УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ

Материал для исследования Соскоб из уретры или цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи. У новорожденных в качестве материала для исследования используют соскоб с конъюктивы глаз и задней стенки глотки. У девочек в качестве материала для исследования используют соскоб из вульвы, у мальчиков - мочу.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки За 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Особенности взятия материала из уретры

• перед взятием материала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов;
• непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором;
• при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала;
• у женщин перед введением зонда в уретру проводится ее массаж о лобковое сочленение;
• в уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5 см, у мужчин - на 3-4 см и затем делается несколько вращательных движений; у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия уретры;

Особенности взятия материала из цервикального канала

• перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором;
• зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см;
• при наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать на границе здоровой и измененной ткани;
• при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища;

После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Про-бирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взя-тия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -20 0 С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия секрета предстательной железы

Перед взятием секрета простаты головка полового члена обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Секрет простаты берется после предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части выдавливается простатитческий секрет. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике.

Особенности взятия (сбора) мочи

Мочу собирают утром натощак после сна или не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания. Утренняя моча отстаивается в течение 1 часа, затем осторожно сливается, оставляя только придонную часть - около 10 мл. Этот остаток сливают в центрифужную пробирку и центрифугируют. Затем надосадочную жидкость вновь сливают, а осадок (без жидкости) зондом переносят в пробирку для ПЦР.

До получения осадка мочу нельзя охлаждать или замораживать.

Особенности взятия материала с задней стенки глотки

Одноразовый зонд вводят за мягкое небо в носоглотку и проводят по задней стенке глотки. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

Особенности взятия материала с конъюктивы глаз

При наличии обильного гнойного отделяемого его убирают стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Соскоб берут с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. При взятии соскоба необходимо придерживать веко руками, чтобы при моргании ресницы не касались зонда.

После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ МИКОПЛАЗМОЗ

Материал для исследования Отделяемое уретры, влагалища, цервикального канала, моча (центрифугат утренней первой и средней порций), секрет простаты, сперма.

Особенности взятия материала из влагалища

Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано. Влагалищное отделяемое собирают стерильным одноразовым зондом из заднего нижнего свода или с патологически измененных участков слизистой и помещают в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСТПЕСС”. У девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях - из заднего свода влагалища через гименальные кольца. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

ГОНОРЕЯ

Материал для исследования Отделяемое уретры, цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки См. урогенитальный хламидиоз.

За 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры. Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Перед взятием материала необходимо воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений. Женщины накануне обследования не должны проводить туалет наружных половых органов и спринцевание. Исследуемый материал должен быть без примесей крови. Не следует для исследования брать свободно стекающие уретральные выделения. Секрет простаты следует брать только после окончания острых явлений простатита. При вялотекущей и хронической гонорее перед исследованием необходимо провести провокацию.

Методы провокации при гонорее:

• биологическая: введение гоновакцины (500 млн. микробных тел) взрослым однократно, внутримышечно, детям старше 3-х лет - 100-200 млн. микробных тел; детям до 3-х лет введение гоновакцины не рекомендовано;
• термическая: применение в течение 3-х дней диатермии с абдоминально-вагинально-сакральным расположением электродов по 30, 40, 50 мин или индуктотермии по 10, 15, 20 мин; взятие материала лучше всего провводить из уретры, цервикального канала через 1 час после каждого прогревания;
• механическая: наложение металлического колпачка на шейку матки женщин на 4 часа, проведение массажа уретры у мужчин на буже в течение 10 мин;
• алиментарная: употребление соленой, острой пищи и алкоголя за 24 часа до исследования.

Взятие материала производится после провокации и через 24-48-72 часа.

Для получения наиболее достоверных результатов необходимо проведение повторных исследований.

ТРИХОМОНИАЗ

Материал для исследования Отделяемое из уретры (у мужчин), влагалища, секрет простаты.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки См. урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.

ТУБЕРКУЛЕЗ (внелегочные локализации)

Материал для исследования Моча, мазки из цервикального канала, уретры.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки За 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры. См. урогенитальный хламидиоз.

ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ АССОЦИИРОВАННЫЕ С Mycoplasma pneumoniae

Материал для исследования Мазок из носоглотки.

Особенности взятия мазка из носоглотки Взятие мазка проводится натощак или не ранее, чем через 2-4 часа после еды. При взятии материала необходимо хорошее освещение, пациент сидит против источника света, корень языка придавливают шпателем, материал берут стерильным зондом, не касаясь языка, слизистой щек и зубов и опускают в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при -200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.

ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ (гастрит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки), АССОЦИИРОВАННЫЕ С Helicobacter pylori

Материал для исследования Биоптаты антрального отдела желудка, биоптаты двенадцатиперстной кишки, биоптаты десен, мазки из зубодесневого кармана.

Особенности взятия биопсийного материала

Взятие биопсийного материала проводится во время эндоскопического исследования. Перед началом противохеликобактерной терапии биопсийный образец берется из антрального отдела желудка. При контроле лечения взятие биопсийного образца проводится не ранее чем через 4 недели после проведения противохеликобактерной терапии из тела желудка. Взятый биопсийный образец опускается в стерильную сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения возможна заморозка взятиго биопсийного материала при температуре -20 0 С.

Особенности взятия биоптатов десен, мазков из зубодесневого кармана и слюны

Биопсийный материал из десен, мазки из зубодесневого кармана и слюна берутся у пациентов с гастродуоденальной патологией в анамнезе при наличии у них гингивитов и парадонтоза.

Взятый биопсийный образец опускается в стерильную сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения возможна заморозка взятиго биопсийного материала при температуре -20 0 С.

Мазки из зубодесневого кармана собираются в стерильную пробирку (эппендорф) с физиологическим раствором. В этом случае пробирки могут храниться в холодильнике (+4 0 С- +6 0 С) не более 12 часов, а их транспортировка осуществляется в сумке-холодильнике.

ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ

Herpes Simplex virus II; Citomegalovirus; H. papiloma virus 16, 18

Исследуемый материал- мазки

При герпетической инфекции соскобы лучше всего брать с генитальных поражений (везикул, язвочек). При отсутствии генитальных поражений соскоб берется из цервикального канала. При диагностике цитомегаловирусной инфекции материалом для исследования могут быть, мазок из задней стенки глотки, соскобы из влагалища, уретры и цервикального канала, слюна, спиномозговая жидкость. При диагностике папилломавирусной инфекции материалом для исследования могут быть мазок из носоглотки, с конъюктивы глаза, соскоб из цервикального канала, шейки матки, т.е. слизистых (неороговевабщий эпителий).

Взятие биологического материала Взятие биологического материала повозможности должно проводиться в период обострения инфекции. См. урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.

Herpes Simplex virus I; Herpes Simplex virus II; Herpes Simplex virus VI
Citomegalovirus; Epstein Barr virus

Исследуемый материал Нативная кровь.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки Кровь на исследование желательно брать натощак.

Венозная кровь в количестве 1-1,5 мл отбирается в стерильную пробирку (эппендорф) объемом 1,5 мл с раствором ЭДТА. Пробирка с кровью может храниться в холодильнике (+4 0 С- +6 0 С) не более 24 часов. Пробирку не замораживать. Исследование будет проводиться из плазмы и форменных элементов крови.

