Диагностика нарушения гемостаза. Нарушения функциональных свойств тромбоцитов. Нарушения адгезии тромбоцитов

Признаки беременности после имплантации эмбриона

Международная номенклатура факторов свертывания крови

Название фактора

Количество в мл (активность)

Достаточный минимум

Период полужизни

I. Фибриноген

300 (170-450) мг

II. Протромбин*

Например, в гемостазе имеется огромное количество преданалитических переменных. Они часто находятся вне контроля испытательной лаборатории и не всегда легко идентифицируются. Как подробно описано ниже, они включают проблемы, которые возникают до тестирования, и включают в себя особенности, связанные с сбором, а также транспорт и неправильную обработку выборки. Преданалитические проблемы могут привести к серьезным негативным последствиям для теста и, следовательно, последующему уходу за пациентами.

Включение мер качества направлено на выявление и устранение проблем, связанных со всеми этими аспектами тестирования, для обеспечения результатов высокого качества тестирования. Лабораторные данные должны быть точными и надежными, поскольку ошибочные результаты могут привести к неправильному диагнозу пациента и, следовательно, к терапевтическим злоключениям. Неточность лабораторной отчетности может возникнуть из-за проблем, возникающих в любой момент процесса тестирования, от сбора проб до отчета.

200мкг/70-130%

III. Тромбопластин

IV. Ионы Са++

2,3 - 2,8 ммоль/л

V. АС-глобулин

25мкг/80-110%

2,5-4мкг/10-15%

Из-за значительных успехов в инструментах и ​​информатике аналитические и отчетные этапы тестирования не вносят существенного вклада в лабораторную ошибку. Скорее, предварительная аналитическая фаза тестирования представляет собой основной источник неточных результатов лабораторных исследований.

Предварительно аналитические этапы тестирования включают сбор образцов, транспортировку образцов цельной крови в лабораторию, обработку и хранение образцов. Одним из наиболее важных аспектов сбора образцов является правильный пациент, а также идентификация образцов. Образцы следует собирать относительно атравматично, и кровь должна свободно течь в контейнер для образцов. Образцы для тестирования гемостаза должны быть антикоагулированы цитратом натрия. Важно, чтобы концентрация цитрата натрия была совместима в лабораторной системе, поскольку время свертывания, как правило, больше в 8% по сравнению с 2% цитратом натрия.

VII. Проконвертин

2 мкг/70-130%

VIII. Антигемофильный глобулин

50мкг/80-120%

5-7мкг/10-15%

IX. Кристмас-фактор

3-4 мкг/70-130%

4-6мкг/20-30%

X. Стюарта-Прауэра фактор*

Образцы для тестирования гемостаза, которые содержат видимые сгустки, не должны анализироваться и должны быть отклонены. Другие антикоагулянты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота или гепарин, неприемлемы для тестирования гемостаза. Когда матрица образца неизвестна или сомневается, можно провести анализ анализов натрия, калия и кальция на образце, чтобы помочь определить матрицу образца.

Образцы для тестирования гемостаза, собранные в неправильной пробирке с антикоагулянтом или образцами сыворотки, не должны анализироваться и должны быть отклонены. Стабильность образцов гемостаза зависит от того, какой анализ должен проводиться, а также температуры и условий хранения. После сбора образцы должны быть доставлены в лабораторию при комнатной температуре быстро, идеально в течение одного часа после нанесения. В зависимости от заказанных образцов и наличия в образце нефракционированного гепарина образцы могут храниться либо в виде цельной крови, либо при центрифугировании, а остальная плазма остается на красных клетках или в аликвоте.

6-8 мкг/70-140%

XI. Предшественник тромбопластина

7 мкг/70-130%

15 мкг/15-20%

XII. Хагеманна фактор

не установлено

неизвестно

XIII. Фибриназа, фибрин-стабилизирующий фактор

Образцы для тестирования функций тромбоцитов должны оставаться при комнатной температуре, а тестирование завершено в течение 3-4 часов сбора. Образцы можно хранить в виде цельной крови или центрифугировать. Если целую кровь центрифугируют в течение 1 часа, гепаринизированную плазму можно оставлять при комнатной температуре на срок до четырех часов перед тестированием.

Образцы, которые не могут быть протестированы в этот период времени, должны быть свернуты, а плазма заморожена в морозильной камере, которая не подвергается автоматическим циклам замораживания замораживания. Это особенно важно, если плазма будет заморожена перед тестированием. Перед испытанием образцы должны быть полностью разморожены в водяной бане с температурой 37 ° С и тщательно перемешаны перед испытанием. Внутренний контроль качества.

