümbritsevatele esemetele viiakse läbi desinfitseerimine - see koht valatakse desinfitseeriva lahusega ja põletatakse põleva piiritusega tampooniga; 10) nakatunud materjalid, nõud registreeritakse, pannakse paakidesse ja steriliseeritakse samal päeval; 11) kultuure säilitatakse agarikolonnides suletud etikettidega katseklaasides; 12) kõikide kultuuride, samuti nakatunud loomade registreerimine toimub spetsiaalses vormis ajakirjas.

TUNNI TEEMA: Bakterioloogiline labor ja tööreeglid selles. Mikroorganismide klassifikatsioon. Bakterite morfoloogia. Mikroobide tüübi määramise meetodid. bakterioskoopiline meetod. Sukeldussüsteemiga mikroskoopiatehnika.

ÕPI-EESMÄRK: Tutvuge bakterioloogialabori seadme ja tööreeglitega selles. Tutvuge mikroorganismide klassifitseerimise põhimõtetega. Uurida bakterite morfoloogilisi tunnuseid ja mikroobide tüübi määramise meetodeid. Omandada bakterioskoopilist uurimismeetodit ja sukeldumissüsteemiga mikroskoopia tehnikat.

TUNNI EESMÄRGID:

1. Tutvuge bakterioloogilise labori ülesehitusega ja tööreeglitega selles.

2. Tutvuda mikroorganismide klassifitseerimise põhimõtetega.

3. Uurida bakterite morfoloogilisi tunnuseid ja mikroobide tüübi määramise meetodeid.

4. Omandage sukeldumissüsteemiga mikroskoopia tehnikat.

Bakterioloogiline laboriseade

Bakterioloogialabor on mõeldud bakteriaalsete infektsioonide patogeene sisaldavate materjalide uurimiseks, sanitaar- ja mikrobioloogiliste näitajate määramiseks, spetsiifilise immuunsuse seisundi ja intensiivsuse kontrollimiseks ning muudeks mikrobioloogilisteks uuringuteks. Bakterioloogiline labor peaks asuma teistest laboritest eraldatud ruumides, kus on vajalik varustus ja mööbel. Laboris peaks olema eraldi sissepääs, garderoob ja duširuum. Bakterioloogiline labor peaks sisaldama järgmisi ruume:

Ruum materjalide vastuvõtmiseks ja registreerimiseks;

Kastruumid mikrobioloogilisteks uuringuteks;

autoklaav;

pesemine;

Vivarium.

Mikrobioloogiliste uuringute ruumid on varustatud termostaatide, külmikute, tsentrifuugide, kaalude, veevannide ja elektromagnetseguritega. Vajalik varustus asetatakse laudadele. Tööd nakatunud materjaliga tehakse aastal poks Koos eelpoksija. Kasti sissepääsu juures peaks olema desinfektsioonivahendiga immutatud matt. Kastis võetakse saadud proovid lahti, valmistatakse ja fikseeritakse määrded-jäljed, viiakse läbi mikroorganismide inokulatsioonid toitekeskkonnale. Seetõttu asetatakse kasti lauad, millele asetatakse tööks vajalikud tööriistad: anumad desinfitseerimisvahenditega kasutatud nõude jaoks, riiulid katseklaasidele, katseklaasid ja Petri tassid toitainekeskkonnaga, steriilsed pipetid, uhmrid jne, korgid, maskid ja ka riietusruumis peaksid olema vahetatavad jalanõud. Eesruumi saab paigutada termostaadid, külmikud, tsentrifuugid ja muud seadmed. Kastides ja eelkastides toimub märgpuhastus, desinfitseerimine ja bakteritsiidsete lampidega kiiritamine iga päev 30-40 minutit enne ja pärast tööd.

AT autoklaavitud vaja on kahte autoklaavi: üks autoklaav puhaste materjalide jaoks (klaasnõude, toitekeskkonna, instrumentide steriliseerimiseks); teine ​​autoklaav nakatunud materjalide jaoks (nakatunud instrumentide ja materjalide kõrvaldamiseks).

pesemine mõeldud nõude pesemiseks. Nakatunud materjaliga saastunud nõusid, pipette ja instrumente tuleb pesta alles pärast steriliseerimist. Sellel on kuivatuskapid.

vivaarium viitab ruumidele, mida kasutatakse laboriloomade pidamiseks. Vivaariumis on vajalik karantiiniosakond, ruumid katse- ja tervetele loomadele, ruumid puuride pesemiseks ja desinfitseerimiseks, inventar ja kombinesoonid, köök toidu valmistamiseks, sahver, sööt, põletusahi. Kõik vivaariumi ruumid peaksid olema üksteisest isoleeritud.