HBV-ДНК; Определение концентрации HBV-ДНК методом конкурентной ПЦР
HCV-РНК (полуколич. оценка) + anti-HCV; HCV-РНК с определением генотипа HCV+ anti-HCV; Hepatitis G; TTV-ДНК

Исследуемый материал Сыворотка крови.

Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки Взятие венозной крови и приготовление сыворотки см. в разделе определение концентрации гомонов методом ИФА. Исследованию подлежит cыворотка, не содержащая примеси эритроцитов. В случае необходимости длительного хранения исследуемого образца крови (только для гепатитов B, C, G) необходимо отобрать 1 мл сыворотки или плазмы крови и хранить ее при температуре -20 0 С не более 2-х недель.

КОМПЛЕКСНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ВАГИНОЗ

Исследуемый материал Мазки из заднего нижнего свода влагалища.

Для комплексной диагностики бактериального вагиноза необходимо:
Взять соскоб эпителиальных клеток из заднего или бокового свода влагалища на отдельное одноразоаое предметное стекло, подписать и высушить его. Хранить стекло при комнатной температуре.
Удалить слизь и взять соскоб эпителиальных клеток из заднего или бокового свода влагалища одноразовым зондомщеткой типа цервикс-браш в ПЦР-пробирку с реактивом “ДНК-ЭКСПРЕСС”. Хранить пробирку в морозильной камере при температуре минус 20оС до 10 дней.
Предметное стекло и ПЦР-пробирку отправить в лабораторию “Литех” с полностью заполненным направлением.

Взятие биологического материала и условия его транспортировки

См. особенности взятия материала из влагалища для цитологического и ПЦР исследований.

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

«Нижегородский медицинский колледж»

(ГБОУ СПО НО «НМК»)

Контрольная работа

Тема: «Организация приёма, маркировки и регистрации биоматериала»

Выполнил:

студент группы 221-IV лаб.

Степанычев М.Н.

Преподаватель:

Белова М.Н.

Н. Новгород 2016

Введение

1. Теоретическая часть

1.1 Оформление направлений

1.2 Режимы выполнения лабораторных исследований

1.3 Условия хранения и транспортировки материала для клинических лабораторных исследований

1.4 Область применения

1.5 Организация процесса транспортировки биоматериала курьером и ответственность курьера

1.6 Прием биоматериала в лаборатории

1.7 Передача биоматериала и направлений в соответствующие подразделения лаборатории

1.8 Регистрация бланков-заказов операторами

2. Практическая часть

Заключение

Введение

Лабораторные исследования являются наиболее чувствительными показателями состояния пациента. Специалисты клинической лабораторной диагностики уже давно осознали, что многие факторы способны повлиять на результаты лабораторных исследований. Среди этих факторов: правильно доставленные и грамотно оформленные образцы биоматериала и сопутствующая документация. При отсутствии такой вспомогательная информации (факторов, оказывающих влияние на лабораторные исследования) клиницист может дать неправильную интерпретацию полученного результата и предпринять в отношении пациента неверные действия.

Цель данной контрольной обратить внимание на необходимость пересмотра правил приёма и оформления документации биологического материала. Правильное применение информации должно привести к сокращению ненужных исследований, уменьшению расходов и к лучшему пониманию результатов исследований.

Цель:

Изучить Организацию приёма, маркировки и регистрации биоматериала.

Задачи:

1. Изучение приёма биоматериала.

2. Подготовка его документации.

1. Теоретическая часть

В настоящее время лабораторным методам исследования отводится ключевая роль в диагностике и лечении заболеваний. При обследовании пациентов большое значение имеют организационные аспекты лабораторной диагностики, обеспечение точности и правильности лабораторных исследований, применение стабильных, технически надежных аналитических методов, проведение контроля качества исследований.

В учреждениях здравоохранения используется достаточно широкий арсенал лабораторных методов, причём наряду с унифицированными рутинными методиками применяются и современные методы исследования, обладающие высокой специфичностью и информативностью.

Внедрение в практику здравоохранения высокоспецифичных лабораторных методов диагностики заболеваний, требует стандартизации на всех этапах диагностического процесса.

Доля ошибок преаналитического этапа в общем числе лабораторных ошибок составляет от 50% до 95%. Ошибки, возникающие на преаналитическом этапе лабораторных исследований, обесценивают весь дальнейший ход лабораторных исследований, приводят к потере значительных средств, дискредитируют лабораторные методы в глазах лечащего врача из-за недостоверности получаемых результатов.

Для всех видов лабораторных исследований, преаналитический этап объединяет комплекс процессов перед собственно лабораторным анализом, который состоит из:

· тщательной подготовки обследуемых;

· получения биоматериала (крови, мочи и др.);

· транспорта биоматериала в лабораторию;

· первичная обработка биоматериала в лаборатории;

· распределение и хранение биоматериала в лаборатории.

Основная задача этих этапов преаналитического процесса -- обеспечение стабильности (сохранности) компонентов биоматериалов, взятых на исследование, и сведение к минимуму влияния различных факторов, изменяющих их качество.

В связи с этим, рассмотрен преаналитический этап.

1.1 Оформление направлений

При взятии материала следует правильно заполнить направление. Пробирки и сопровождающие их документы, этикетки не должны быть перепутаны. На пробирке указывается отделение и порядковый номер. На пробирке с кровью для определения групповой и резус-принадлежности - дополнительно фамилия пациента.

В направлении на анализ при взятии биоматериала необходимо указать: (все данные с учетом приказа МЗ РБ от 28.09.2007 № 787 по формам первичной медицинской документации)

· данные пациента - фамилию, имя, отчество, дату рождения, пол, адрес, номер истории болезни, диагноз.

· фамилию врача, направившего биоматериал на анализ;

· дату и время взятия биоматериала;

· дать краткую характеристику направляемого биоматериала (указать вид биоматериала), материал, не соответствующий заявленному, исследоваться не будет - например слюна вместо мокроты, сыворотка вместо плазмы;

· особенности взятия биоматериала (место взятия - для крови, для мочи - объем, порция, время сбора);

· все необходимые исследования, а не просто «биохимический анализ крови».

Направление на анализ подписывается врачом.

Избегать дублирования анализов.

1.2 Режимы выполнения лабораторных исследований

Вся кровь должна поступать только в центрифужных, химически чистых пробирках, взятых в лаборатории. Кровь для исследования в режиме неотложного анализа должна быть доставлена отдельно, не ставиться вместе с плановыми анализами на стол без предупреждения. Сотрудник отделения, доставивший срочный анализ, должен убедиться, что анализ принят сотрудником лаборатории.

Неотложные анализы выполняются в течение 2 часов, только для пациентов в тяжелом состоянии, при необходимости экстренного вмешательства. Для выполнения неотложного анализа выделяется отдельный лаборант и врач лабораторной диагностики. Выполнение исследований в режиме неотложного анализа требует большего расхода реактивов и рабочего времени специалистов, и как следствие больших финансовых затрат.

В настоящее время лаборатория неотложного анализа в неотложном режиме выполняет следующие исследования крови:

· Определение концентрации гемоглобина

· Подсчет гематокрита

· Подсчет количества эритроцитов

· Подсчет количества лейкоцитов

· Подсчет лейкоцитарной формулы

· Подсчет количества тромбоцитов

Дежурный анализ выполняется в течение рабочего дня - для вновь поступивших пациентов или при ухудшении состояния пациента, не требующего экстренного вмешательства.

Примечание: Нормальные значения лабораторных параметров касаются материала, набранного натощак. Поэтому интерпретация результатов неотложного и дежурного исследования не может заключаться в простом сравнении с нормальными величинами.