не установлено

Методы исследования системы гемостаза

Клинико-функциональные пробы при исследовании сосудисто-тромбоцитарного звена системы гемостаза: определение ломкости микрососудов с помощью пробы манжеточной компрессии (проба Кончаловского-Румпель-Лееде); определение времени кровотечения из микрососудов без дополнительной компрессии (проба Дьюка с проколом уха и др.), либо на фоне венозного стаза (сдавление плеча манжетой до 40 мм.рт.ст. с проколами или надрезами кожи предплечья) – пробы Айви и Борхгревинка и др.

Этот процесс выполняется для каждого тестируемого аналита и с использованием временного кадра, подходящего для каждого проведенного теста. Для тестов, выполняемых партиями, может быть целесообразно выполнять элементы управления в начале, середине и конце тестового прогона. Следует вести учет изменений в количестве партий реагентов и различий между контролируемыми партиями реагентов. Повторная калибровка может потребоваться для конкретных анализов. Для каждого анализируемого анализа используется несколько уровней контроля.

Некоторые примеры приведены в таблице. Некоторые спецификации контроля качества для коагуляции и гемостаза. В этом случае, например, одна проблема включает сбор и транспортировку свежей крови для обеспечения функциональных тромбоцитов для тестирования. Поэтому для агрегации тромбоцитов это должно идеально включать нормальный контроль с каждой выполняемой функцией тромбоцитов. Нормальный контроль также должен выполняться с каждой новой массой реагентов. Хотя это может показаться простым, это не лишено проблем.

Лабораторные методы :

измерение числа и функции тромбоцитов (адгезия, агрегация) путем микроскопии или с использованием гематологических анализаторов (при скрининговых исследованиях) и агрегометров;

функциональные коагуляционные, или так называемые клоттинговые (по оценке времени свертывания мануально или с использованием коагулометров разных конструкций);

Коммерческого контрольного материала не существует. Аномальный контрольный материал должен быть получен от пациентов с известными дефектами или с антитромбоцитарными агентами. Предоставление нормальных доноров для предоставления свежих тромбоцитов также является проблемой, особенно для небольших лабораторий, где «добровольцы» могут быть в дефиците. Существуют также очевидные этические проблемы, связанные с этими инвазивными процедурами, которые регулярно повторяются у нормальных и пациентов-добровольцев.

Однако, хотя это может быть достигнуто в крупных лабораториях, это обычно не представляется возможным для большинства испытательных лабораторий. Можно контролировать индивидуальный лабораторный уклон и дрейф, а также точность и точность. Например, Королевский колледж патологов программы обеспечения качества гематологии Австралии предлагает участникам сводные данные по программе на весь год, чтобы дать обзор долгосрочных результатов лабораторных исследований. Отчеты о завершении цикла также обеспечивают статистический анализ результатов для каждого аналита в течение года исследования.

определение параметров фибринолиза;

амидолитические (тесты с использованием хромогенных субстратов к тромбину, плазмину, фактору Xа, XIIIа и др., и фотометров с фиксированной длиной волны измерений);

иммунологические методы, позволяющие выявить уровень искомого антигена или антител при АФС и др.

выявление генетических аномалий методом ПЦР (мутации Лейден-резистентности фактора Vа к активированному протеину С, гена протромбина G 20210, гена метилентетрагидрофолатредуктазы и др.).

Это в значительной степени осуществляется колледжем американских патологов. Если проблема возникает более чем в одном опросе, тогда лаборатория должна быть инициативной в решении проблемы. Важность внешнего контроля качества. Все программы имеют ценность, хотя экономия на масштабе для некоторых аналитов будет способствовать более крупным или международным программам.

Это, в свою очередь, обеспечит более правильные диагнозы и более безопасную помощь пациента клиницистами, что является основной целью лабораторных процедур. Поскольку как методология тестирования, так и составные тесты, выполненные внутри панели, могут влиять на точность обнаружения специфических маркеров тромбофилии, оценка практики тестирования путем оценки лабораторного теста с использованием мультилабораторных исследований считается основной необходимостью в лабораторной практике.

Тесты для оценки сосудисто-тромбоцитарного компонента гемостаза

При тромбоцитопениях, тяжелых тромбоцитопатиях и при дефиците фактора Виллебранда (ФВ) значительно удлиняется время кровотечения. Кровоточивость связана с недостаточностью адгезивно-агрегационной функции тромбоцитов – нарушением образования в поврежденных сосудах тромбоцитарной пробки. Это может быть обусловлено либо значительным снижением количества тромбоцитов в крови, либо их дисфункцией, в основе которой чаще всего лежит отсутствие или блокада на мембране тромбоцитов рецепторов, взаимодействующих со стимуляторами (агонистами) агрегации этих клеток (ФВ, адреналином, АДФ, фибриногеном, арахидоновой кислотой и простагландинами), либо отсутствием в тромбоцитах или нарушением выхода из них компонентов гранул, содержащих эти стимуляторы агрегации. Качественные дефекты тромбоцитов, лежащие в основе большого числа геморрагических диатезов, подразделяют на следующие группы:

Несмотря на эти усилия, тестирование по-прежнему страдает от множества методологических проблем и нестандартизации в тестовой практике. На способность отдельных лабораторий сделать соответствующий диагноз повлиял выбор и применение метода испытаний. Исследования ингибиторов факторов.