Nakkushaiguste patogeenidega töötingimuste reguleerimine toimub vastavalt mikroorganismide ohtlikkuse astmele inimesele. Selle põhjal on kindlaks tehtud neli patogeensete bioloogiliste mõjurite (PBA) rühma:

I rühm: eriti ohtlike infektsioonide (katk, rõuged jne) patogeenid

II rühm: väga nakkavate bakteriaalsete, seen- ja viirusnakkuste (siberi katk, koolera, marutaudi jne) patogeenid

III rühm: iseseisvate nosoloogiliste vormidena tuvastatud bakteriaalsete, seen-, viirus- ja algloomsete infektsioonide (läkaköha, teetanus, tuberkuloos jne) tekitajad

IV rühm: bakteriaalse, seenhaiguse, viirusliku septitseemia, meningiidi, kopsupõletiku, enteriidi, toksiliste infektsioonide, ägeda mürgistuse (pseudomonaalne infektsioon jne) tekitajad.

Enamik mikrobioloogilisi laboreid töötab PBA III ja IV rühmaga ning eriti ohtlike infektsioonide (I ja II rühm) patogeenide uurimisega tegelevad ainult spetsialiseeritud laborid.

PPA III ja IV rühmaga töötavad baaslaborid peavad vastama mitmetele nõuetele (eraldi hoone või eraldi sissepääs, vee- ja elektrivarustussüsteemide olemasolu, küte, ventilatsioon jne) ning omama tootmisvõimsusele vastavat vajalikku ruumikomplekti. ja läbiviidud uuringute hulk. Igas laboris peaks olema "puhas" ja "määrdunud" ala.

"Määrdunud" tsooni kuuluvad ruumid materjali vastuvõtmiseks ja registreerimiseks, kastid ja ruumid mikrobioloogilisteks uuringuteks, termostaat, autoklaav materjali desinfitseerimiseks. Kõigi ruumide aknad ja uksed peavad olema hermeetiliselt suletud. Elusate mikroorganismidega töötamiseks mõeldud ruumid peaksid olema varustatud bakteritsiidsete lampidega või bioloogilise turvakapiga. "Musta" tsooni sissepuhke- ja väljatõmbeventilatsioon peab olema varustatud väljatõmbeõhu peenfiltritega. Laudade, autoklaavide, desinfitseerimislahustega konteinerite, puhta ja nakatunud materjali riiulite kohustuslik märgistamine. Laboratoorium peaks olema varustatud spetsiaalse mööbliga, siledate põranda- ja seinapindadega, mis on pesu- ja desinfektsioonivahenditele vastupidavad.

"Puhas" tsoonis on ruumid eeltööde tegemiseks (pesuruum, ettevalmistusruum, ruum toitekeskkonna ettevalmistamiseks ja täitmiseks jne), ruum dokumentatsiooniga töötamiseks, ruumid külmikutega toitekeskkonna ja diagnostiliste preparaatide hoidmiseks, garderoob üleriiete jaoks puhkeruum . "Puhtas" tsoonis on võimalik töötada elutu PBA-ga (seroloogilised, molekulaargeneetilised, biokeemilised uuringud).

Patogeensete mikroorganismidega töötamise ohutuse tagamine hõlmab kahte peamist tegurit: tehnilist ja inimlikku. Tehniliseks teguriks on tööks vajalike "puhaste" ja "määrdunud" tsoonide, seadmete, kaitsesüsteemide jms olemasolu. Inimfaktor on inimtegevuse õigsus ohutuse tagamiseks, professionaalsete seadmete oskuse tase, teadmised võimalikest nakkusallikatest ja -mehhanismidest, asjakohane väljaõpe ja väljaõpe.

Töö haridusliku bakterioloogia laboris on seotud ka kahe ohtliku teguriga - nakkushaigusi põhjustavad mikroorganismid ja lahtine tulekahju, mis nõuab epideemiavastaste ja tuleohutusmeetmete järgimist. Õpilased on kohustatud tutvuma ohutusreeglitega ja neid rangelt järgima:

Vajalik:

Töö pikkade varrukatega meditsiinilistes hommikumantlites, meditsiiniliste mütside ja kingakattega;

Isiklikke asju hoia selleks selleks ettenähtud kohas, üleriided jäta garderoobi;

Igat tüüpi tegevusi viiakse läbi teatud piirkonnas: töö mikroorganismidega - spetsiaalselt varustatud laborilaual, protokollide täitmine - töölaual;

Nakatunud materjaliga kokkupuutel laual, põrandal ja muudel esemetel teavitada koheselt õpetajat ja desinfitseerida;

· Nakatunud materjalid tuleb asetada tugevatesse veekindlatesse või desinfitseerimislahusega anumatesse, mis suletakse enne laborist väljaviimist.

Töö ajal tuleb laboriuksed suletuna hoida.

Töö lõppedes peske käed põhjalikult, vajadusel töödelge desinfitseeriva lahusega.

laboris söömine

tõmmake vedelik suu kaudu pipetti

süüta üks piirituslamp teisest

kanda põlevat alkoholilampi

Pärast ettenähtud kasutuse lõppu jätke piirituslamp põlema

Jätke töökohale fikseerimata preparaadid, kultuuridega Petri tassid ja muud nakatava materjaliga riistad

puudutage seemnetega Petri tassides testitavat materjali kätega