Плановые исследования - это все исследования, назначенные накануне, и материала для которых поступает в лабораторию с 7 до 9 часов утра. Время выполнения - до 6 часов, в отдельных случаях требуется более длительная аналитическая процедура.

Лабораторное обследование сотрудников осуществляется по направлению врача, отвечающего за диспансеризацию сотрудников. Во всех остальных случаях предусмотрено обследование на платной основе.

1.3 Условия хранения и транспортировки материала для клинических лабораторных исследований

С целью профилактики профессионального инфицирования, любую биологическую жидкость необходимо рассматривать как потенциально инфицированный материал, соблюдая все соответствующие правила обращения с ней при транспортировке, хранении и обработке. Биоматериалы от инфекционных пациентов должны иметь особую маркировку, обращаться с ними надо с особой осторожностью. Все биоматериалы от пациентов с ВИЧ-инфекцией должны помечаться на направлении «код 120» с обязательным указанием номера истории болезни.

Полученная биологическая жидкость должна быть доставлена в лабораторию как можно быстрее. При необходимости определения глюкозы и показателей кислотно-основного состояния кровь должна быть доставлена в лабораторию немедленно.

На всех этапах транспортировки и обработки кровь должна находиться в пробирках, закрытых крышками, для предотвращения испарения и загрязнения микробами и различными веществами извне.

Пробирки при доставке должны располагаться вертикально, кверху крышками, что способствует сохранности проб и ускорению образования сгустка при получении сыворотки, уменьшает встряхивание при транспортировке и опасность возникновения гемолиза.

Пробирки не следует заполнять до краев. Цельную кровь, полученную без антикоагулянтов, не следует помещать в холодильник до доставки в лабораторию во избежание гемолиза.

Центрифугирование производится не позднее, чем через 1 ч после взятия биоматериала.

1.4 Область применения

Настоящая стандартная операционная процедура (далее - СОП) определяет порядок приема, регистрации биоматериала, поступающего в лабораторию из процедурного кабинета (наименование учреждения) и других учреждений, обслуживаемых лабораторией, а также выявление несоответствий и их устранение.

Настоящая СОП предназначена для фельдшера-лаборанта и оператора лаборатории.

1.5 Организация процесса транспортировки биоматериала курьером и ответственность курьера

Температуру в холодильнике, которая указана на дисплее в салоне машины, курьер фиксирует в журнале «Журнал учета температурного режима в холодильниках машин », а также в данном журнале курьер указывает свое ФИО, регистрационный знак машины и время отправления машины за биоматериалом непосредственно перед поездкой в учреждения.

Курьер, прибыв в ЛПУ, идет в регистратуру данного учреждения, где забирает контейнеры с разным биоматериалом. На каждом контейнере указаны название учреждения и тип биоматериала (кровь, моча, кал, предметные стекла с мазками, соскобы). Курьер размещает контейнеры в горизонтальном положении в холодильник машины, как это показано на фотографии.

Курьер отвечает за целостность контейнеров, их сохранность, за обеспечение должного температурного режима в холодильнике машины (+4 - +8 о С), а также за сохранность биоматериала, доставляемого из учреждений в лабораторию. Во время пути курьер отслеживает температуру в холодильнике машины, которая выводится на дисплей, установленный в салоне машины.

1.6 Прием биоматериала в лаборатории

Температуру, которая указана на табло в холодильнике машины на момент изъятия контейнеров, курьер отмечает в журнале «Журнал учета температурного режима в холодильниках машин » в графе, соответствующей государственному номеру машины. А также в этом же журнале водитель указывает время прибытия машины с биоматериалом из учреждений.

Курьер передает промаркированные контейнеры с образцами крови, мазками и соскобами фельдшеру-лаборанту.

В кабинете фельдшер-лаборант открывает крышку контейнера и извлекает оттуда пробирки с кровью, предметные стекла с мазками и соскобами, папки с направлениями на исследования.

Сортирует пробирки с кровью отдельно по штативам, согласно типу пробирок (биохимических, гематологических и коагулологических) и названиям учреждений, которые указаны на штативах.

1.7 Передача биоматериала и направлений в соответствующие подразделения лаборатории

В кабинете фельдшер - лаборант ставит штативы с пробирками для биохимических, иммунологических, коагулологических исследований в контейнеры с маркировкой « для переноса биоматериала» и относит их центрифугирования.

Фельдшер - лаборант звонит в отделы гематологии и ПЦР для того, чтоб фельдшеры-лаборанты из соответствующих отделов забрали биоматериал.

Далее передает направления на исследования операторам регистрации.

1.8 Регистрация бланков-заказов операторами

Порядок регистрации:

- оператор считывает штрих-код сканером, наклеенный на бланк- направление;

- затем оператор вводит в ЛИС паспортные данные пациента: ФИО, дату рождения, адрес проживания и другие данные: источник заказа (ОМС, ДМС, наличный расчет, диспансеризация), номер учреждения, отделение, ФИО врача, назначившего исследования, диагноз, код МЭС (медико-экономический стандарт).

- после этого оператор вносит в ЛИС те показатели, которые назначил лечащий врач, и сохраняет сформированный заказ в ЛИС.

2. Практическая часть

Городская клиническая больница № 40 была открыта в 1966 году и в настоящее время представляет собой единственный в г. Нижнем Новгороде многопрофильный медицинский комплекс, включающий в себя: стационар, родильный дом, женскую консультацию, детскую и взрослую поликлинику. Является основной клинической базой кафедры хирургии, центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов, Нижегородской государственной медицинской академии, которая работает на базе больницы со дня ее открытия. Функциональная особенность больницы № 40 - прием пациентов практически с любой патологией в экстренных случаях в круглосуточном режиме. Машины «Скорой помощи» доставляют более 100 пациентов ежедневно.

В больнице и ее структурных подразделениях созданы все необходимые условия для оказания своевременной помощи больным и качественного их лечения. Здесь уверенно используются и совершенствуются традиционные методики, активно внедряются новейшие медицинские технологии. Повсеместно осваивается современное диагностическое оборудование. За последние два года в рамках программы модернизации здравоохранения больница получила 216 единиц медицинского оборудования, включая современное эндоскопическое, лабораторное, ультразвуковое диагностическое оборудование, что позволило выполнять более сложные вмешательства в гепатопанкреатологии, колопроктологии, флебологии.

Ведущие специалисты принимают активное участие в работе специализированных семинаров, конференций, симпозиумов российского и международного уровня. лабораторный клинический биоматериал

Городская больница № 40 - клиническая база широкого профиля, где современные научные разработки и методики применяются на практике. Здесь давно и плодотворно ведется совместная работа с кафедрой хирургии Центра повышения квалификации и профессиональной переподготовки специалистов Нижегородской государственной медицинской академии. Ее организатор, профессор Игорь Леонидович Ротков, стал основателем хирургической школы, которую прошли практически все хирурги больницы и сегодня продолжают развивать накопленный опыт, привнося новые разработки и методики. На базе больницы создан городской флебологический центр. В отделении детской хирургии в течение нескольких десятилетий работает научный отдел детской гастроэнтерологии как филиал Нижегородского института педиатрии. На базе родильного дома расположены кафедры акушерства и гинекологии усовершенствования врачей и обучения студентов НГМА. Здесь повышают квалификацию специалисты из многих регионов России. Совместная работа ученых-практиков и врачей больницы способствует росту их мастерства, а новаторство в самых разных областях медицины позволяет достигать уникальных результатов в лечении больных.