Короче говоря, высокая вариабельность между анализом результатов анализа последовательно наблюдалась во всех отчетах, с небольшим или вообще отсутствием улучшения за последнее десятилетие. Более 80% участников обычно выполняют по крайней мере один функциональный анализ, а в ~ 40% случаев выполняют оба теста. В более поздних отчетах был изучен вопрос об ошибках диагностических ошибок интерпретации, связанных с методологией и тестовыми панелями.

    дезагрегационные тромбоцитопатии, обусловленные отсутствием или блокадой мембранных рецепторов этих клеток (тромбастения Гланцмана и др.);

    болезни отсутствия плотных и?-гранул;

    нарушения высвобождения гранул;

    нарушения образования циклических простагландинов и тромбоксана А2;

    дефицит, аномалии и нарушения мультимерности ФВ;

    Интересно отметить, что автоматизация многих из этих тестовых процедур за последние несколько лет не улучшила нижний предел чувствительности в диагностической лаборатории гемостаза. Использовать широкий спектр соответствующих мер контроля. Регулировать концентрацию тестовой плазмы в соответствии с допусками анализа; а также.

    Как можно более полную тестовую панель. Рекомендации по улучшению качества свертывания крови и гемостаза. Ряд организаций предоставляют рекомендации по улучшению процесса тестирования коагуляции и гемостаза. Тропа гемостаза очень сложна и включает в себя различные элементы активации и регуляции. Исследование аберрантного гемостаза или мониторинг антикоагулянтной терапии требует выполнения множества тестовых процедур. На них, в свою очередь, могут влиять многие факторы, начиная от антикоагулянтной терапии, болезней печени и инфекций, в дополнение к врожденным и приобретенным дефектам.

    нарушения обмена нуклеотидов и транспорта кальция.

Время кровотечения

Время кровотечения - это время от момента нанесения стандартной раны кожи до момента прекращения вытекания крови. Оно характеризует функциональную активность тромбоцитов и взаимодействие тромбоцитов с сосудистой стенкой. Время кровотечения не выявляет всех тромбоцитарных нарушений (такого метода вообще не существует), этот скрининговый тест позволяет заподозрить тромбоцитопатии различного генеза, болезнь Виллебранда и нарушения проагрегантных свойств сосудистой стенки. После выявления патологии нет необходимости повторять это исследование, нужно использовать более чувствительные и специфические методы. У этого метода есть серьезные недостатки:

В каждой лаборатории должны быть установлены конкретные процедуры сбора проб, подготовки проб, эффективности испытаний и обеспечения качества, чтобы обеспечить получение точных и надежных результатов для обеспечения надлежащего управления пациентами и ухода за ними. Об этом свидетельствуют различные примеры этого обзора.

Внешнее обеспечение качества при тромбозе и гемостазе: международная перспектива. Модель системы качества для здравоохранения: утвержденный руководящий принцип. Общее качество в лабораторной диагностике. Пришло время думать нестандартно. Лабораторные ошибки: как улучшить до - и пост-аналитические этапы?

      Метод плохо стандартизируется. Результаты теста позволяют лишь предположить наличие тех или иных нарушений.

      Низкая чувствительность. Отсутствие удлинения времени кровотечения не всегда позволяет исключить нарушения тромбоцитарного или сосудистого звеньев гемостаза.

      Низкая специфичность не позволяет однозначно интерпретировать результаты метода.

      Контроль качества при тестировании коагуляции. Преаналитические и постаналитические переменные: ведущие причины диагностической ошибки при гемостазе? Вехи и перспективы коагуляции и гемостаза. Обновление по патофизиологии и классификации болезни фон Виллебранда: доклад Подкомитета по фон Виллебранда.

      Тестирование агрегации тромбоцитов и тромбоцитов. Лабораторная оценка семейного, нетрубоцитопенического кровоточивости: окончательный диагноз часто невозможен. Уровень лабораторных испытаний, необходимых для диагностики или исключения нарушения функции тромбоцитов с использованием агрегации тромбоцитов и анализа секреции. Лабораторное исследование тромбофилии: хорошее, плохое и уродливое.

      Не соответствует современным санитарно-эпидемиологическим требованиям.

Публикации по теме