На результатах работы Городской клинической больницы № 40 было защищено 9 докторских и 29 кандидатских диссертаций. На способы операций, диагностики и полезные модели, разработанные специалистами больницы, получено более 70 авторских свидетельств и патентов.

Высокой оценкой деятельности коллектива врачей явилось присуждение премии города Нижнего Новгорода в области медицины в 2012 году. Работа посвящена одной из актуальнейших и сложнейших проблем хирургии - лечению флеботромбозов нижних конечностей, за последний пятилетний период наблюдения и оказания экстренной и плановой хирургической помощи больным с флеботромбозами в условиях городского флебологического центра на базе ГБУЗ НО «ГКБ № 40».

Родильный дом, входящий в структуру больницы, имеет 205 коек и является самым крупным в Нижегородской области. В настоящее время выполняет функцию областного перинатального центра, принимая 4500-5000 родов ежегодно. Вся проводимая врачами-акушерами-гинекологами работа направлена на уменьшение количества случаев невынашивания и перенашивания беременными, на достижение родоразрешения естественным путем и улучшение показателей выживаемости новорожденных.

С января 2010 года в стенах взрослой поликлиники успешно функционирует Центр здоровья, признанный одним из лучших на региональном уровне. Его опыт работы представлен заведующей Центром на Всероссийском форуме - «Здоровая нация - основа процветания России».

В 2012 году с целью повышения доступности оказания медицинской помощи на отдаленной территории в структуре взрослой поликлиники организован и успешно функционирует офис врача общей практики.

Более тысячи сотрудников учреждения, в том числе врачи, медицинские сестры, лаборанты, санитарки, технический персонал своим напряженным трудом, заботой и теплом создают атмосферу гуманизма и милосердия, которая свойственна коллективу ГБУЗ НО «ГКБ № 40».

Во время практики был освоен весь процесс приёма и регистрации биоматериала.

1. приём биоматериала и бланков.

2. Исследование биоматериала

3. Запись полученных результатов на бланк

4. Учет результат в журналах регистрации анализов

5. Утилизация биоматериала

Заключение

Основная форма контроля организации приёма, маркировки и регистрации биоматериала - периодические внешние и внутренние проверки. Но данную форму контроля нельзя признать эффективной. Проблема контроля этого этапа лабораторных исследований остается на сегодняшний день одной из серьезнейших проблем современной лабораторной медицины.

Наиболее эффективным и действенным представляется шаг в создании стандартных условий взятия, транспортировки и хранения биологических проб пациента (использование вакуумных или иных систем). Внедрение таких систем в практику оказывает влияние не все этапы лабораторного исследования и в целом переводит организацию работы лаборатории на иной уровень. Их использование не только облегчает организацию и значительно продвигает стандартизацию преаналитческого этапа, но и создает условия, необходимые для внедрения современных лабораторных систем. При наличии анализаторов они могут использоваться в качестве первичных пробирок, что значительно упрощает аналитический этап лабораторного исследования.

Размещено на Allbest.ru

...

Подобные документы

Главные задачи микробиологических исследований клинической лабораторной диагностики. Оснащение бактериологической лаборатории, высокопроизводительная автоматизированная техника идентификации микроорганизмов, стандартизация микробиологической диагностики.

реферат , добавлен 09.10.2010


Пути передачи сифилиса - венерического инфекционного заболевания с поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, нервной системы с последовательной сменой стадий болезни. Уязвимости зуботехнической лаборатории перед инфекцией.

презентация , добавлен 27.04.2016


Характериcтика деятельноcти клинико-диагноcтичеcкой лаборатории в cовременных уcловиях, оценка деятельноcти перcонала и технологии повышения ее эффективноcти. Описание работы cecтринcкого перcонала в лаборатории, разработка рекомендаций по оптимизации.

курсовая работа , добавлен 28.06.2016


Российские нормативные документы, регламентирующие производство лекарственных средств. Структура, функции и основные задачи испытательной лаборатории по контролю качества лекарственных средств. Законодательные акты РФ об обеспечении единства измерений.

методичка , добавлен 14.05.2013


Ознакомление с материалами, применяемыми для изготовления современных зубных протезов. Изучение схемы автоматизированной организации работы, позволяющей изготовить протезы по технологии CAD\CAM. Преимущества автоматизации зуботехнической лаборатории.

презентация , добавлен 11.10.2015


Основной элемент зуботехнической лаборатории – рабочий стол зубного техника. Конструкция данного стола, его оборудование и освещение. Параметры применяемой в кабинете аппаратуры. Важнейшие критерии, от которых зависит работоспособность литейной машины.

презентация , добавлен 14.03.2016


Правовая основа для проведения клинических исследований принципиально новых и ранее не применявшихся лекарственных препаратов. Этические и правовые принципы клинических исследований, сформулированные в Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации врачей.

презентация , добавлен 25.03.2013


Этапы работы микробиологической лаборатории и затраты времени на каждый из них. Нормативная документация. Общие требования к сбору и доставке проб биологического материала для микробиологического исследования. Интерпретация результатов анализов.

презентация , добавлен 26.04.2016


Общие положения Приказа Министра здравоохранения Республики Казахстан "Об утверждении Инструкции по проведению клинических исследований и (или) испытаний фармакологических и лекарственных средств". Принципы этической оценки клинических исследований.

презентация , добавлен 22.12.2014


Знакомство с основными признаками проявления шизофрении. Анализ психического, соматического и неврологического статуса больного. Рассмотрение клинических методов исследования душевного заболевания. Общая характеристика лабораторных исследований.

Чаще всего на ПЦР отправляют соскобы со слизистой половых путей, и этот анализ является самым точным из всех имеющихся на сегодняшний день средств диагностики ЗППП. Редко приходится делать ПЦР крови, мочи, слюны и других биологических жидкостей.

Техника исполнения анализа

Под действием определенных реактивов ДНК бактерий в материале, отправленном на анализ, увеличивается во много раз и становится различимой и идентифицируемой для приборов.

Значение результатов анализа

ПЦР всегда качественный анализ, то есть ответом может быть только “обнаружено” или “не обнаружено”. Расшифруем, что кроется за этими значениями. “Обнаружено”, или “положительно”, или просто “+” – из исследуемого материла выделена ДНК соответствующей бактерии, и с вероятностью 97% можно сказать, что человек заражен этой инфекцией. “Не обнаружено”, “отрицательно”, “-” – из исследуемого материала ДНК соответствующей бактерии не выделено, с вероятностью 97% можно утверждать, что большого количества этих бактерий в организме пациента нет, с вероятностью 60% – что пациент не заражен этой инфекцией.

Для того, чтобы бактерия попала в пробирку с материалом, отправляемым на анализ, необходимо, чтобы она содержалась в организме человека в определенном количестве. Если количество бактерий в организме человека минимально, они почти наверняка в пробирку не попадут, и результат анализа придет отрицательный. Однако человек при этом все равно инфицирован и болен. Поэтому для максимального увеличения точности результата перед проведением ПЦР-диагностики требуется специальная подготовка.

ВЫСОКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ И СПЕЦИФИЧНОСТЬ

ПЦР – метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций “золотым стандартом”, проверен временем и тщательно апробирован клинически.

Необычайная чувствительность метода позволяет нашим специалистам гарантированно обнаруживать единичные возбудители в биологическом материале на основе их генетической информации. Аналитическая чувствительность АмплиСенс ПЦР-тест-систем для большинства вирусов и бактерий – воспроизводимое выявление 100 микроорганизмов в исследуемой биологической пробе (1000 МИКРООРГАНИЗМОВ В 1 МЛ)

Специфичность ПЦР при использовании технологии АмплиСенс даже для всех вирусных, хламидийных, микоплазменных, уреаплазменных и большинства других бактериальных инфекций достигает 100%.

Забор биологического материала для лабораторных исследований методом ПЦР

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9. Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя), пробирка закрывается пробкой и переворачивается несколько раз (для перемешивания с антикоагулянтом). Пробирка с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Максимальный срок хранения:

При исследовании на вирусные гепатиты – 2 суток

При исследовании на другие инфекции – 5 часов

Для анализа отбирается первая порция утренней мочи в количестве 10 мл в специальный флакон или пробирку без консервирующего раствора.

Максимальный срок хранения отобранного материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С.

Перед забором слюна производится трехкратное полоскание полости рта физиологическим раствором. Забор слюны производится в одноразовые пробирки в количестве 3-5 мл.

Материал необходимо отбирать непосредственно перед исследованием или немедленно доставлять в лабораторию. При невозможности быстрой доставки материал замораживают при –20 °С. Последующая транспортировка осуществляется в замороженном состоянии (в термосе со льдом).

Мазок из ротоглотки

Забор материала производится рабочей частью стерильного одноразового аппликатора с задней стенки глотки и крипт миндалин. После забора материала аппикатор помещают в стерильную одноразовую пробирку.

Мокрота и плевральный выпот

Материал отбирают в специальные флаконы в количестве 5-10 мл.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Биопсийный материал

Биопсийный материал помещают сухую одноразовую пробирку типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Синовиальная жидкость

Забор материала производится одноразовым шприцом в количестве 1 мл. Отобранный материал помещают в сухую одноразовую пробирку типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор материала для анализа на урогенитальные инфекции

Забор материала у женщин:

Соскоб производится из трех различных точек:

цервикальный канал

задний свод влагалища

При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв (исследование на HSV-II, Haemophilus ducrei).

Забор производится универсальным зондом или ложкой Фолькмана. Если соскоб взят универсальным зондом, рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку типа “Эппендорф” с консервирующим раствором. Если забор производится ложкой Фолькмана, рабочая часть инструмента споласкивается в консервирующем растворе, содержащемся в одноразовой пробирке типа “Эппендорф”.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор материала у мужчин:

Соскоб (мазок).

Забор материала производится универсальным зондом из уретры. При необходимости материал для исследования берется из генитальных язв (исследование на HSV-II, Haemophilus ducrei).

Рабочая часть зонда, содержащая исследуемый материал, отрезается или обламывается и помещается в одноразовую пробирку типа “Эппендорф” с консервирующим раствором.

Максимальный срок хранения материала 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Сок предстательной железы:

После окончания массажа предстательной железы сок в количестве 0,5-1 мл собирают в одноразовую сухую пробирку типа “Эппендорф”. При невозможности получить сок, сразу после массажа собирают первую порцию мочи (в которой содержится сок предстательной железы) в количестве 10 мл (правила забора мочи смотрите выше).

Максимальный срок хранения 1 сутки в холодильнике при температуре +4°С – +8°С.

Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований методом ИФА (инфекции)

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА или без). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую “сухую” пробирку или в пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9).

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С – +8°С – 48 часов

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре -20°С – длительное хранение.

Забор и хранение биологического материала (кровь) для исследований на сифилис (Syphilis RPR, Syphilis TPHA, Syphilis TPHA (полуколичественный анализ), определения в сыворотке концетрации гормонов, онкомаркёров, аутоантител методом ИФА и для биохимических исследований

Забор крови производится:

Утром натощак (при динамическом наблюдении – всегда в одни и те же часы);

Только в “сухую” пробирку или специальную коммерческую вакуумную систему без антикоагулянта.

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в сухую пробирку объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (без антикоагулянта). Забор шприцом нежелателен в связи с опасностью возникновения гемолиза.

Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре +4°С – +8°С – 48 часов.

Максимальный срок хранения сыворотки при температуре -20 °С – длительное хранение.

Допускается только однократная разморозка сыворотки.

Забор крови для определения субпопуляций и функциональной активности лимфоцитов и нейтрофилов

Забор крови производится:

Утром натощак (5 мл крови).

Для предотвращения свёртывания в кровь при взятии добавляют антикоагулянт: 20 единиц гепарина на 1 мл крови. Лучше использовать стандартные пробирки с гепарином (ВАКУТАЙНЕР на-гепарин или ли-гепарин на 5-7 мл с зелёными крышками фирмы Becton Dickinson).

Перед взятием крови равномерно распределить гепарин по стенкам пробирки.

При взятии шприцем, во избежании гемолиза, кровь в пробирку спускать плавно, без напора.

После взятия пробирку с образцом несколько раз перевернуть. Не встряхивать и не крутить на шейкере.

Кровь должна храниться не более 48 часов при комнатной температуре

При перевозке температура крови должна быть +18 °С – +24 °С

Для определения иммуноглобулинов и ЦИК в сыворотке крови,

забор крови производится только в сухую пробирку!!!

Условия забора и перевозки те же.

Забор и хранение биологического материала (кровь) для определения группы крови по системе AB0 и Резус-фактора

Забор крови производится натощак из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1 мм) в одноразовый шприц объемом 5 мл или специальную вакуумную систему типа “Venoject” (с ЭДТА). При заборе в шприц кровь из него аккуратно (без образования пены) переносится в одноразовую пробирку с антикоагулянтом (6% раствор ЭДТА в соотношении 1:19 или 3,8% раствор цитрата Na в соотношении 1:9).

Кровь должна быть доставлена в лабораторию в день забора. Пробирку с кровью до исследования хранят в холодильнике при +4°С – +8°С.

Забор и хранение биологического материала (моча) для определения суточной экскреции 17-КС

Утренняя моча сбрасывается, следующие порции мочи, включая утреннюю порцию следующего дня, собираются в отдельную посуду. Объём собранной мочи перемешивается, измеряется(!). В баночку отливается 50 мл мочи.

Доставка образца с указанием диуреза – в те же сутки.

При более длительном хранении (более суток) требуется заморозка.

Забор исследуемого материала для бактериологических исследований

ОТДЕЛЯЕМОЕ УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА.

Правила подготовки больного к исследованию и забора материала:

Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания. Рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений перед взятием материала.

Женщины в день явки на обследование не должны спринцеваться и проводить туалет наружных половых органов.

Исследуемый материал берут специальными одноразовыми зондами, ложкой Фолькмана, бактериологической петлей либо ушным зондом с затупленным концом.

За 5-7 дней до забора материала необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные процедуры.

Исследуемый материал должен быть без примесей крови.

При вялотекущих и хронических инфекциях урогенитального тракта рекомендуется применять один из следующих методов провокации:

биологическая: введение гоновакцины (500 млн. микробных тел) взрослым однократно, внутримышечно, детям старше 3-х лет- 100-200 млн. микробных тел. Детям до 3 лет не рекомендуется введение гоновакцины;

термическая: применение в течение 3-х дней диатермии с абдоминально-вагинально-сакральным расположением электродов по 30,40,50 мин или индуктотермии по 10,15,20 мин. Следует производить забор отделяемого из уретры, цервикального канала и прямой кишки через один час после каждого прогревания;

механическая: наложение металлического колпачка на шейку матки женщин на 4 часа, проведение массажа уретры мужчин на буже в течение 10 мин;

алиментарная: употребление соленой, острой пищи и алкоголя за 24 часа до исследования.

Не следует проводить химические провокации, так как они губительно действуют на некоторых возбудителей.

Забор материала производят после провокации и через 24-48-72 ч.

Взятие материала проводит врач акушер-гинеколог при подозрении на инфекционную природу патологического процесса.

Содержимое цервикального канала, полости и придатков матки в норме стерильно.

УРЕТРА

Перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.

При наличии гнойных выделений соскоб надо брать либо сразу, либо через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений следует провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала.

У женщин перед введением зонда в уретру необходимо провести ее массаж о лобковое сочленение.

В уретру женщин зонд ввести на глубину 1-1,5см, мужчин – на 3-4см и сделать несколько вращательных движений. У детей материал берут только с наружного отверстия уретры.

ВУЛЬВА, ПРЕДДВЕРИЕ ВЛАГАЛИЩА. Отделяемое берут стерильным ватным тампоном. При воспалении бартолиниевых желез производят их пункцию, при вскрытии абсцесса железы содержимое берут стерильным ватным тампоном.

ВЛАГАЛИЩЕ. Материал для исследования берут стерильным тампоном из заднего свода или с патологически измененных участков слизистой. Материал для посева должен быть взят до проведения мануального исследования.

ЦЕРВИКАЛЬНЫЙ КАНАЛ.

Перед взятием материала необходимо удаление ватным тампоном слизи и обработка шейки матки стерильным физиологическим раствором

Необходимо пользоваться кольпоскопом.

Зонд ввести в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см.

При наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать с границы здоровой и измененной ткани.

При извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.

Для посева может быть использован соскоб слизистой, полученный при диагностическом выскабливании стенок цервикального канала.

МАТКА Материал берется с помощью специальных инструментов типа шприца-аспиратора, имеющего на зонде покрытие.

ПРИДАТКИ МАТКИ

При воспалительном процессе в придатках матки материал из очага инфекции (гной, экссудат, кусочки органов) берется либо при оперативном вмешательстве, либо при проведении диагностической пункции в малом тазу, проводимой через влагалищные своды.

Взятый для исследования материал в транспортной среде может сохраняться до 24 часов при +4° С. Не допускается замораживание пробы.

МОЧА

Микробиологическое исследование мочи нужно проводить до начала антибактериальной терапии. Моча здорового человека стерильна.

Утром после тщательного туалета наружных половых органов в стерильную посуду собирают среднюю порцию свободно выпущенной мочи в количестве 3-5 мл. При подозрении на простатит получают 4 пробы: 3 порции мочи (первая и средняя порции при самопроизвольном мочеиспускании и последнюю через 5-10 минут после массажа предстательной железы) и секрет предстательной железы при массаже.

Взятие мочи с помощью катетера связано с риском инфицирования мочевыводящих путей, поэтому его желательно избегать. Катетеризацию производят в случаях, когда больной не способен мочиться или для разграничения воспалительного процесса в почках и мочевом пузыре. С этой целью мочевой пузырь опорожняют и вводят в него 50мл раствора, содержащего 40 мг неомицина и 20 мг полимиксина. Через 10 минут берут пробы мочи для исследования. При локализации процесса в мочевом пузыре моча остается стерильной. При инфицировании почек отмечается бактериурия.

Мочу больного можно получить путем надлобковой пункции мочевого пузыря. Этот метод взятия мочи дает наиболее достоверные результаты.

Микробиологическое исследование мочи надо проводить как можно быстрее после ее получения от больного, т.к. микробы, содержащие в моче, быстро размножаются при комнатной температуре, что может дать ложные результаты при определении степени бактериальной обсемененности. В связи с этим при исследовании мочи на степень бактериурии, от момента взятия пробы мочи до начала исследования в лаборатории должно проходить не более 1-2 часов.

При исследовании мочи на наличие возбудителей урогенитальных инфекций проба может сохраняться до 18 часов при +4° С.

При транспортировке проб мочи необходимо учитывать температуру внешней среды.

КИШЕЧНЫЙ ДИСБАКТЕРИОЗ

Материал (испражнение) на кишечный дисбактериоз забирается до начала лечения антибактериальными и химиотерапевтическими препаратами.

Отбор клинического материала осуществляет медицинский персонал с соблюдением правил противоэпидемического режима, только стерильными одноразовыми инструментариями (шприцы, соответствующие зонды, цитощеточки и пр.), в одноразовых перчатках.

Максимально полно собрать материал из выбранного локуса, используя подходящие для этого аппликаторы – зонды, цитощетки (обеспечить адекватность клинического образца).

Сохранить полученный материал (ДНК/РНК микроорганизмов), используя надежные транспортные среды и консерванты, предоставляемые ПЦР-лабораторией. Среда для транспортировки и хранения клинического материала обеспечивает стабильность РНК и ДНК при комнатной температуре до 28 дней.

Поместить взятый материал в вакуэты с ЭДТА (кровь), в одноразовые химически чистые пробирки «Эппендорф» (мазки, ликвор, биоптат и др.). Основным условием при сборе материала является предотвращение попадания в пробу ДНК-аз и рибонуклеаз, т.к. рибонуклеазы и ДНК-азы – ферменты деградации РНК и ДНК. Они чрезвычайно стабильны в окружающей среде, выдерживают длительное кипячение. Основной источник нуклеаз – кожные покровы, частицы пыли. Пластиковые пробирки и наконечники должны иметь маркировку «DNase, RNase- free» (свободные от нуклеаз).

Сразу после забора плотно закрывать пробирки, флаконы с клиническим материалом, не касаясь их внутренней поверхности и внутренней поверхности крышек.

При работе с клиническим материалом, открывая пробирки, флаконы, не производить резких движений и не допускать разбрызгивания и расплескивания, что может привести к контаминации проб и рабочих поверхностей.

Для исключения взаимной контаминации образцы хранить и транспортировать в отдельном полиэтиленовом пакете или штативах. При необходимости переноса образца использовать автоматические микропипетки со сменными одноразовыми наконечниками с аэрозольными барьерами.

До транспортировки в ПЦР-лабораторию отобранный биоматериал хранить при температуре 2–4 °С не более 48 часов. Необходимо минимизировать время от забора образца до постановки ПЦР-анализа. Транспортировка образцов осуществляется в сумках-холодильниках, термоконтейнерах, термосах с термопакетами, льдом или сухим льдом.

Кровь, плазма, сыворотка

Забор крови рекомендуется проводить с использованием вакуумных систем. Внедрение таких систем позволяет стандартизировать манипуляции с кровью, положительно сказывается на всех этапах лабораторного исследования и в целом переводит работу лаборатории на иной, более высокий уровень качества. Их использование гарантирует защиту персонала от инфицирования, сокращается время, затрачиваемое на процедуру забора крови, значительно реже сопровождается гемолизом, позволяет сохранить стерильность проб крови и герметично транспортировать.

Венепункцию рекомендуется выполнять натощак из локтевой вены в специальную вакуумную пробирку с антикоагулянтом, после чего пробирка переворачивается для перемешивания несколько раз. Пробирки с кровью хранят в холодильнике при +4 °С – +8 °С. Максимальный срок хранения крови – 1 сутки (не замораживать!). В случае необходимости длительного хранения необходимо отобрать 1 мл сыворотки или плазмы крови и хранить ее при температуре -16 о -20 о С не более 2 недель.

Характеристика вакуумных систем, используемых для ПЦР-диагностики:

Вакуэты с ЭДТА (6 %) – используются для проведения качественных и количественных исследований. ЭДТА-антикоагулянт хорошо фиксирует нуклеиновые кислоты клетки.

Вакуэты с цитратом натрия (3,8 %) – используются для проведения качественных и количественных исследований. Не подходят для длительной транспортировки, т.к. цитрат является хорошей питательной средой для посторонней микрофлоры.

Вакуэты без антикоагулянтов (сыворотка крови) – используются для проведения качественных исследований. Использования сыворотки крови для количественных исследований нежелательно, т.к. часть инфекционного агента оседает в сгустке крови, при этом снижается возможность определения количественного содержания его в крови.

Вакуэты с гепарином - категорически не подходят для ПЦР - реакции. Гепарин является полианионом, как и ДНК, поэтому в ПЦР-реакции конкурирует с ДНК.

Оптимальное время исследования крови – в интервале от 1 до 4 часов после взятия.В промежутке от 5 до 30 минут происходит временная адаптации тромбоцитов к антикоагулянту и их агрегация, что может привести к их ложному снижению в пробе крови.

Нежелательно исследовать кровь позднее 8 часов после взятия, т.к. изменяются некоторые характеристики клеток: снижается объем лейкоцитов, повышается объем эритроцитов, что в конечном итоге приводит к ошибочным результатам измерения и неправильной интерпретации результатов. Только концентрация гемоглобина и количество тромбоцитов остаются стабильными в течение суток хранения крови.

Кровь нельзя замораживать. Капиллярную кровь с К 2 ЭДТА следует хранить при комнатной температуре и анализировать в течение 4 часов после взятия.

Для обеспечения качественного результата исследований нужно четко контролировать время и условия хранения проб до выполнения анализа.

При необходимости проведения отсроченного анализа (транспортировка на отдаленные расстояния, техническая неполадка прибора и т. д.), пробы крови хранят в холодильнике (4 о – 8 о С) и исследуют в течение 24 часов. Однако при этом следует учитывать, что происходит набухание клеток и изменение параметров, связанных с их объемом. У практически здоровых людей эти изменения не носят критического характера и не сказываются на количественных параметрах, но при наличии патологических клеток, последние могут изменяться или даже разрушаться в течение нескольких часов с момента взятия крови.

Непосредственно перед исследованием кровь должна быть тщательно перемешана в течение нескольких минут для разведения антикоагулянта и равномерного распределения форменных элементов в плазме. Длительное постоянное перемешивание образцов до момента их исследований не рекомендуется вследствие возможного травмирования и распада патологических клеток.

Исследование крови на автоматическом анализаторе проводится при комнатной температуре. Кровь, хранившуюся в холодильнике, необходимо вначале согреть до комнатной температуры, так как при низкой температуре увеличивается вязкость крови, и форменные элементы имеют тенденцию к склеиванию, что в свою очередь, приводит к нарушению перемешивания и неполному лизису. Исследование холодной крови может быть причиной появления «сигналов тревоги» вследствие компрессии лейкоцитарной гистограммы.

При выполнении гематологических исследований на значительном удалении от места взятия крови неизбежно возникают проблемы, связанные с неблагоприятными условиями транспортировки. Воздействие механических факторов (тряска, вибрация, перемешивание и т.д.), температурного режима, вероятность пролива и загрязнения проб могут оказывать влияние на качество анализов. Для устранения этих причин при перевозках пробирок с кровью рекомендуется использовать герметично закрытые пластиковые пробирки и специальные транспортные изотермические контейнеры. Во время транспортировки не допускается контакт образца (с нативным материалом) и бланка-направления, в соответствии с правилами биологической безопасности.

^ 4.3. Прием и регистрация биологического материала

Пробирки с образцами венозной крови доставляют в лабораторию в день взятия в в штативах в специальных сумках-саквояжах для доставки биологического материала, в которых пробирки должны находиться в вертикальном положении, а при транспортировке на удаленное расстояние - в специальных контейнерах.

Сотрудник лаборатории, принимающий материал, должен проверить:

Правильность оформления направления: в бланке–направлении указываются данные обследуемого (фамилия, имя и отчество, возраст, № истории болезни или амбулаторной карты, отделение, диагноз, проведенная терапия);

Маркировку пробирок с образцами крови (на них должны быть нанесены код или фамилия больного, идентичные коду и фамилии в бланке направления материала для исследования). Лаборант должензарегистрировать доставленный материал, отметить количество пробирок.

^ 4.4 Подсчет клеточного состава крови на гематологическом анализаторе

Подсчет клеточного состава крови на гематологическом анализаторе должен проводиться в строгом соответствии с инструкцией к прибору.

При работе на гематологическом анализаторе следует:

Использовать кровь, стабилизированную К- 2 ЭДТА в рекомендованной пропорции для конкретной соли и одноразовые пробирки для гематологических исследований (простых или вакуумных);

Перед анализом осторожно, но тщательно перемешать пробирку с кровью (рекомендуется для этой цели использовать устройство для перемешивания образцов крови - ротомикс);

Использовать реактивы, зарегистрированные в установленном порядке; при смене реактивов на продукцию другого производителя следует проверить и установить калибровку прибора;

Запускать прибор, соблюдая все стадии промывки, добиваясь нулевых (фоновых) значений показателей по всем каналам;

Обращать внимание на сообщения прибора о вероятных систематических ошибках: помнить, что увеличение МСНС выше нормальных значений, как правило, результат ошибки измерения;

При выявлении ошибки обязательно устранить причину, не работать на неисправном приборе;

Выполнять процедуру контроля качества по соответствующей программе. с оценкой полученного результата;

Работать осмысленно, сопоставляя получаемые результаты с клинической характеристикой проб больного;

После окончания измерений тщательно промыть анализатор;

При остановке прибора на длительный срок обязательно выполнить все процедуры консервации (по возможности совместно с сервис-инженером);

При возникновении технических проблем следует воспользоваться помощью сервис-инженера фирмы, имеющей лицензию на техническое обслуживание; не доверять работу необученному персоналу.

Приступая к работе на гематологическом анализаторе, следует учесть границы линейности измерения анализируемых параметров. Оценка проб со значениями анализируемых параметров, превышающих границу линейности измерения, может привести к ошибочным результатам. В большинстве случаев при анализе проб с гиперцитозами анализатор вместо значения измеряемого параметра выдает значок "D" (dilute), что указывает на необходимость разведения пробы и повторного измерения. Разведение необходимо проводить до тех пор, пока не будут получены схожие итоговые результаты при двух ближайших разведениях.

^ П р и м е р ─ Анализ пробы больного с гиперлейкоцитозом на трех различных гематологических анализаторах представлен в таблице.

Таблица 3

¦Результаты подсчета количества при гиперлейкоцитозе, выполненные на трех различных гематологических анализаторах

^ Гематологические анализаторы	Степень разведения пробы				Итоговое значение
	^ Цельная кровь	1:1	1:3	1:4	WBC
1	D	274,5	274,5	143,1	715,5
2	322,6	253,2	177,7	141,8	709,0
3	D	D	168,3	139,1	695,5

Из таблицы видно, что при анализе цельной крови только один анализатор (2-й) дал цифровое значение количества лейкоцитов, два других указали на необходимость разведения пробы. Последующее поэтапное измерение пробы в трех разведениях позволило добиться близких конечных результатов на всех приборах только при разведении 1:3 и 1:4. Таким образом, итоговое количество лейкоцитов составило 700,0 - 710,0 x 10 9 /л, что более чем в 2 раза превышает первоначальное значение, полученное в цельной крови на 2-м анализаторе и в 1,5 - при разведении 1:1 на 1-м и 2-м анализаторах.

1. 
   ^ Калибровка гематологических анализаторов

Под калибровкой понимается процедура настройки анализатора, в результате

Которой достигается равенство нулю систематической составляющей погрешности (нулевое смещение) или подтверждается, что смещение равно нулю с учетом погрешности калибровки. Калибровка гематологических анализаторов может быть выполнена двумя основными способами:

По цельной крови;

По образцам стабилизированной крови с аттестованными значениями.

^ 5.1 Калибровка по цельной крови

Калибровка по цельной крови может быть выполнена путем сравнения с референтным анализатором, калибровка которого верифицирована и может быть принята за исходную.

Для калибровки путем сравнения с референтным анализатором используется 20 образцов венозной крови пациентов, выбранных произвольно из дневной программы исследований лаборатории, располагающей референтным анализатором. Кровь должна быть взята в вакуумные пробирки с антикоагулянтом К 2 ЭДТА. После анализа на референтном анализаторе пробирки с кровью доставляются лабораторию для анализа на калибруемом приборе. Время между измерениями на референтном и калибруемом анализаторе не должно превышать 4 часа. Анализ калибровочных проб на калибруемом приборе должен выполняться таким же способом, как и анализ проб пациентов. Полученные результаты заносятся в таблицу по форме, приведенной в Приложении 1. Данные результаты используются для определения соответствующих калибровочных факторов, которые численно равны коэффициентам наклона калибровочных прямых, проходящих на графике через начало координат.

Калибровочные факторы рассчитываются на компьютере с использованием программы EXCEL, входящей в состав пакета Microsoft OFFICE любой версии. Для расчета калибровочных факторов в данной программе строится точечная диаграмма, где по оси Х откладываются измеренные значения, по оси Y – референтные, задается линия регрессии через начало координат. Программа рисует калибровочную прямую и определяет ее наклон, который и является искомым калибровочным фактором. При выявлении грубых ошибок – точек значительно отстоящих на графике от калибровочной прямой, их необходимо удалить из расчета (стереть всю строку в таблице EXCEL). Полученный калибровочный фактор заносится в таблицу Приложения 1 и используется для ручной корректировки калибровки прибора в соответствие с его инструкцией по эксплуатации.

1. 
   ^ Калибровка по образцам стабилизированной крови с аттестованными значениями

Данный способ калибровки базируется на коммерческих калибровочных и контрольных материалах, представляющих собой искусственную смесь стабилизированных человеческих эритроцитов и фиксированных клеток человека или животных, имитирующих лейкоциты и тромбоциты. Ввиду существенного отличия биологических свойств компонентов данных материалов от натуральной крови аттестованные значения гематологических параметров зависят от конкретного типа анализатора.

Во всех случаях, когда возможно, следует использовать калибраторы, специально предназначенные изготовителем для калибровки конкретного типа анализатора. Погрешности установленных значений в современных гематологических калибраторах в основном соответствуют медицинским требованиям. Однако не для всех типов анализаторов такие калибраторы имеются. Кроме того, ввиду ограниченного срока сохранности (как правило, не более 45 дней) не всегда имеется возможность получать непросроченные образцы.

Контрольные материалы не предназначены изготовителем для целей калибровки: допуски для значений значительно шире, методы аттестации и производственного контроля не такие строгие как для калибраторов. При проведении калибровки, контрольные материалы могут быть использованы лишь как один из источников информации о метрологических свойствах прибора.

Следует, однако, иметь ввиду, что при использовании для целей калибровки как контрольных материалов, так и калибраторов, особенности пробоподготовки и эксплуатации анализаторов оказывают существенное влияние на составляющие систематической погрешности. Данные влияющие факторы не могут быть учтены при калибровке коммерческими материалами. Вследствие этого, во всех случаях, проведенная калибровка должна быть верифицирована путем анализа статистики получаемых результатов в пробах пациентов (эритроцитарные индексы, интервалы нормальных значений).

5.2.1 Периодичность калибровки гематологических анализаторов

Требования к периодичности калибровки обычно содержатся в инструкции по эксплуатации анализатора. Как правило, калибровка требуется после ремонта или в случае выявления значимого дрейфа в процедурах внутрилабораторного контроля качества.

5.2.2 Процедура калибровки

Процедура калибровки выполняется в соответствии с инструкцией по эксплуатации анализатора.

5.2.3 Контроль результата калибровки

Данный контроль заключается в анализе калибровочного образца сразу после выполнения калибровки. Выполненная калибровка принимается, если результаты анализа соответствуют калибровочным значениям с учетом аналитической вариации анализатора.

5.2.4 Верификация калибровки с помощью эритроцитарных индексов

В этом способе проверки и уточнения калибровки используется тот факт, что средние значения эритроцитарных индексов – МСНС, МСН и MCV по пациентам имеют довольно малую вариацию и поэтому могут эффективно использоваться для контроля калибровки и дальнейшего контроля качества. Рекомендуемое число проб для усреднения равняется 20. Для определения среднего значения МСНС могут быть использованы любые пробы пациентов, в то время, как для определения средних МСН и MCV следует исключать пациентов с анемиями.

Многие современные гематологические анализаторы имеют встроенные программы расчета текущих средних, что значительно облегчает обработку данных.

Целевые значения эритроцитарных индексов при усреднении по 20 пробам пациентов в возрасте от 18 до 60 лет независимо от пола приведены в таблице 4.

Таблица 4

Целевые значения эритроцитарных индексов

Если полученные средние значения вышли за контрольный допуск, то это означает, что калибровка MCV или Hgb или RBC нуждается в корректировки.

При выяснении причин неудовлетворительной калибровки по результатам исследования эритроцитарных параметров при использовании коммерческих калибровочных/контрольных материалов следует принимать во внимание следующую оценку надежности аттестованных значений материалов:

Наиболее точным и стабильным во времени параметром является концентрация эритроцитов;

Стабильным параметром является Hgb, но он может зависеть от применяемых реактивов (например, циановые или бесциановые);

Самым нестабильным параметром является MCV. Значение MCV имеет тенденцию к изменению в течение всего срока годности материала в довольно широком интервале значений. При уточнении калибровки по MCV данные, полученные из анализа средних по эритроцитарным индексам, имеют приоритет над аттестованными значениями в образцах стабилизированной крови.

Считая калибровку по RBC правильной, в таблице 5 указаны возможные причины выхода средних значений индексов за контрольный допуск.

Таблица 5

Причины выхода за пределы средних значений эритроцитарных индексов

Эритро-цитарные индексы	Среднее значение индекса	Среднее значение индекса	Среднее значение индекса	Среднее значение индекса
MCHC	Ниже границы	Выше границы	Выше границы	Ниже границы
MCH	В границах допуска	В границах допуска	Выше границы	Ниже границы
MCV	Выше границы	Ниже границы	В границах допуска	В границах допуска
Причина	Завышен MCV	Занижен MCV	Завышен Hgb	Занижен Hgb